気管支洗浄液中のCADM1 v8/9を対象にした診断的有用性の検討

• Project/Area Number: 23H05341
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: 3200:Oncology, Brain sciences and related fields
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 村田 佳彦 筑波大学, 附属病院, 主任臨床検査技師
• Project Period (FY): 2023-04-01 – 2024-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥480,000 (Direct Cost: ¥480,000); Fiscal Year 2023: ¥480,000 (Direct Cost: ¥480,000)
• Keywords: CADM1 v8/9 / 小細胞肺癌 / ELISA

Outline of Research at the Start

肺癌の診断目的で行われる経気管支的洗浄細胞診の洗浄液は、含まれる細胞を遠心分離後、診断に用いられ、その上清は通常破棄される。しかし、この上清中には壊死した肺癌細胞内容物、あるいは癌細胞の分泌物やタンパクが多く含まれていると考えられる。
本研究では、肺小細胞癌に特異的に発現しているCADM1 v8/9の気管支洗浄液における診断的有用性について検討する。

Outline of Annual Research Achievements

１．研究目的　小細胞肺癌(SCLC)は、肺癌の約15％を占める高悪性度神経内分泌腫瘍であり、特徴的にCADM1が高発現している。SCLCが発現するCADM1分子はスプライシングバリアント v8/9であり、正常組織や他の肺癌の組織型ではほとんど発現していない。本研究では、CADM1 v8/9の気管支洗浄液におけるSCLCの診断的有用性について検討した。
２．研究方法　つくばヒト組織バイオバンクセンター(THBC)では、2010年10月から2022年6月までに筑波大学附属病院にて気管支洗浄細胞診を行った症例の細胞診標本作製後の残余上清2911例が-80℃にて保管されている。組織検体にて小細胞癌と診断された症例で、気管支洗浄液の残余上清が保管されている20例を抽出した。気管支洗浄液中のCADM1 v8/9は、ELISAで測定した。ELISAは、抗CADM1抗体 E9935 を捕捉抗体として、西洋わさびペルオキシダーゼ (HRP) を結合した抗CADM1v8/9抗体 F1222 を検出抗体として、可溶性CADM1v8/9を検出し、測定を行った。
３．研究成果　SCLC20例の気管支洗浄液2mLを、10倍に濃縮し、CADM1 v8/9の濃度を測定した。得られた値は、3.516-11.471 ng/mlであり、陰性コントロールとしたPBSよりも高い値を示した。気管支洗浄液を使用したCADM1 v8/9の検出は実施可能であり、今後は、非小細胞肺癌（腺癌、扁平上皮癌）の症例と比較検討し、気管支洗浄液中のCADM1 v8/9がSCLC特異的であり、診断的有用性があることを明らかにしたい。