| Project/Area Number |
22K19562
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Medium-sized Section 55:Surgery of the organs maintaining homeostasis and related fields
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
松川 昭博 岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (90264283)
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| Project Period (FY) |
2022-06-30 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
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| Keywords | エクソソーム / がん転移 / 腫瘍微小環境 / Triple negative乳がん / 転移 / がん幹細胞性 / がん |
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| Outline of Research at the Start |
本研究で、低転移性がん亜集団から放出されるエクソソームが高転移性がん亜集団の幹細胞性・転移を促進することを示す。本研究を通して、エクソソーム内のがん促進因子を同定する。体液中の促進因子の測定は、乳がん再発・転移の予測を可能にする。促進因子の抑制剤投与は新たな再発予防に繋がる。促進因子のインヒビターを入れた人工エクソソームによる新規乳がん治療法の開発を目指す。予後不良（10年無再発生存率50-60%）のTNBC乳がんの標準療法は確立していない。本研究は、エクソソームに着目し、乳がんの転移・予後予測、新規治療法開発を目指す世界初の試みであり、挑戦的研究として意義は極めて大きい。
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| Outline of Annual Research Achievements |
●MAPK/ERKの内因性抑制物質SPRED2に着目した検討
・データベースの検討から、SPRED2発現はエクソソーム関連マーカー（CD9/CD81）と負の相関を示すことを見出した。・食道がん細胞株 TE4（SPRED2_High）およびTE8（SPRED2_Low）を用いて、それぞれSPRED2を消去（si-SPRED2/siSP2）および過剰発現（SPRED2-OE/SP2OE）したところ、エクソソーム放出量は増加および減少する結果を得ている・エクソソーム分泌に働くSNAREの発現（VAMP2, SNAP25）はSPRED2で調整される。・SPRED2を消去したTE4（siSP2)、過剰発現したTE8 (SP2OE) 細胞由来エクソソーム（TE4-siSP2、TE8-SP2OE）をそれぞれTE4/TE8細胞に添加すると、コントロール(CTNR)エクソソーム添加に比べて細胞増殖は亢進／抑制する（MTTアッセイ）ことを見出している・SPRED2の発現改変によってエクソソーム内のIL-6産生に差があることを見出している。・IL-6の発現の差異から、STAT3シグナル伝達への違いが生じ、腫瘍微小環境でのマクロファージの機能に変化がでると考え、実験中である。
●Triple negative乳がん細胞株4T1 細胞の研究
・高転移性がん(HM.4T1)と低転移性がん(LM.4T1)から分泌されるエクソソームを単離し、アレイ検索を行い、２者での違いを検索した結果、ヒストン分子の発現に大きな違いがあることを見出した。・アレイ検索の結果をもとにタンパク発現をWestern blotで比較検討したところ、アレイ結果と同様、HIST3H2Aの発現量に差異を確認した。・現在、HIST3H2A発現の違いが細胞機能に与える影響を確認中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
これまでにTriple negative乳がん細胞株4T1 とエクソソームに関する英文論文２報を報告した。継続して、Triple negative乳がん細胞株4T1 細胞由来高転移性がん(HM.4T1)と低転移性がん(LM.4T1)から分泌されるエクソソームの質的違いの検討から、ヒストン分子に着目しており、ヒストンの新たな機能解析に取組んでいる。また、SPRED2に着目し、エクソソーム分泌の変化による腫瘍微小環境への影響についての研究が進行し新たな知見を得ている。
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| Strategy for Future Research Activity |
●Triple negative乳がん細胞株の２亜集団の違いとしてヒストン発現の違いが、どのように腫瘍の増殖・転移能に影響を及ぼすかを検討する。
●エクソソーム分泌のメカ二ムズとして、がん増殖・進展に関わる、ERK-MAPKが考えられており、ERK-MAPKの内因性抑制因子であるSpred2によるエクソソームの分泌抑制を明らかにしている。SPRED2によるエクソソーム内包物の違いによる腫瘍周囲環境の変化をマクロファージに着目して進める。
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