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生物多様性を保つヒト唾液タンパク質由来能動・受動免疫型歯周病予防ワクチンの開発

Research Project

Project/Area Number 23390481
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Research Field Social dentistry
Research InstitutionThe University of Tokushima

Principal Investigator

片岡 宏介  徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 准教授 (50283792)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 伊藤 博夫  徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (40213079)
福井 誠  徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教 (50325289)
後藤 優樹  徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教 (30507455)
Project Period (FY) 2011-04-01 – 2013-03-31
Project Status Declined (Fiscal Year 2012)
Budget Amount *help
¥11,830,000 (Direct Cost: ¥9,100,000、Indirect Cost: ¥2,730,000)
Fiscal Year 2012: ¥3,640,000 (Direct Cost: ¥2,800,000、Indirect Cost: ¥840,000)
Fiscal Year 2011: ¥8,190,000 (Direct Cost: ¥6,300,000、Indirect Cost: ¥1,890,000)
Keywords歯周病 / 予防ワクチン / 唾液タンパク質 / 粘膜免疫 / 分泌型IgA抗体 / 定着阻害 / 唾液
Research Abstract

本年度の当初の検討課題は、歯周病原菌と特異結合するヒト唾液タンパク質スタセリンおよびプロリンリッチプロテイン(PRP)上の最小結合部位アミノ酸配列を含むペプチドに対する、唾液IgA抗体による歯周病原菌の付着阻害効果をin vitroで検討することであった。
1)まず、スタセリンおよびPRP上の最小結合部位アミノ酸配列を含むペプチド(Stat23およびPRP21)を作製・精製し、キャリアータンパク(KLH)に結合させ(多価)ペプチド複合体を作製すること。
2)それらペプチド複合体を抗原とし、粘膜アジュバント(コレラトキシン(CT)、CpGオリゴDNA、Flt3L遺伝子配列をコードしたタンパク質発現DNAプラスミド)とともにマウスに経鼻投与し、唾液中に誘導される抗ペプチドIgA抗体を精製すること。
3)その精製IgA抗体をインヒビターとして用い、それによる歯周病原菌の付着・定着阻害能を口腔内歯面モデルにて検討すること。
であった。
結果は、
1)ペプチド合成をFmoc法により作製を試みたが、経済的、技術的な面で当初の作製予定量が確保できないと予想され、専門業者に外部注文した。
2)2種の抗原および3種の粘膜アジュバントを組み合わせ、マウスに経鼻投与した。抗原特異的IgA応答を認めたものは、PRP21抗原のみであった。そのPRP21抗原に対する唾液IgA抗体の産生量について、最も効果の高い粘膜アジュバントは、CTであった。以後CTとPRP21を経鼻同時投与し、抗PRP21特異的唾液IgA抗体を精製し、約150匹のマウスから精製IgA抗体24.3mgが精製された。
3)その精製IgA抗体溶液100μg/ml 100μLによるPRP被覆ハイドロキシアパタイトビーズへの歯周病原菌(P.gingivalis ATCC 33277)の付着阻害実験を行ったところ、最大97.7%の付着阻害が認められた。

Report

(1 results)
  • 2011 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All 2012 2011

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Novel vaccine development strategy for inducing mucosal immunity2012

    • Author(s)
      Fukuyama Y., et al
    • Journal Title

      Expert Rev Vaccines

      Volume: 11 Pages: 367-379

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A combination of Flt3 ligand cDNA and CpG oligodeoxynucleotide as nasal adjuvant elicits protective secretory-IgA immunity to Streptococcus pneumoniae in aged mice2011

    • Author(s)
      Fukuyama Y., et al
    • Journal Title

      Journal of Immunology

      Volume: 184 Issue: 4 Pages: 2454-2461

    • DOI

      10.4049/jimmunol.1002837

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The nasal dendritic cell-targeting Flt3 ligand as a safe adjuvant elicits effective protection against fatal pneumococcal pneumonia2011

    • Author(s)
      Kataoka K, et al
    • Journal Title

      Infection and Immunity

      Volume: 79巻 Issue: 7 Pages: 2819-2828

    • DOI

      10.1128/iai.01360-10

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Nasal dendritic cell targeting Flt3 ligand as a safe adjuvant elicits effective protection against fatal pneumococcal pneumonia2011

    • Author(s)
      片岡宏介
    • Organizer
      15^<th> International Congress of Mucosal Immunology
    • Place of Presentation
      フランス第5大学(フランス)
    • Year and Date
      2011-07-09
    • Related Report
      2011 Annual Research Report

URL: 

Published: 2011-04-06   Modified: 2019-07-29  

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