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細胞外小胞が内包する分子の動態解明と新しい牛伝染性リンパ腫モニタリング技術の開発

Research Project

Project/Area Number 22KF0161
Project/Area Number (Other) 22F22097 (2022)
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeMulti-year Fund (2023)
Single-year Grants (2022)
Section外国
Review Section Basic Section 42020:Veterinary medical science-related
Research InstitutionGifu University

Principal Investigator

猪島 康雄  岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (20355184)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) RAHMAN MD. MATIUR  岐阜大学, 応用生物科学部, 外国人特別研究員
Project Period (FY) 2023-03-08 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Keywords細胞外小胞 / 牛伝染性リンパ腫 / BLV / EBL / モニタリング
Outline of Research at the Start

牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)感染牛のうち、牛伝染性リンパ腫(EBL)を発症するのは、わずか1~5%であり、BLV感染量が増加しても発症しない感染牛がほとんどであり、発症の原因はいまだ不明である。
本研究では、生体の健康状態により、内包する核酸やタンパク質などの分子の種類と量がダイナミックに変化する50~150nmサイズの細胞外小胞(EV)に着目し、EVが内包する分子の動態を解明し、BLV感染からEBL発症までのモニタリング技術を開発する。

Outline of Annual Research Achievements

牛伝染性リンパ腫(EBL)は、牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)感染を原因とするが、BLV感染牛のうちEBLを発症するのはわずか1~5%だけであり、いまだ発症要因は解明されていない。毎年発症頭数が増加しており、大きな経済的損失をもたらしている。
本研究では、牛の生乳中の細胞外小胞(EV)に着目した。EVは、あらゆる細胞から分泌され、宿主の生体環境を反映してEVが内包する分子の種類と量が変動することが知られており、ヒトではがん診断に活用されている。EBLは牛のB細胞性リンパ腫、血液のがんであることから、EV内の分子を網羅的に解析し、内包分子がリンパ腫発症までの過程でどのような動態を示すのか解明し、新しいEBLのモニタリング技術を確立することを目指す。
最終年度である本年度は、前年度に得た成果をもとに以下の研究を進めた。①大学附属の酪農場、民間の酪農場で採血し、BLV感染量をリアルタイムPCRで定量した。おおよそ月齢を合わせた牛を選択し、BLVに感染していない健康牛6頭、BLV低コピー感染牛(BLV感染前期)8頭、およびBLV高コピー感染牛(BLV感染後期)18頭、合わせて32頭から生乳を収集し、それら3群の検体として分けた。②生乳中のEVを分離・精製後、内包するmRNAを抽出し、前年度にEBL発症を反映する生乳中のバイオマーカー候補として同定したmRNAについて、3群の生乳EV内包量を定量し、ウイルス感染量に依存し内包量も変化するのか検討した。
その結果、予想に反し、生乳EV中の2種のバイオマーカー候補mRNA内包量は、健康牛と比べBLV低コピー感染牛で有意に増加するが、BLV高コピー感染牛では減少し健康牛と有意差が認められなかった。以上より、生乳EVが内包するEBL発症バイオマーカー候補としたmRNA量は、ウイルス感染量とは異なる動態を示すことが示唆された。

Report

(2 results)
  • 2023 Annual Research Report
  • 2022 Annual Research Report
  • Research Products

    (24 results)

All 2024 2023 2022 Other

All Journal Article (9 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 9 results,  Open Access: 7 results) Presentation (12 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 1 results) Remarks (3 results)

  • [Journal Article] 肉用牛における牛伝染性リンパ腫ウイルス感染と枝肉成績との関連2024

    • Author(s)
      松橋珠子、朝川昇、村瀬華梨、加藤大樹、松本和也、猪島康雄、白木琢磨
    • Journal Title

      肉用牛研究会報

      Volume: 116 Pages: 30-30

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Characterization of mRNA signature in milk small extracellular vesicles from cattle infected with bovine leukemia virus2023

