| Project/Area Number |
22KJ2901
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| Project/Area Number (Other) |
22J00010 (2022)
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Multi-year Fund (2023)
Single-year Grants (2022) |
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| Section | 国内 |
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| Review Section |
Basic Section 43050:Genome biology-related
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| Research Institution | Waseda University |
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Principal Investigator |
川崎 純菜 早稲田大学, 理工学術院, 特別研究員(PD)
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| Project Period (FY) |
2023-03-08 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | 転移因子 / 機能ゲノミクス / ゲノム進化 / RNA二次構造 / 軍拡競争 |
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| Outline of Research at the Start |
転移因子(TE)は自身のコピーを異なるゲノム位置に挿入する能力を持つDNA配列であり、ヒトゲノムの40%以上を占める。長年、TEは生物ゲノムを損傷・侵略する「ゲノム寄生体」であるとされてきた。一方で、TEに由来する機能配列が遺伝子の発現量や局在を変化させ、新たな生理機能の獲得をもたらした例が報告されている。しかし、TEにおける機能配列がどのように出現し、ヒトゲノム進化に寄与してきたのかは未解明のままとなっている。本研究では、TEが「ゲノム寄生体」として複製するプロセスに着目し、TEの進化過程で出現・変化してきた機能配列を探索することで、TEの挿入によって獲得されたヒト遺伝子機能の解明を目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
転移因子（TE）は自身のコピーを異なるゲノム位置に挿入する能力を持つDNA配列であり、ヒトゲノムの40%以上を占める。長年TEは生物ゲノムを損傷・侵略する「ゲノム寄生体」と考えられてきた。一方で、TEの挿入によって遺伝子の発現量や局在が変化することで新たな生理機能の獲得につながった例が報告されており、TEが「新たなゲノム進化リソース」となりうることが示されてきた。興味深いことに、SINEは単独では複製できず、LINEの複製酵素に依存して増殖するため、SINEはLINEの複製機構をハイジャックするために配列を変化させてきたのに対して、LINEはSINEのハイジャックから逃れるために配列を進化させてきたと考えられている。申請者は、SINEが1つもタンパク質をコードしない点に着目し、「TE間の軍拡競争を支える分子メカニズムはRNA二次構造の多様化にある」という仮説を立てた。
昨年度に引き続き、SINE・LINE間で共進化しているRNA二次構造を同定するために、(1)共進化関係にあるLINE・SINEのペアリング、(2)SINE・LINE間で保存されているRNA二次構造の探索を試みた。特に本年度は、ハイスループットにRNA二次構造情報を取得可能なicSHAPE-seqデータの解析により、SINEとLINEの間で共進化しているRNA二次構造の探索を実施した。その結果、各SINE・LINE系統ごとにRNA二次構造の多様化が起こってきたことを見出したが、こうした構造変化がTE間の共進化にどのような影響を及ぼすか、さらには生物進化においてRNA二次構造の多様化が新たな生理機能の獲得にどのように寄与してきたかについては、さらなる検証が必要である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
SINE・LINE間で共進化しているRNA二次構造を同定するため、(1)共進化関係にあるLINE・SINEのペアリング、(2)SINE・LINE間で類似しているRNA二次構造の探索を試みた。昨年度は、in silico解析によりRNA二次構造を予測し、SINEとLINEの間での二次構造の類似性を比較することで、有意に保存されているRNA二次構造を探索したが、これらTE間において高度に保存されたRNA二次構造は同定されなかった。そこで計画を修正し、ハイスループットに構造情報を取得可能なSHAPE-seqデータ解析を実施し、各SINE・LINE系統ごとにRNA二次構造の多様化が起こってきたことを見出した。今後は、こうした構造変化がTE間の共進化にどのような影響を及ぼすか、さらには生物進化においてRNA二次構造の多様化が新たな生理機能の獲得にどのように寄与してきたかについて検証を進める予定である。
また本研究と並列して、以前発表した研究（Kawasaki et al., mBio, 2021）に関連する課題に着手している。申請者は哺乳類・鳥類に感染するRNAウイルスを大規模に同定した実績を持つが、同定されたウイルスの感染性や病原性といった性質は未解明のままとなっている。そこで申請者は、ウイルスの遺伝子配列情報のみからヒトへの感染リスクを評価する機械学習モデルの開発に取り組んだ。その結果、本モデルは多様なウイルス科において既存手法よりも高い予測性能を示した。その一方で、いずれのモデルでも予測が困難なウイルス系統が存在するという未解決課題も見出し、今後の機械学習モデルの発展に寄与する知見を得ている。これらの成果は国際誌に投稿予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度は、SINE・LINE間で共進化しているRNA二次構造を同定するため、(1)共進化関係にあるLINE・SINEのペアリング、(2)SINE・LINE間で類似しているRNA二次構造の探索に取り組んだ。しかし(2)において、SINE・LINEの配列クオリティの問題により、in silico解析ではこれらTE間で高度に保存されているRNA二次構造を同定することが難しいという課題に直面した。そのため計画を修正し、ハイスループットに構造情報を取得可能なicSHAPE-seqデータを解析し、SINE・LINEにおけるRNA二次構造の決定に取り組んだ。その結果、各SINE・LINE系統ごとにRNA二次構造の多様化が起こってきたことを見出したが、こうした構造変化がTE間の共進化にどのような影響を及ぼすか、さらには生物進化においてRNA二次構造の多様化が新たな生理機能の獲得にどのように寄与してきたかについては、さらなる検証が必要である。今後は、SINE・LINEにおいて共進化してきたと考えられるRNA二次構造が、これらTEの複製プロセスに与える影響をウェット実験により検証する。具体的には、野生型SINEおよびRNA二次構造を破壊したSINE変異体の挿入活性を、LINEを発現させた培養細胞において測定・比較する。野生型SINEと比較して、変異体の挿入活性が有意に減弱した場合、該当のRNA二次構造はSINEがLINEの複製機構をハイジャックする上で重要な機能を担っていると考えられる。また並行して、SINE・LINE間で共進化してきたRNA二次構造がどのような転写産物の発現制御に関わっているかを明らかにするため、公共データを用いたオミクス解析を実施する予定である。
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