| Project/Area Number |
23K08607
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56020:Orthopedics-related
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
中村 智祐 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 准教授 (90725201)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古賀 英之 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (30594080)
宮武 和正 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 講師 (00777435)
中川 裕介 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 寄附講座准教授 (60822666)
片倉 麻衣 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 助教 (30930549)
辻 邦和 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 特任教授 (20323694)
関矢 一郎 東京医科歯科大学, 統合研究機構, 教授 (10345291)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | 半月板再建術 / 大動物 / 膝関節機能温存 |
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| Outline of Research at the Start |
マイクロミニピッグを全身麻酔後、後肢の両膝の内側半月板を全切除し、半月板欠損モデルを作製する。両側の半腱様筋腱を採取し、移植用に調整する。右膝を実験群、左膝をコントロール群とし、右膝に半月板再建術を行う。滑膜幹細胞移植を併用する場合もある。術後1か月、3か月、6か月で肉眼的観察を行い、すべての膝関節及び移植腱の肉眼的、組織学的検討及びMRI（T2 mapping）を用いた質的評価を行う。
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| Outline of Annual Research Achievements |
詳細な研究方法の立案及び大動物実験の準備を行った。動物実験用麻薬免許の取得及び動物実験施設での審査を実施し、受理された。実験器具及びデバイスを購入し、まずはマイクロミニピッグを用いてすべての実験で使用する滑膜幹細胞の採取及び実際の半月板再建術の手技確立のためのプレリミナリーな実験を計画している。8か月例のマイクロミニピッグを用いてケタミンを用いた全身麻酔下に滑膜を採取し、滑膜幹細胞を分離し培養増殖し、以後の移植用にストックする。
次年度は、実際の実験の遂行を行う。体格及び生理的な条件を同一にするため8.5か月例のオスのマイクロミニピッグを用いて、ケタミンを用いた全身麻酔下に両膝の半月板を全切除、両膝からハムストリング腱を採取し、右膝を処置群としてハムストリング腱を用いた半月板再建術を行う。半月板再建術では半月板の安定化のために一定数の縫合を行い、半月板逸脱を防ぐためにセントラリゼーションを行う。同時に組織再生を促すため滑膜幹細胞を移植（10分間静置法）を行う。
処置後1か月・3ヶ月・6か月それぞれ5頭ずつ犠牲死をさせ、それぞれの時点での両膝関節サンプルを採取し、組織学的及びMRIを用いて移植腱の生着及びリモデリング状況を検討する。同時に関節軟骨の組織学的検討も行い、半月板再建術の膝関節組織への影響を検討する。
得られた結果の解釈及び意義付けを検討し、各種整形外科関連学会での発表および国際誌への投稿を計画している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
動物実験施設での審査が予想よりも遅れたが、現状全ての準備が整ったため、順次進行可能となっている。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は、実際の実験の遂行を行う。体格及び生理的な条件を同一にするため8.5か月例のオスのマイクロミニピッグを用いて、ケタミンを用いた全身麻酔下に両膝の半月板を全切除、両膝からハムストリング腱を採取し、右膝を処置群としてハムストリング腱を用いた半月板再建術を行う。半月板再建術では半月板の安定化のために一定数の縫合を行い、半月板逸脱を防ぐためにセントラリゼーションを行う。同時に組織再生を促すため滑膜幹細胞を移植（10分間静置法）を行う。
処置後1か月・3ヶ月・6か月それぞれ5頭ずつ犠牲死をさせ、それぞれの時点での両膝関節サンプルを採取し、組織学的及びMRIを用いて移植腱の生着及びリモデリング状況を検討する。同時に関節軟骨の組織学的検討も行い、半月板再建術の膝関節組織への影響を検討する。
得られた結果の解釈及び意義付けを検討し、各種整形外科関連学会での発表および国際誌への投稿を計画している。
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