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病原性大腸菌におけるTAシステムの選択的遺伝子発現制御についての解析

Research Project

Project/Area Number 22KJ2144
Project/Area Number (Other) 22J11931 (2022)
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeMulti-year Fund (2023)
Single-year Grants (2022)
Section国内
Review Section Basic Section 49050:Bacteriology-related
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

海老原 慎也 (2023)  大阪大学, 免疫学フロンティア研究センター, 特別研究員(PD)

Research Fellow 海老原 慎也 (2022)  大阪大学, 免疫学フロンティア研究センター, 特別研究員(PD)
Project Period (FY) 2023-03-08 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Fiscal Year 2023: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2022: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Keywords腸管出血性大腸菌 / Toxin-Antitoxinシステム / 酸化ストレス
Outline of Research at the Start

Toxin-antitoxin (TA)システムは、菌に広く保存されている遺伝子システムであり、ストレス環境に応答して活性化し細菌自身の増殖を抑制することが知られているが、細菌生理における役割は未だ不明である。我々は腸管出血性大腸菌が保有する新規のTAシステム遺伝子ECs5400-5399に着目し、このシステムは実際の発現レベルでは増殖に影響せず遺伝子発現を制御することを示したが、このシステムが活性化する条件についてはまだ不明であった。そこで、本研究はこのTAシステムが活性化する条件を解明することで、TAシステムの細菌生理における役割について明らかにすることを目的に研究を行う。

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、腸管出血性大腸菌(EHEC)において新規に見出されたToxin-Antitoxin (TA)システム遺伝子swpABについて、細菌生理における役割と病原性への影響について調べることである。本年度は主にswpABシステムが活性化する環境条件について明らかにすることを目的に研究を行なった。まず初めに細菌を好気培養し経時的にswpABプロモーター活性を測定したところ、増殖相の後期において顕著に活性が上昇した。この上昇が好気培養による活性酸素種(ROS)の蓄積によるものと予想し、ROSの蓄積を阻害するチオ尿素(TU)を培地中に添加したところ、プロモーター活性の上昇が消失した。さらに、ROSの蓄積を誘導する薬剤であるノルフロキサシン(Nor)を増殖に影響しない濃度で培地中に添加すると、プロモーター活性が顕著に増加し、TUの添加により活性上昇が消失した。これらのことから、本システムはROSの蓄積による酸化ストレスによって活性化されることが示唆された。また、SwpA トキシンの直接的な標的であるtirについて、野生株とswpAB変異株においてNorを添加し酸化ストレスを誘導したところ、野生株ではTirの産生量が低下したのに対しswpAB変異株では産生量が変化しなかった。これらのことから、酸化ストレスに応答してSwpA トキシンが活性化されることが示唆された。前年度の報告によりSwpAは増殖に影響しないレベルで遺伝子発現パターンを変化させることが示唆されていることから、swpABシステムは酸化ストレスに応答し遺伝子発現パターンを改変することで、他の菌と比較して有利な生存をもたらす可能性がある。

Report

(2 results)
  • 2023 Annual Research Report
  • 2022 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2024 2023 2022

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] A novel toxin-antitoxin system swpAB alters gene expression patterns and reduces virulence expression in enterohemorrhagic Escherichia coli.2023

    • Author(s)
      Ebihara S, Yen H, Tobe T.
    • Journal Title

      Microbiol Immunol.

      Volume: 67 Issue: 4 Pages: 171-184

    • DOI

      10.1111/1348-0421.13054

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 腸管出血性大腸菌が保有するToxin-Antitoxinシステム swpABは酸化ストレスに応答して活性化される2024

    • Author(s)
      海老原慎也、彦田明日花、小嶋里奈、戸邉亨
    • Organizer
      第18回日本ゲノム微生物学会年会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] Toxin-Antitoxin system alters gene expression patterns and reduces virulence gene expression in EHEC2023

    • Author(s)
      海老原慎也、顔宏哲、戸邉亨
    • Organizer
      第96回日本細菌学会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 腸管出血性大腸菌におけるToxin-antitoxinシステムは病原性遺伝子発現を抑制する2022

    • Author(s)
      海老原慎也、顔宏哲、戸邉亨
    • Organizer
      第1回総合微生物学研究会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] Toxin-Antitoxin system in enterohaemorrhagic Escherichia coli is induced by sublethal dose of norfloxacin2022

    • Author(s)
      海老原慎也、彦田明日花、小嶋里奈、戸邉亨
    • Organizer
      第75回日本細菌学会関西支部
    • Related Report
      2022 Annual Research Report

URL: 

Published: 2022-04-28   Modified: 2024-12-25  

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