マウス肺癌に対する凍結融解壊死療法は他部位転移巣にも発育抑制効果を及ぼす

• Project/Area Number: 23791663
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Research Field: Orthopaedic surgery
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 黒田 浩章 慶應義塾大学, 医学部, 共同研究員 (20365274)
• Project Period (FY): 2011
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2011)
• Budget Amount: ¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000); Fiscal Year 2013: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2012: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2011: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
• Keywords: 凍結融解壊死療法 / 腫瘍免疫

Research Abstract

本研究では凍結融解壊死療法が再現性をもって遠隔腫瘍に影響するモデルの確立を先ず目指す。
immunocompetentなC57/BL6マウスを用いた。腫瘍を両側大腿部に移植し、実験を行った。腫瘍が約10mm大となった際に片側腫瘍の凍結融解を行ったが、10mm大ではすでに壊死性変化が見られる場合があり、微妙な差ではあるが8mm大から実験を行うこととした。直径約1mmの凍結端子では腫瘍の約50%までの凍結範囲しか得られなかったため、直径約2mmの端子を用いた。両側大腿部では皮膚の張力が高く、2mm端子の刺入は困難であったため両側の背部に腫瘍を移植することとした。病理組織学的には、凍結時間2分で約80%の凍結範囲が得られた。凍結時間1分でも約50～70%の凍結範囲が得られ、凍結時間による凍結範囲の制御にはさらなる検討が必要であった。上記よりルイス肺癌株を用いた実験では凍結時間2分で行った。凍結を行わない群では2週間後に腫瘍推定重量は約1150%増大した。これに対し凍結を行った腫瘍は2週間後に約600%の増大に留まった。また、凍結を行った群の対側の腫瘍は2週間後に約800%の増大に留まった。B16メラノーマ細胞株で同様の実験を試みたが、腫瘍がゼリー状であり、凍結端子穿刺により周囲に播種巣が形成されてしまい、さらなる工夫が必要と考えられた。一方ルイス肺癌株は腫瘍のほぼ100%が腫瘍細胞で構築されており、proof of principleを見る実験には適していると考えられた。アザン染色を行ったところ、壊死範囲の近傍においても膠原線維は比較的保たれている可能性が考えられ、細胞破壊が主体である可能性があった。以上よりルイス肺癌細胞株-C57/BL6マウス、2mm端子凍結時間2分で実験を進められる可能性が考えられた。

Research Products

• [Journal Article] A CD46 transgenic mouse model for studying the histopathology of arthritis caused by subcutaneous infection with Streptococcus dysgalactiae subspecies equisimilis (2012)
  • Author(s): Yoshida, H., Matsui, H.Murayama, S.Y., Takada, Y., Matsuo, K.Takahashi, T., Nakamura, M., Ubukata, K., Takahashi, T.
  • Journal Title: J.Med.Microb. Volume: 60 Issue: 12 Pages: 1860-1868
  • DOI: 10.1099/jmm.0.034108-0
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Interstitial lung disease induced by gefitinib and toll-like receptor ligands is mediated by Fra-1 (2011)
  • Author(s): Takada Y, Gresh L, Bozec A, Ikeda E, Kamiya K, Watanabe M, Kobayashi K, Asano K, Toyama Y, Wagner EF, Matsuo K
  • Journal Title: Oncogene Volume: 30 Issue: 36 Pages: 3821-32
  • DOI: 10.1038/onc.2011.101
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Impaired vibration of auditory ossicles in osteopetrotic mice (2011)
  • Author(s): Kanzaki S, Takada Y, Niida S, Takeda Y, Udagawa N, Ogawa K, Nango N, Momose A, Matsuo K
  • Journal Title: Am J Pathol Volume: 178 Issue: 3 Pages: 1270-1278
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2010.11.063
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Osteoprotegerin prevents infection-induced bone loss (2011)
  • Author(s): Takada Y, Matsuo K
  • Organizer: 33^<rd>,American Society for Bone and Mineral Research
  • Place of Presentation: San Diego, CA U.S.A
  • Year and Date: 2011-09-19
• [Presentation] Osteoclast-dependent canaliculi formation in cortical bone that mediates bone remodeling (2011)
  • Author(s): Nango N, Kubota S, Yashiro W, Momose A, Takada Y, Matsuo K
  • Organizer: 33^<rd>, American Society for Bone and Mineral Research
  • Place of Presentation: San Diego, CA, U.S.A
  • Year and Date: 2011-09-19
• [Presentation] 3D visualization of osteocyte lacunae in the entire long bone (2011)
  • Author(s): Takeda Y, Takada Y, Matsuo K, Omote K
  • Organizer: 33^<rd>, American Society for Bone and Mineralrch
  • Place of Presentation: San Diego, CA, U.S.A
  • Year and Date: 2011-09-18
• [Presentation] 大理石骨病マウスの解析 (2011)
  • Author(s): 高田康成
  • Organizer: 第3回in vivo Micro CT Forum
  • Place of Presentation: 慶應義塾大学病院東京都(招待講演)
  • Year and Date: 2011-08-26
• [Presentation] Osteoprotegerin prevents infection-induced bone loss (2011)
  • Author(s): 高田康成, 松尾光一
  • Organizer: 第29回日本骨代謝学会学術集会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場大阪府
  • Year and Date: 2011-07-30
• [Presentation] Osteoprotegerin induction in response to microbial infection (2011)
  • Author(s): Takada Y
  • Organizer: 1^<st> Bio-Rheumatology International Congress Tokyo/8^<th> GAEN Meeting Tokyo
  • Place of Presentation: Tokyo, JAPAN(招待講演)
• [Presentation] Regulation of osteoclasts is required to maintain morphology and function of ossicles in middle ear (2011)
  • Author(s): Kanzaki S, Takada Y, Ogawa K, Matsuo K
  • Organizer: 10^<th> International symposium|Recent Advances in Otitis Media
  • Place of Presentation: New Orleans, LA U.S.A
• [Remarks]
  • URL: http://www.matsuo-lab.com/