日本における有尾類致死性菌イモリツボカビの初モニタリング研究

• Project/Area Number: 22KF0320
• Project/Area Number (Other): 22F22751 (2022)
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Multi-year Fund (2023); Single-year Grants (2022)
• Section: 外国
• Review Section: Basic Section 45040:Ecology and environment-related
• Research Institution: University of the Ryukyus
• Principal Investigator: 富永 篤 琉球大学, 教育学部, 教授 (60452968)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): LASTRA GONZALEZ DAVID 琉球大学, 教育学部, 外国人特別研究員
• Project Period (FY): 2023-03-08 – 2025-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000); Fiscal Year 2024: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000); Fiscal Year 2023: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000); Fiscal Year 2022: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
• Keywords: イモリツボカビ / カエルツボカビ / qPCR / 有尾類 / 感染状況

Outline of Research at the Start

ヨーロッパの有尾類で、致死的影響を与えているイモリツボカビの日本産の種の感染状況を多くの検体で解析する。これまで感染が確認されているアカハライモリやシリケンイモリなどを中心に、野外に生息する国内の多くの有尾類からスワブサンプルをえて、ｑPCRにより感染の有無を確認する。既知の情報と比較することなどにより、野外での感染状況についてのモニタリングを行う。

Outline of Annual Research Achievements

今年度は、北海道から沖縄までの野外の約1010個体のサンプルに加えて、飼育下の48種約290個体分の両生類のスワブサンプルを採材して、qPCR、PCR＋サンガーシーケンサーによる配列確認の2種類の方法で、イモリツボカビの検出を行った。また、同じサンプルを用いて、カエルツボカビの検出もｑPCRによって行った。その結果、野外の個体では４個体のみがｑPCRでイモリツボカビ陽性と判定された。また、ｑPCRで増幅結果が疑わしいと判断された個体を中心にPCRで増幅確認し、その産物の配列をサンガーシーケンサーで確認した。その結果、6個体からNCBIに登録されているイモリツボカビを１００％一致の配列が得られた。これらもイモリツボカビ陽性と判断した。沖縄のシリケンイモリを含む野外の有尾類数種がイモリツボカビが検出された。また、野外のサンプルでは、イモリツボカビとカエルツボカビの両方が陽性となるサンプルも確認できた。飼育下のサンプルからはｑPCRでは検出されなかったが、PCR産物の配列データでイモリツボカビの配列が得られたものが複数あり、それらは陽性と判断した。これらについて、野外のデータと飼育下の両生類のデータをそれぞれ別に二つの原稿にまとめて現在投稿中である。

Current Status of Research Progress

1: Research has progressed more than it was originally planned.

Reason

予定していた研究計画は順調に進んでおり、さらにイモリツボカビの検出方法に関する新たな研究計画なども進めており、成果としての論文も投稿中である。

Strategy for Future Research Activity

最終年度になる2024年度は、得られたデータをできるだけ論文化し、国際学会で発表することを検討しいる。