| Project/Area Number |
23K08215
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
| Allocation Type | Multi-year Fund |
|---|
| Section | 一般 |
|---|
| Review Section |
Basic Section 55020:Digestive surgery-related
|
|---|
| Research Institution | Shinshu University (2024)
Kyushu University (2023) |
|---|
Principal Investigator |
細田 清孝 信州大学, 医学部附属病院, 助教(診療) (00898033)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 数冴 東京大学, 医科学研究所, 助教 (00909385)
戸島 剛男 九州大学, 大学病院, 講師 (40608965)
三森 功士 九州大学, 大学病院, 教授 (50322748)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
|
| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
|
| Budget Amount *help |
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2024: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
|
|---|
| Keywords | 膵癌微小環境 / がん代謝 / ミトコンドリア / pancreatic cancer / microenviroment / metabolism / spatial transcriptome |
|---|
| Outline of Research at the Start |
一般に細胞生存にはエネルギー産生にむけた代謝機構が必須で、がん細胞も生理的な代謝機構に変異を加えており、がん代謝は生存へのエネルギー産生のみならずその代謝産物ががん微小環境において免疫寛容を誘導することも知られている。マルチターゲットながん治療標的としても重要であると考えられるが、臨床症例のがん微小環境のなかで周囲細胞とクロストークして悪性度を獲得するがん細胞を解析した報告はない。
本研究においてわれわれは膵がん微小環境における腫瘍免疫応答に関係するがん代謝機構について、空間情報を伴う遺伝子発現プロファイルならびに一細胞レベルでのトランスクリプトーム情報の統合解析を行い、治療標的の同定を目指す。
|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、膵癌微小環境において、癌関連線維芽細胞（CAF）から膵癌細胞へのミトコンドリア移動（mitochondria transfer）を高い特異性で可視化・定量化し、その悪性化への関与を分子レベルで明らかにすることを目的としている。
昨年度に行ったMitoTrackerを用いた実験結果から、CAF由来ミトコンドリアが膵癌細胞へ移動する可能性が示唆されたことから、本年度はその現象をミトコンドリア局在型蛍光タンパク質（mitoDsRed）を用いた特異的な実験系で検証する必要があると判断した。
今年度は、CAFから膵癌細胞（MIA PaCa-2、PK-1など）へのミトコンドリア移動を明瞭に観察するため、mitoDsRedを安定的に発現する線維芽細胞株の構築を進めた。当初、発現レベルの不安定性や細胞増殖能の低下により、株の確立には時間を要したが、再導入・再ソーティングにより強発現株の構築に成功し、現在は共培養実験の準備段階にある。
また、線維芽細胞由来ミトコンドリアを強制的に膵癌細胞へ導入するミトセプション実験を行い、得られた膵癌細胞株についてRNAシークエンスを実施した。その結果、上皮間葉転換（EMT）関連遺伝子の発現変化が確認され、CAF由来ミトコンドリア移動が膵癌の悪性形質に影響を及ぼす可能性が示唆された。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
当初予定した研究については、立案後に複数の研究結果が報告されたため、がん代謝に深く関与する膵癌微小環境でのミトコンドリアトランスファーに着目することにした。膵癌微小環境でのミトコンドリアトランスファーは現時点では臨床検体を使用したシークエンスデータから得ることは困難であるため、まずin vitroの実験を行い、その後その結果を鑑みてシークエンスを提出することとしたため。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後は、実際のmitochondria transferによってEMT関連遺伝子の発現変化が生じるかどうか、さらにその分子メカニズムについて解析を進めていく予定である。
|
