Development of method for long DNA insertion using CRISPR and new integrase and application to mouse creation

Research Project

Project/Area Number	23K05616
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 42040:Laboratory animal science-related
Research Institution	Tokai University
Principal Investigator	三浦浩美東海大学, 医学部, 助教 (90599523)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	中野泰博金沢大学, がん進展制御研究所, 特任助教 (80755439)
Project Period (FY)	2023-04-01 – 2026-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help	¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000) Fiscal Year 2025: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000) Fiscal Year 2024: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000) Fiscal Year 2023: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywords	Easi-CRISPR / i-PITT / 長鎖DNA断片 / インテグラーゼ / トランスジェニックマウス
Outline of Research at the Start	申請者らはこれまで、再現性高い遺伝子発現を示す遺伝子改変マウス作製法である2つの手法(PITT/i-PITT法とEasi-CRISPR法)を開発してきた。それぞれ長所・短所を有するが、いずれも単独では任意の遺伝子座位に長いDNA断片を挿入することは困難であった。そこで本研究では、これらの2つの手法を組み合わせ、更に高効率な遺伝子挿入を可能とするインテグラーゼ系を取り入れることで、1ステップで大きなDNA断片を挿入できる新規遺伝子改変マウス作製法の開発を目指す。