| Project/Area Number |
23K08285
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 55030:Cardiovascular surgery-related
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| Research Institution | Department of Clinical Research, National Hospital Organization Kanazawa Medical Center |
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Principal Investigator |
松本 康 独立行政法人国立病院機構(金沢医療センター臨床研究部), その他部局等, その他 (20262579)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
黒瀬 望 独立行政法人国立病院機構(金沢医療センター臨床研究部), その他部局等, その他 (10319048)
池田 博子 金沢大学, 附属病院, 准教授 (10447675)
川島 篤弘 独立行政法人国立病院機構(金沢医療センター臨床研究部), その他部局等, その他 (20242563)
笠島 里美 金沢大学, 保健学系, 教授 (20444200)
尾崎 聡 金沢大学, 保健学系, 助教 (40401921)
笠島 史成 独立行政法人国立病院機構(金沢医療センター臨床研究部), その他部局等, その他 (90303304)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2025: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,990,000 (Direct Cost: ¥2,300,000、Indirect Cost: ¥690,000)
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| Keywords | 心膜 / IgG4関連疾患 / 線維芽細胞 |
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| Outline of Research at the Start |
稀に心膜でもIgG4-RDが発生し，収縮性心膜炎としての報告例が多いが，多彩な像であり，IgG4関連心膜病変の臨床像;病態は未だ不明である，IgG4関連心膜病変症例を選択し，その病態を明確にする．また，血管周囲細胞からの転換線維芽細胞や，心膜心筋の臓器特異的線維芽細胞など多様な線維芽細胞が近年，報告されており，心膜線維化への関与が示唆される．これらの多様な線維芽細胞，免疫機構とIgG4関連心膜病変の線維化プロセスを検討し，病因病態の解明に挑む．これによりIgG4関連心膜病変の診断及び治療戦略の確立にも寄与する．
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| Outline of Annual Research Achievements |
心膜切除75 例のうち心膜肥厚が2 ㎜以上の収縮性心膜炎(constructive pericarditis;CP) 32 例を対象とし,心膜肥厚の原因が臨床的に明確な6 例と原因不明 (ICP) の26 例とに分け，ICPを、IgG4関連疾患の診断基準を満たす11 例をIgG4-CP，それ以外の15 例をnon-IgG4-CPとし，3群間の臨床病理像並びに線維芽細胞の種類，分布を比較した．
臨床像の検討；ICP 25例のうち、9 例が組織学的にIgG4-CPと評価され，全切除例の12％、ICP の36 ％であった． 3群は年齢，画像上の肥厚，WBC，石灰化の有無 は同程度であった．他2群に比し，IgG4-CP群は，臨床的に，男性に多い，心嚢水再発，CRP上昇，ANA陽性率が高く，組織学的に，好酸球の出現頻度が高く，リンパ濾胞形成を示した．
心膜の二重免疫染色；組織常在性線維芽細胞(pF)のマーカーとしてPDGFRβ，膠原線維の重合の抑制作用があるmFのマーカーとしてISLR を用い，ISLRまたはPDGFRβと内皮細胞のマーカーCD31との二重免疫染色を施行した．標本をデジタル化し，画像解析ソフトQuPathを用い，、ISLR/PDGFRβ のみ発現細胞をMF/PF (mF/pF) 、CD31のみ発現細胞をISLR/PDGFRβ陰性成熟血管内皮細胞 (mature endothelium; mME/pME) 、ISLR/PDGFRβとCD31 の両方の発現細胞をISLR/PDGFRβ陽性未熟血管内皮細胞 (immature endothelium; mIE/pIE) として同定した． IgG4-CP群は、他２群に比較し，標本全体及び血管領域において，mIE, pIE, mF, pF, mME, pME全て高値を示した．特に血管周囲でMF細胞が多数認められた．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
1.IgG4関連心膜病変の病理組織学的解析；心膜のホルマリン固定パラフィンブロック検体を対象とし， IgG4-RDの特徴よりIgG4関連心膜病変を選択し，臨床病理像の解明を進めた． 解剖例からの心膜例を選択し，正常コントロールとして同様の解析を進めている．
2. IgG4関連心膜病変の線維化プロセスの解明；IgG4関連心膜病変における線維化，線維芽細胞の検討 IgG4関連心膜病変のEVG染色及びcollagen免疫染色標本に対して，画像解析アプリケーションを用い，線維増生の面積，膠原線維密度を数値評価した．石灰化についてもCossa染色を行い面積，分布を数値評価を進めている.間葉系幹細胞からの転換した線維芽細胞（CD34），血管周囲細胞由来線維芽細胞（PDGFRβ，NG2），心臓心膜臓器特異性線維芽細胞（Tcf21, Meflin），筋線維芽細胞（αSMA）等を同定し，画像解析アプリケーションを用いて，各陽性細胞の数・分布・相互距離の解析を進めている． 同時に，PDGFRβ及びMeflinは血管内皮細胞にも陽性であるため，未熟血管内皮細胞，成熟血管内皮細胞も併せて同定し，線維芽細胞と比較を行なっている． collagen，PDGFRβ及びMeflin の蛍光三重免疫染色を行い，線維増生と各線維芽細胞の関係性を画像解析で評価を進めている．
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| Strategy for Future Research Activity |
IgG4関連心膜病変の線維化プロセスの解明を終了する．
石灰化についてCossa染色標本の面積，分布を数値評価を終了する.間葉系幹細胞からの転換した線維芽細胞（CD34），血管周囲細胞由来線維芽細胞（PDGFRβ，NG2），心臓心膜臓器特異性線維芽細胞（Tcf21, Meflin），筋線維芽細胞（αSMA）の・分布・相互距離の解析を終了する．未熟血管内皮細胞，成熟血管内皮細胞も併せて同定し，線維芽細胞との比較を終了する． collagen，PDGFRβ及びMeflin の蛍光三重免疫染色を行い，線維増生と各線維芽細胞の関係性を画像解析で評価を終了する．各線維芽細胞について, RNA in situ hybridization (ISH)及び，MMPsとのdual ISHによる解析を加える．
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