| Project/Area Number |
22K18236
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 90140:Medical technology assessment-related
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| Research Institution | National Institute of Advanced Industrial Science and Technology |
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Principal Investigator |
MUKAE Takehiro 国立研究開発法人産業技術総合研究所, 生命工学領域, 研究員 (40803309)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
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| Keywords | バイオものづくり / ゲノム編集 / 組換えタンパク質 / 評価技術 / オボアルブミン / Tgニワトリ / 培養細胞 / 培養 / 動物 / 物質生産 / レギュラトリーサイエンス / ニワトリ |
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| Outline of Research at the Start |
本課題は、新しいバイオ医薬品生産細胞の樹立を目指す研究で、バイオ医薬品が大量生産・大量消費される近未来を見据え、組換えタンパク質生産体制の強靭化に資する提案です。申請者は「大量生産が得意なニワトリ生産系」と「迅速生産が要求される医薬研究」の橋渡し技術として「ニワトリ生産系と同等／同質の生産能を持つモデル細胞（OVA細胞）」の開発を目指します。そして数ミリグラムから数十キログラム程度の生産はOVA細胞を、そしてそれ以上、例えば数十トン規模の生産はゲノム編集Tgニワトリを用いた生産系を構築し、持続可能な医薬産業の発展へ現実的な解決策を提案します。
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| Outline of Final Research Achievements |
In this study, we aimed to develop a rapid evaluation system for recombinant protein production in transgenic chickens. To achieve this, we developed DF1 cells that constitutively express ovalbumin and show stable cell proliferation. First, we developed DF1 cells that constitutively express ovalbumin and characterized the developed cells using western blotting, immunostaining, real-time PCR, ELISA, and MTT assays. Next, to verify whether these cells could be used as an evaluation system for transgenic chickens producing recombinant proteins, we knocked in the IFNβ gene into these cells and evaluated the expression of IFNβ by real-time PCR, Western blot, and ELISA. In summary, we successfully developed DF1 cells constitutively expressing ovalbumin as a rapid evaluation system for transgenic chicken production.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
本研究により従来のTgニワトリ生産における組換えタンパク質の初回回収までに1.5年を要する課題が解消され、Tgニワトリ生産系の迅速かつ簡便な生産予測が可能となることが期待される。これにより、迅速かつ多品目の候補分子の生産が必要な創薬分野などでも、Tgニワトリ生産系を応用できる可能性が高まった。将来的にTgニワトリ生産系の応用分野が拡大することは、産業用途の組換えタンパク質の低コスト大量生産につながることが期待される。タンパク質は化合物に比べて副作用が少なく環境負荷も低いため、医療、農業、環境分野など様々な産業用途で社会的課題の解決に資する組換えタンパク質の利用を目指す。
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