    • Author(s)
      Rahman Md. Matiur、Ishikawa Hinata、Yamauchi Marika、Takashima Shigeo、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • Journal Title

      Pathogens

      Volume: 12 Issue: 10 Pages: 1239-1239

    • DOI

      10.3390/pathogens12101239

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Exploration of microRNA biomarkers in blood small extracellular vesicles for enzootic bovine leukosis2023

    • Author(s)
      Takada Akane、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • Journal Title

      Microorganisms

      Volume: 11 Issue: 9 Pages: 2173-2173

    • DOI

      10.3390/microorganisms11092173

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Identification of Suitable Internal Control miRNAs in Bovine Milk Small Extracellular Vesicles for Normalization in Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction2023

    • Author(s)
      Rahman Md. Matiur、Nakanishi Ryoka、Tsukada Fumi、Takashima Shigeo、Wakihara Yoshiko、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • Journal Title

      Membranes

      Volume: 13 Issue: 2 Pages: 185-185

    • DOI

      10.3390/membranes13020185

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      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Measures to Control Adult Houseflies (<i>Musca domestica</i>) And Stable Flies (<i>Stomoxys calcitrans</i>) To Prevent the Spread of Viral Diseases in Cattle Barns2023

    • Author(s)
      清水薫、岡田彩加、猪島康雄
    • Journal Title

      Journal of the Japan Veterinary Medical Association

      Volume: 76 Issue: 6 Pages: e149-e156

    • DOI

      10.12935/jvma.76.e149

    • ISSN
      0446-6454, 2186-0211
    • Related Report
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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] 牛伝染性リンパ腫ウイルス感染を早期に検出する新規バイオマーカーの探索2023

    • Author(s)
      車取侑香、古谷眞椰、猪島康雄、松本和也、白木琢磨、松橋珠子
    • Journal Title

      肉用牛研究会報

      Volume: 114 Pages: 28-28

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      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Comparing microRNA in milk small extracellular vesicles among healthy cattle and cattle at high risk for bovine leukemia virus transmission2022

    • Author(s)
      Nakanishi Ryoka、Takashima Shigeo、Wakihara Yoshiko、Kamatari Yuji O.、Kitamura Yuko、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • Journal Title

      Journal of Dairy Science

      Volume: 105 Issue: 6 Pages: 5370-5380

    • DOI

      10.3168/jds.2021-20989

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      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Characterization of miRNAs in Milk Small Extracellular Vesicles from Enzootic Bovine Leukosis Cattle2022

    • Author(s)
      Tsukada Fumi、Takashima Shigeo、Wakihara Yoshiko、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • Journal Title

      International Journal of Molecular Sciences

      Volume: 23 Issue: 18 Pages: 10782-10782

    • DOI

      10.3390/ijms231810782

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      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Identification of Potential mRNA Biomarkers in Milk Small Extracellular Vesicles of Enzootic Bovine Leukosis Cattle2022

    • Author(s)
      Hiraoka Mami、Takashima Shigeo、Wakihara Yoshiko、Kamatari Yuji O.、Shimizu Kaori、Okada Ayaka、Inoshima Yasuo
    • Journal Title

      Viruses

      Volume: 14 Issue: 5 Pages: 1022-1022

    • DOI

      10.3390/v14051022

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      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 生乳中のEBLバイオマーカー分子の探索2023

    • Author(s)
      猪島康雄
    • Organizer
      動物用ワクチンーバイオ医薬品研究会 2023年度シンポジウム
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      2023 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Identification of suitable internal control mRNAs and miRNAs in bovine milk small extracellular vesicles for normalization in quantitative real-time polymerase chain reaction2023

    • Author(s)
      Md. Matiur Rahman, Ryoka Nakanishi, Fumi Tsukada, Shigeo Takashima, Yuji O. Kamatari, Kaori Shimizu, Ayaka Okada, Yasuo Inoshima
    • Organizer
      International Society for Extracellular Vesicles 2023 Annual Meeting
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 肉用牛における牛伝染性リンパ腫ウイルス感染と枝肉成績との関連2023

