全リポ蛋白粒子の粒子径と疎水性に関するデータベースの作製

• Project/Area Number: 23590657
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Research Field: Laboratory medicine
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 千葉 仁志 北海道大学, 大学院保健科学研究院, 教授 (70197622)
• Project Period (FY): 2011 – 2013
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2013)
• Budget Amount: ¥5,200,000 (Direct Cost: ¥4,000,000、Indirect Cost: ¥1,200,000); Fiscal Year 2013: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000); Fiscal Year 2012: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2011: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
• Keywords: リポタンパク質 / 粒子径 / 原子間力顕微鏡

Research Abstract

原子間力顕微鏡（AFM)はナノスケールの大きさや形状の計測を行う能力を持ち、さらにカンチレバーに修飾を行うことにより様々な機能的計測を可能にすることから、生体物質の医学的応用が期待される。本課題ではAFMをリポタンパク質粒子の計測と分類に応用することにを目標にしている。リポタンパク質は代謝過程のなかで粒子径を変化させるが、小型LDLと動脈硬化との関連がこれまでに知られている。また、HDL粒子径とHDLの高動脈硬化的性質との関連も知られつつある。本課題はここまでの研究期間内に、AFMによるLDLと小型LDLの粒子径計測の妥当性について、電子顕微鏡（EM)と比較することにより評価してきた。AFMはタンピングモードで行い、EMはネガティブ染色モードで行った。6名の健常者から超遠心法により分離した大型LDLと小型LDLを比較した。AFMとEMのそれぞれにおいて両リポタンパク質分画の粒子径は有意性をもって大型リポタンパク質が大きかった。AFMとEMの間での比較においては、いずれのリポタンパク質分画においても、二つの方法間で有意差をもって測定値に違いがあった。次いで、総リポタンパク質分画を指標としてAFMとEMによる計測を行った。HDLとLDLの粒子数の分布は、AFMでは、それぞれ64.3と24.1％で、EMではそれぞれ72.5％と14.1％であった。方法間の不一致の原因として、小型LDLとHDLの間の分解能力がAFMではEMよりも低いことが考えられた。その原因としてカンチレバーの径が市販の最小径のものでも小型LDLやHDLの測定には大きすぎることが考えられた。小径のカンチレバーの開発の必要性が明らかとなった。

