| Project/Area Number |
23K08763
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56030:Urology-related
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
田口 和己 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (00595184)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田上 辰秋 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 准教授 (10609887)
安藤 亮介 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (30381867)
安井 孝周 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (40326153)
海野 怜 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (40755683)
岡田 淳志 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (70444966)
杉野 輝明 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 研究員 (70881746)
濱本 周造 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (80551267)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
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| Keywords | マクロファージ / ナノ粒子 / 尿路結石 / マイクロバブル |
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| Outline of Research at the Start |
本研究では、Mφの結晶貪能を利用した「尿路結石の溶解治療」の開発のため、ナノ粒子の取り込みと超音波標的マイクロバブル破壊による組織選択性に着目し、臨床応用を目指したiPS細胞での実証を含む以下の医工薬連携研究を行う。
[1] ナノ粒子取り込みMφの結晶貪食活性化による尿路結石形成の抑制
[2] 超音波標的マイクロバブル破壊を利用した腎特異的Mφ活性化治療の確立
[3] iPS細胞由来の3次元培養モデルにおけるナノ粒子-マイクロバブル治療の実証
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| Outline of Annual Research Achievements |
方法）マクロファージの結晶貪食能を増強させる候補薬としてピオグリタゾン(PGZ)を含有するナノ粒子（NP-PGZ）を、PLGAを用いた乳化溶媒拡散法により作製した。蛍光標識したカルシウムシュウ酸一水和物結晶（COM）とともに標識ナノ粒子をマウスマクロファージRAW細胞に投与し、貪食能を評価した。さらに、NP-PGZ投与後にRAW細胞と共培養した腎尿細管上皮細胞（RTC）へのCOM付着変化をIN-Cell Analyzerで測定し、RT-PCRを用いて炎症性・抗炎症性反応の変化を評価した。
結果）NP-PGZ粒子は平均粒径353 nm、薬物含有率3.7%であり、先行報告と一致した。共焦点顕微鏡により、RAW細胞がナノ粒子とCOMを同時に貪食していることを確認した。RTCへのCOM付着率は、NP-PGZ処理群のRAW共培養群で対照群と比較して有意に低下した。抗炎症性マクロファージマーカーの発現は、PGZおよびNP-PGZ群の両方で増加した。
これらの結果から、PGZ封入ナノ粒子により抗炎症性マクロファージへの分化誘導が促進されることが示唆され、腎結石に対するマクロファージ溶解療法の臨床応用が期待される。同様の結果は、マウスの骨髄由来マクロファージを利用した実験でも示されており、今後はNP-PGZの投与経路（皮下・腹腔・静注など）を調べるHPLCを行い、最も腎へのNP-PGZ到達が得られるものを採用して、結石モデルマウスを使用した本実験を行う。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
ピオグリタゾンを装填したナノ粒子の調整に時間がかかり、in vivoの実験に移るまでに時間を要してしまった。ここからは結石モデルマウスへの投与実験を行った後、迅速に超音波標的マイクロバブルの実験系に取り掛かりたい。
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| Strategy for Future Research Activity |
ナノ粒子の調整および投与方法の確立などは、研究協力者である薬学研究科薬物送達学分野にお願いしており、順調な調整が可能である。
超音波標的マイクロバブルについては、受託先との連携を早めて並行して予備実験をすすめていくことで迅速に本実験へと移行したい。
iPSモデルについては、他の研究課題でも取り組んでいるモデルを共同して使用することで、コストやプロセスを省いていきたい。
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