| Project/Area Number |
23K08784
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56030:Urology-related
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| Research Institution | Osaka Metropolitan University |
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Principal Investigator |
國本 浩之 大阪公立大学, 大学院医学研究科, 助教 (80372853)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
濱崎 考史 大阪公立大学, 大学院医学研究科, 教授 (40619798)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
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| Keywords | 精子形成不全 / 精子形成 / 選択的スプライシング |
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| Outline of Research at the Start |
男性不妊症となる原因の大半は精子形成不全であるが、その原因遺伝子については殆どわかっていない。
本研究では、精子形成における選択的スプライシング制御因子RBM10の役割を解析することで、これまで原因不明とされた男性不妊症の発症機序を明らかにする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
RNA-binding motif protein10（RBM10）はX染色体上に位置する選択的スプライシングの制御因子である。RBM10遺伝子の変異は、男児において出生前後に多くが致死となるX連鎖型先天異常のTARP症候群となるだけでなく、成人は種々のがんなどの疾病に関わることが報告されている。そこで、我々は、成体におけるRBM10の役割を解明するため、タモキシフェン投与により時期特異的に全身でRBM10をノックアウト可能なRBM10コンディショナルノックアウト（RBM10cKO）マウスを作製し、解析を行った。その結果、出生後にタモキシフェン投与を行いRBM10cKOとなったオスマウスは野生型同様に成長したにも関わらず、精巣重量に著しい低下が観察されたことから、RBM10が正常な精子形成に必要な遺伝子であると推察された。
近年、少子化が日本の深刻な社会問題であり、挙児希望にもかかわらず不妊症と診断されるカップルが増加している。不妊症の原因の約50％は男性側にあるとされ、男性不妊症の中で最も割合が多い造精機能障害、すなわち精子形成不全は、その半分以上が原因不明である。
本研究では、RBM10欠損で発現が変動する精子形成に関わる遺伝子の同定とその分子機序を問うことで、男性不妊症となる原因を解明および治療法・診断法の礎を築くことを目標とする。
まず、精原細胞分化マーカーとなる種々の抗体でマウス精巣切片の染色を行い、RBM10cKOマウスが精子形成不全となる精子の分化ステージを求めた。また野生型とRBM10cKOで発現が変動する遺伝子群をRNA-seq解析で見出した。
本年度は、時期特異的RBM10cKOマウスの解析を行ったが、顕著な異常を認められず、今後の解析対象として精子幹細胞に着目した。そこで野生型およびRBM10cKOマウス精巣から精子幹細胞の単離培養を試み、樹立に成功した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
マウス個体での解析が終了し、in vitroで解析を進めるための精子幹細胞を早期に樹立できたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
野生型あるいはRBM10cKOとした精子幹細胞を用いてRNA-seq解析を行い、各遺伝子の発現量の差異、スプライシングバリアントの変動を調べる。変化のあった遺伝子を抽出、確認し、無精子症となる原因遺伝子を見出す。
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