Research Products

• [Journal Article] Mouse oocyte methylomes at base resolution reveal genome- wide accumulation of non-CpG methylation and role of DNA methyltransferases (2013)
  • Author(s): Shirane K, Toh H, Kobayashi H, Miura F, Chiba H, Ito T, Kono T, Sasaki H
  • Journal Title: PLoS Genet Volume: 9(4) Issue: 4 Pages: 303-306
  • DOI: 10.1371/journal.pgen.1003439
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A phenolic antioxidant from the Pacific oyster (Crassostrea gigas) inhibits oxidation of cultured human hepatocytes mediated by diphenyl-1-pyrenylphosphine (2012)
  • Author(s): Watanabe M et al.
  • Journal Title: Food Chem Volume: 134 Issue: 4 Pages: 2086-2089
  • DOI: 10.1016/j.foodchem.2012.04.001
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Novel monoclonal antibody recognizing triglyceride-rich oxidized LDLs associated with severe liver disease and small oxidized LDLs in normal subjects (2012)
  • Author(s): Sakurai T
  • Journal Title: Ann Clin Biochem Volume: (未定) Issue: 5 Pages: 456-462
  • DOI: 10.1258/acb.2012.011284
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Detection and characterization of cholesteryl ester hydroperoxides in oxidized LDL and oxidized HDL by use of an Orbitrap mass spectrometer (2012)
  • Author(s): Hui SP, et al
  • Journal Title: Anal Bioanal Chem Volume: 404 Issue: 1 Pages: 101-112
  • DOI: 10.1007/s00216-012-6118-0
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Quantnative determination of pnospnatidyicnoline hyaroperoxidesduring copper-oxidation of LDL and HDL by liquid chromatography/mass spectrometry (2012)
  • Author(s): Hui SP
  • Journal Title: Anal Bioanal Chem Volume: (未定) Issue: 7 Pages: 1831-1840
  • DOI: 10.1007/s00216-012-5833-x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Detection of oxidized LDL using a carbon nanotube electrode. (2012)
  • Author(s): Takeda S, Hui SP, Fukuda K, Fuda H, Jin s, Sakurai T, Ishii A, Mukasa K, Sueoka K, Chiba H.
  • Journal Title: Sensor Actuator B Chem Volume: 167 Pages: 833-836
  • DOI: 10.1016/j.snb.2012.02.064
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Xanthohumol Prevents Atherosclerosis by Reducing Arterial Cholesterol Content via CETP and Apolipoprotein E in CETP-transgenic mice. (2012)
  • Author(s): Hiroshi Hirata, Koji Takazumi, Shuichi Segawa, Yukio Okada, Naoyuki Kobayashi, Tatsuro Shigyo, Hitoshi Chiba.
  • Journal Title: PLOS ONE Volume: 134 Issue: 11 Pages: 1432-1437
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0049415
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Isolation and Characterization of a Phenolic Antioxidant from the Pacific Oyster (Crassostrea gigas) (2012)
  • Author(s): Watanabe S.
  • Journal Title: J Agric Food Chem Volume: 60 Issue: 3 Pages: 830-835
  • DOI: 10.1021/jf2038532
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A novel murine model for non-alcoholic steatohepatitis developed by combination of a high-fat diet and oxidized low-density lipoprotein (2012)
  • Author(s): Yimin
  • Journal Title: Lab Invest Volume: 92 Issue: 2 Pages: 1-17
  • DOI: 10.1038/labinvest.2011.159
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Liquid chromatography-mass spectrometric determination of plasmalogens in human plasma. (2011)
  • Author(s): Hui SP, Chiba H, Kurosawa T.
  • Journal Title: Anal Bioanal Chem. Volume: 400 Issue: 7 Pages: 1923-1931
  • DOI: 10.1007/s00216-011-4921-7
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Stable isotope-dilution liquid chromatography/tandem mass spectrometry method for determination of thyroxine in saliva (2011)
  • Author(s): Higashi T., et al
  • Journal Title: J.Chromatogr.B Volume: 879 Issue: 13-14 Pages: 1013-1017
  • DOI: 10.1016/j.jchromb.2011.02.048
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] CD36 deficiency predisposing young children to hypoglycemia (2011)
  • Author(s): Nagasaka H, Yorifuji T, Takatani T, Okano Y, Tsukahara H, Yanai H, Hirano KI, Hui SP, Hirayama S, Ito T, Chiba H, Miida T
  • Journal Title: Metabolism Volume: 60 Issue: 6 Pages: 881-7
  • DOI: 10.1016/j.metabol.2010.08.008
  • Peer Reviewed
• [Presentation] ケルビン測定を利用した低比重リポ蛋白質の酸化状態の評価． (2013)
  • Author(s): 武田晴治， 惠 淑萍， 武笠幸一， 櫻井俊宏， 神 繁樹， 布田 博敏， 末岡和久， 千葉仁志．
  • Organizer: 日本電気化学会
  • Place of Presentation: 東北大学（仙台市）
• [Presentation] CNT電極センサーによる抗酸化物質のLDL酸化抑制能測定法． (2013)
  • Author(s): 大川 芙多葉，武田晴治，惠 淑萍，武笠幸一，櫻井俊宏，神 繁樹，布田 博敏，末岡和久，千葉仁志．
  • Organizer: 日本電気化学会
  • Place of Presentation: 東北大学（仙台市）
• [Presentation] 原子間力顕微鏡を用いた酸化LDLの電位変化測定 (2012)
  • Author(s): 武田晴治、大川芙多葉、櫻井俊宏、神繁樹、布田博敏、惠淑萍、千葉仁志
  • Organizer: 日本臨床化学会
  • Place of Presentation: いわて県民情報交流センター（盛岡市）
• [Presentation] 脂質酸化の新しい評価系の開発 (2012)
  • Author(s): 千葉仁志
  • Organizer: 未病システム学会
  • Place of Presentation: 金沢勤労者プラザ（石川県）
  • Invited
• [Presentation] LC-MS・MSによる酸化リポタンパク質における過酸化リン脂質の定量分析 (2012)
  • Author(s): 惠 淑萍、櫻井俊宏、武田晴治、神 繁樹、布田博敏、千葉仁志
  • Organizer: 日本酸化ストレス学会
  • Place of Presentation: あわぎんホール（徳島市）
• [Presentation] TBARSは酸化リポタンパク質中のphosphatidylcholine hydroperoxidesのレベルを反映していない (2012)
  • Author(s): 惠 淑萍、櫻井俊宏、神 繁樹、布田博敏、武田晴治、黒澤隆夫、千葉仁志
  • Organizer: 日本医用マススペクトル学会
  • Place of Presentation: 愛知県産業労働センター（名古屋市）
• [Presentation] 原子間力顕微鏡によるリポタンパク質の粒径分布の解析 (2012)
  • Author(s): 櫻井 俊宏， 高橋 順也， 武田 晴治， Trirongjitmoah Suchin， 浪田 健， 神 繁樹， 清水 孝一， 千葉 仁志．
  • Organizer: 日本臨床検査医学会学術集会
  • Place of Presentation: 国立京都国際会館（京都市）
• [Presentation] リポタンパク質の金属酸化時のphosphatidyl choline hydroperoxides及びTBARSの経時変化． (2012)
  • Author(s): 惠 淑萍， 櫻井 俊宏， 神 繁樹， 布田 博敏， 武田 晴治， 千葉 仁志．
  • Organizer: 日本臨床検査医学会学術集会
  • Place of Presentation: 国立京都国際会館（京都市）
• [Presentation] 脂質異常症患者および健常者における粒子サイズ別の酸化LDLの解析． (2012)
  • Author(s): 櫻井 俊宏， 高橋 祐司， 和田 典男， 古川 博之， 永坂 敦， 惠 淑萍， 神 繁樹， 武田 晴治， 布田 博敏， 小林 清一， 千葉 仁志．
  • Organizer: 日本臨床化学会
  • Place of Presentation: いわて県民情報交流センター（盛岡市）
• [Presentation] 原子間力顕微鏡を用いた酸化LDLの電位変化測定． (2012)
  • Author(s): 武田 晴治， 大川 芙多葉， 櫻井 俊宏， 神 繁樹， 布田 博敏， 惠 淑萍， 末岡 和久， 千葉 仁志.
  • Organizer: 日本臨床化学会
  • Place of Presentation: いわて県民情報交流センター（盛岡市）
• [Presentation] 冠動脈硬化性疾患の病態の把握及び早期診断のための血漿プラスマローゲンの有用性に関しての検討． (2012)
  • Author(s): 西向 めぐみ， 榊原 守， 横田 卓， 山田 史郎， 櫻井 俊宏， 高橋 祐司， 生田 知子， 古牧 宏啓， 山木 志展， 前場 良太， 千葉 仁志， 筒井 裕之， 原 博
  • Organizer: 日本栄養・食糧学会
  • Place of Presentation: 東北大学（仙台市）