AFP陽性細胞をターゲットとした新規NASH治療戦略の構築

Research Project

Project/Area Number	23K07456
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 53010:Gastroenterology-related
Research Institution	Mie University
Principal Investigator	川村聡三重大学, 医学部附属病院, 医員 (90930868)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	中川勇人三重大学, 医学系研究科, 教授 (00555609)
Project Period (FY)	2023-04-01 – 2026-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help	¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000) Fiscal Year 2025: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000) Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2023: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
Keywords	肝再生 / AFP / HCC / NASH
Outline of Research at the Start	αフェトプロテイン(AFP)は、肝臓癌（肝細胞癌）の腫瘍マーカーとして日常診療で広く使われている。一方で急性肝障害において血清AFPが高いと患者の予後が良いという報告があり、AFPを多く発現するAFP陽性細胞は細胞増殖能が高いであろうことが経験的に知られている。近年我国では非アルコール性の脂肪肝からの発癌の割合が増加傾向であるが、これは慢性的な肝細胞の細胞死/増殖が繰り返された結果として考えられており、ここに増殖能の高いAFP陽性細胞が関与している可能性は十分考えられる。よって本研究では脂肪肝からの発癌におけるAFP陽性細胞の役割を明らかにして新たな治療を開発することを目的とする。
Outline of Annual Research Achievements	まずは肝障害時のAFP陽性細胞の特徴を解析するために、慢性肝障害マウスモデルであるMUPマウスの肝細胞シングルセルRNA-seqを行ったところ、AFP陽性細胞は特徴的なクラスター（集団）に分類されることがわかった。このクラスターに関連するパスウェイ解析を行ったところ、いくつか発現が大きく変化しているシグナルを同定でき、肝細胞のAFP陽性化に関与している可能性のある候補となるシグナルをみつけることができた。その上で、候補となるパスウェイが肝細胞内で活性化されるとしたら、どのようなレセプターを介してシグナルを伝えているのかについてもこのパスウェイ解析を通していくつか候補となるレセプターを絞ることができた。さらに、空間遺伝子発現解析によってその周囲には特殊な微小環境が存在することも明らかになった。すなわち、肝障害時にはAFP陽性細胞となる肝細胞の周囲にある特定の細胞が肝細胞にはたらきかけAFPを陽性化しているものと思われた。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 肝障害時にどのようなシグナルが肝細胞をAFP陽性化させるのかについて、候補となるシグナルをいくつか同定できることができたため。また、AFP陽性細胞の特徴をシングルセルseq解析を用いて、より深く解析でき、AFP陽性細胞の特徴のみならず、空間遺伝子発現解析によって、AFP陽性細胞の周囲の微小環境、周囲細胞とのインタラクションまで解析を広げることができたため。
Strategy for Future Research Activity	上記解析で、AFP陽性細胞の発現に関わる可能性のあるシグナルについて、初代肝細胞に阻害薬を添付したり、またマウス肝細胞において候補遺伝子をノックアウトすることにより、本当にAFP発現に関わっているシグナルを同定する。その上で、AFP陽性細胞がどのように肝障害時に肝再生に寄与しているのか、肝細胞内のシグナル分析と、肝細胞周囲の環境とのインタラクションを統合的に解析する。