歯周病原細菌P.gingivalisの線毛における新たな遺伝子型解析
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22K21050
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
0907:Oral science and related fields
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| Research Institution | Aichi Gakuin University |
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Principal Investigator |
榮 宏太朗 愛知学院大学, 歯学部, 歯学部研究員 (60962818)
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| Project Period (FY) |
2022-08-31 – 2024-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | P.gingivalis / 線毛 / 遺伝子型 / 歯周病 / Porphyromonas gingivalis / 歯周病原細菌 / FimA線毛・Mfa1線毛 / プライマー設計 / 相同性解析 / 遺伝子型分類 / バイオフィルム |
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| Outline of Research at the Start |
本研究では、歯周病患者の歯肉縁下プラーク(バイオフィルム)から歯周病の代表的な原因細菌として知られているPorphyromonas gingivalisを歯科用器具で採取し、歯周病の重症度との関連を調査する。
そして、P.gingivalisの付着因子であるFimA線毛及びバイオフィルム形成の調節に関わっていることが報告されているMfa1線毛の線毛遺伝子群の遺伝子型分類を行い、全ての線毛因子の遺伝子型を決定し、臨床症状と線毛型との関連を統計学的に解析する。
さらに、異なる遺伝子型における線毛機能解析に発展させ、mfa1遺伝子型間でのバイオフィルム形成能を比較する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯周病関連菌Porphyromonas gingivalisは付着因子として二種の異なる線毛であるFimAおよびMfa1線毛を保有する。FimA線毛およびMfa1線毛は主要成分であるFimAおよびMfa1タンパク質により構成されるが、その他に4つの微量成分FimB～FimE及びMfa2～Mfa5が含まれる。主要成分をコードするfimAはその遺伝子配列の違いにより I～V型に分類され、II型およびIV型を持つ株の病原性が高いことが報告されている。一方、mfa1型については不明な点が多いが、近年我々は、mfa1が53、70Aおよび70B型に分類されることを明らかにした。さらに、fimAおよびmfa1の下流に位置する微量成分の遺伝子型解析にも着手し、mfa2～mfa5及びfimB～fimEにおいても異なる遺伝子型が存在することも報告した。
そこで本研究では、全ての線毛成分の遺伝子型分類を可能とする手法を確立すると共に、開発した方法により歯周炎患者のFimA線毛及びMfa1線毛の遺伝子型分類を試み、臨床症状との関連性を調査すること、さらに線毛機能を明らかにすることを目的とした。
現在までに、既報のプライマー及び新規に設計したプライマーを用いたPCRにより、fimA及びmfa1のそれぞれの遺伝子型が特異的に増幅されることが確認された。一方、mfa2、mfa3、mfa4の遺伝子型分類については特異的に検出するためのプライマーセットおよびPCR条件を見いだすことはできなかった。
FimA線毛の定着における役割を明らかにするために、fimA I型を持つP. gingivalis株から線毛を精製し、プロテインマイクロアレイを実施した。その結果、線毛と結合する134個の候補タンパク質を同定することができた。今後は、線毛遺伝子型と候補タンパク質との結合能を比較検討していきたい。
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Report
(2 results)
Research Products
(7 results)
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[Presentation] 歯周病原菌D83T株のMfa1線毛の特性解析2023
Author(s)
Naoyoshi Miwa, Miyuna Fujimoto, Yoshikazu Naiki, Kotaro Sakae, Tomohiko Iwase, Kiyoshi Nisikawa, Yoshiaki Hasegawa
Organizer
第65回歯科基礎医学会（東京）
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