    • Author(s)
      松橋珠子、朝川昇、村瀬華梨、加藤大樹、松本和也、猪島康雄、白木琢磨
    • Organizer
      第60回(令和5年)肉用牛研究会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 牛伝染性リンパ腫発症を反映する血液エクソソーム内包miRNAバイオマーカーの探索2022

    • Author(s)
      高田秋音、 松橋珠子、 岡田彩加、 猪島康雄
    • Organizer
      令和4年度獣医学術中部地区学会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 牛伝染性リンパ腫ウイルス感染ステージによる生乳エクソソームに含まれるhsa-miR-424-5pの動態2022

    • Author(s)
      守安政太、 岡田彩加、 猪島康雄
    • Organizer
      令和4年度獣医学術中部地区学会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 血液エクソソームにおける牛伝染性リンパ腫発症を反映するmiRNAバイオマーカーの探索2022

    • Author(s)
      高田秋音、 松橋珠子、 岡田彩加、 猪島康雄
    • Organizer
      第165回日本獣医学会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 牛伝染性リンパ腫ウイルス感染牛のウイルスコピー数と生乳エクソソーム中のhsa-miR-424-5p内包量との相関2022

    • Author(s)
      守安政太、 岡田彩加、 猪島康雄
    • Organizer
      第165回日本獣医学会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 生乳エクソソーム中miRNA量と牛伝染性リンパ腫ウイルス感染量との相関2022

    • Author(s)
      守安政太、髙田秋音、岡田彩加、猪島康雄
    • Organizer
      第9回日本細胞外小胞学会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] リアルタイムPCRのノーマライゼーションに用いる牛乳エクソソーム中の内在性コントロールmiRNAsの同定2022

    • Author(s)
      エムディ マティウル ラハマン, 中西諒花, 塚田文, 清水薫, 岡田彩加, 猪島康雄
    • Organizer
      第9回日本細胞外小胞学会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 牛伝染性リンパ腫ウイルス感染を早期に検出する新規バイオマーカー の探索2022

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      車取侑香、古谷眞椰、猪島康雄、松本和也、白木琢磨、松橋珠子
    • Organizer
      第59回肉用牛研究会和歌山大会
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  • [Presentation] 牛伝染性リンパ腫発症を反映する血液エクソソーム内包miRNAバイオマーカーの探索2022

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      高田秋音、 松橋珠子、 岡田彩加、 猪島康雄
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      第40回日本獣医師会獣医学術学会年次大会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] Development of a monitoring method for high risk cattle of bovine leukemia virus transmission and onset of enzootic bovine leukosis using milk exosomes2022

    • Author(s)
      Md. Matiur Rahman, Shigeo Takashima, Yuji O. Kamatari, Kaori Shimizu, Ayaka Okada, Yasuo Inoshima
    • Organizer
      第29回アジア獣医師会連合(FAVA)大会
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    • Int'l Joint Research
  • [Remarks] 岐阜大学応用生物科学部共同獣医学科食品環境衛生学研究室 研究業績

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      https://www.abios.gifu-u.ac.jp/education-member/vetpage/inoshima/achievement.html

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  • [Remarks] 岐阜大学応用生物科学部附属家畜衛生地域連携教育研究センターGeFAH 研究業績

    • URL

      https://www.abios.gifu-u.ac.jp/gefah/achievement.html

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      2023 Annual Research Report 2022 Annual Research Report
  • [Remarks] 岐阜大学応用生物科学部食品環境衛生学研究室 研究業績

    • URL

      https://www.abios.gifu-u.ac.jp/education-member/vetpage/inoshima/achievement.html

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      2022 Annual Research Report

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Published: 2022-04-28   Modified: 2024-12-25  

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