がん組織環境中の細胞外小胞を介した相互作用の時空間的解析
Project/Area Number |
22K20805
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Research Category |
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Review Section |
0901:Oncology and related fields
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Research Institution | Waseda University |
Principal Investigator |
西田 奈央 早稲田大学, 高等研究所, 講師(任期付) (80737114)
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Project Period (FY) |
2022-08-31 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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Keywords | 細胞外小胞 / エクソソーム / がん微小環境 / 3D組織モデル / 乳がん |
Outline of Research at the Start |
がん組織はがん細胞・正常細胞・細胞外マトリックスが密に詰まった構造を持ち、その中でがん細胞は細胞外小胞(Extracellular vesicles, EVs)を受け渡し周囲の正常細胞をがん促進性に改変している。本研究はがん組織という構造の中で、がん細胞から正常細胞への細胞外小胞の受け渡しを定量的・時空間的に理解することを目標とする。ある細胞から分泌されたEVが到達する範囲と目的の細胞を特定するとともに、受け渡しに影響するEV表面の構造を特定する。さらに、細胞外小胞を介した相互作用が、がん組織という環境を形成・維持するための役割を解明する。
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Outline of Annual Research Achievements |
本研究はがん組織という構造の中で、がん細胞から正常細胞への細胞外小胞の受け渡しを定量的・時空間的に理解することを目標としている。本年度は、細胞外小胞を詳細に観察するため、高感度な細胞外小胞ラベルを最適化した。細胞外小胞の表面タンパク質をCD9, CD63, CD81に対して蛍光ラベルを融合させた融合タンパク質を設計し、乳がん細胞に導入して安定発現株を作製した。次に、がん組織を実験室で培養維持できる組織スライスモデルを最適化し、組織スライス上に存在する細胞によってがん細胞外小胞が取りこまれる様を観察できることを実証した。さらに、組織スライスを応用して乳がんの臓器転移モデルを作製し、がん細胞由来の細胞外小胞が周囲のがん以外の細胞に取り込まれる様子を観察することに成功した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画通り、細胞外小胞の高感度な蛍光標識方法を開発、最適化し、また組織スライス上での細胞外小胞の観察に成功したため。一方で、細胞外小胞を取り込んだ細胞の検出に関してはまだ課題が残るので、次年度も継続して最適化する。
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Strategy for Future Research Activity |
がん由来の細胞外小胞を取り込んだ細胞を特定するための手技を最適化する。まずは、細胞外小胞由来の蛍光を指標に、フローサイトメトリーで細胞の種類を特定する。次に、空間的な分布を観察するために、組織内の細胞を生きたままラベルする手法、顕微鏡による観察手技の最適化も行う。さらに、悪性度が異なる乳がんや他のがん細胞でも同様な観察を行い、細胞外小胞の受け渡しの違いによるによるがんの悪性化を理解する。
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Report
(1 results)
Research Products
(5 results)