| Project/Area Number |
22K21099
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
0908:Society medicine, nursing, and related fields
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| Research Institution | Kawasaki Medical School |
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Principal Investigator |
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| Project Period (FY) |
2022-08-31 – 2025-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | 筋萎縮性側索硬化症 / 液-液相分離 / lncRNA / iPS細胞由来運動神経細胞 / CRISPR/dCas13 / iPS細胞由来運動神経 |
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| Outline of Research at the Start |
家族性筋萎縮性側索硬化症(ALS)患者の多くはRNA結合タンパク質をコードする遺伝子に変異をもつ。これらは複数のノンコーディングRNA(ncRNA)等と凝集し、液-液相分離と呼ばれる膜を持たない集合体を形成する。ALS患者由来の運動神経細胞では液-液相分離であるストレス顆粒が異常形成されるものの、関与するncRNAについては不明である。本研究では、ALSで発現量が変化しているncRNAをiPS細胞由来運動神経細胞でノックダウンし、ストレス顆粒の異常形成による細胞死抵抗性を指標にスクリーニングすることで、候補ncRNAを同定し、治療標的となるか検証する。
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| Outline of Final Research Achievements |
Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal motor neuron disease. In the motor neurons of ALS patients, abnormal aggregation formation and liquid-liquid phase separation (LLPS) are known to occur. Since the number of potential RNA sequences involved in LLPS is vast, developing an efficient screening method is crucial. In this study, we conducted a screening of approximately 30,000 candidate sequences using the CRISPR/dCas13 system in iPSC derived motor neurons.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
近年RNAを標的とした創薬技術は飛躍的に発展している。これらの核酸医薬の開発においてまずボトルネックとなるのが標的配列の抽出戦略である。本研究では、RNAの構造予測を基盤とした標的配列抽出技術と、CRISPR/dCas13を応用した大規模スクリーニング技術を組み合わせることで膨大な候補から効率よく配列を抽出できることを実証した。
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