| Project/Area Number |
23K08789
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56030:Urology-related
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
高橋 悟 日本大学, 医学部, 教授 (50197141)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
原 誠 日本大学, 医学部, 准教授 (10817224)
大日方 大亮 日本大学, 医学部, 准教授 (20624886)
井上 聡 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), 東京都健康長寿医療センター研究所, 研究部長 (40251251)
藤原 恭子 日本大学, 歯学部, 准教授 (40595708)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2025: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
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| Keywords | 前立腺がん / OCT1 / アンドロゲン受容体 / 前立腺癌 |
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| Outline of Research at the Start |
前立腺がんの増殖・進展は、主にアンドロゲン受容体(Androgen receptor: AR)により制御されており、抗アンドロゲン療法は初期には著効するものの、多くが経過中に去勢抵抗性前立腺がん(CRPC)に変化する。このメカニズムには腫瘍特異性のエピゲノム制御により、ARシグナル経路の異常活性化が起こることがその原因の一つと考えられている。本研究では複数の治療薬に抵抗性を示した前立腺がん症例のARシグナル経路の特性を、クロマチン免疫沈降ならびに次世代シークエンサーで網羅解析を行い、前立腺がん治療薬の開発から臨床応用を目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度はMonash大学から提供を受けた治療抵抗性前立腺癌患者由来のPatient Derived Xenograft（PDX）モデルを用いて、ARおよびOCT1によって制御される主要な標的遺伝子の探索を行い、その中で「遺伝子X」を同定した。この遺伝子は、前立腺癌における免疫応答に関与するとともに、治療抵抗性の獲得に寄与していることが明らかとなった。本年度はこの「遺伝子X」について、実際のヒト臨床検体を用いた免疫染色を実施し、その発現状況を詳細に解析した。その結果、前立腺癌の悪性度が高い症例ほど遺伝子Xの発現が強い傾向にあること、さらに高発現症例では腫瘍周囲のリンパ球浸潤が著しく乏しいことが判明し、本遺伝子が腫瘍免疫環境の制御にも関与している可能性が示唆された。
加えて、AR遺伝子に変異を有する前立腺癌細胞VCaPを用い、エンザルタミド添加培地下での長期培養を行うことで、薬剤抵抗性細胞株を新たに樹立した。現在、この細胞に対し、OCT1の転写活性を抑制する候補化合物を投与し、細胞増殖能への影響を評価している。また、OCT1のゲノム上の結合領域に関するChIP-seq（Chromatin Immunoprecipitation sequencing）データをもとに、複数のOCT1制御化合物によって発現が変動する遺伝子群の解析も進めている。
なお、これら主たる研究成果に加えて、副次的な研究成果として以下の検討も行った。すなわち、早期前立腺癌に対する前立腺全摘術症例の臨床成績の解析（術後経過および再発傾向の評価）、ならびに女性生殖臓器におけるアンドロゲン受容体の発現状況の検討（性差に基づくホルモン応答性の把握）である。これらの成果は、主たる研究の背景理解をより一層深めるものであり、相補的意義を有するものである。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
現在までの進捗状況は、上記のとおり複数の成果が得られており、全体として概ね順調に進展していると判断される。その主な理由として、本年度は前年度に計画しつつも実施が見送られていた化合物を投与したPDX検体のChIP-seq解析を遂行できたことが挙げられる。これにより、OCT1のゲノム上の結合領域と制御下にある遺伝子群を明らかにするという研究の中核的な部分が大きく進展した。加えて、臨床検体を用いた免疫染色や、薬剤抵抗性細胞株の長期培養による樹立および候補化合物による評価実験など、当初の研究計画に沿った重要な検討項目が実施されており、研究は予定通り進んでいることが示唆されている。これらの結果は、次年度以降の研究の展開においても確実な基盤となるものであり、進捗は良好であると評価できる。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後の推進方策としては、まず本年度に樹立した薬剤耐性前立腺癌細胞株に対し、OCT1の転写活性を抑制する候補化合物を投与し、その反応を詳細に評価する予定である。具体的には、細胞増殖やアポトーシス誘導などに対する影響を検討し、OCT1阻害による治療効果の可能性を明らかにする。さらに、同細胞株を用いて遺伝子発現の網羅的解析マイクアレイを実施し、化合物投与に伴う発現変動遺伝子を抽出する。これらの結果を、すでに実施済みのPDX検体を用いたChIP-seqデータと比較・統合解析することで、OCT1が関与する転写ネットワークの全体像を明らかにし、治療標的候補の絞り込みを行う方針である。
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