| Project/Area Number |
23K09054
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56060:Ophthalmology-related
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
安藤 亮 北海道大学, 大学病院, 講師 (60399847)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2025: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
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| Keywords | 自己免疫性網膜症 / 抗網膜抗体 / 抗体価 / 癌関連網膜症 |
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| Outline of Research at the Start |
自己免疫性網膜症（AIR）は、血清中の抗網膜抗体が原因で網膜変性を引き起こす症候群の総称である。中高年に好発し、視野や視力を障害する。眼底所見のバリエーションは幅広く、しばしば正確な診断が困難である。網膜色素変性に類似して鑑別が難しいことも少なくない。抗網膜抗体は数多くの種類が報告されているが、抗recoverin抗体以外では臨床像との関連を検討したものはわずかしかなく、治療法も確立していない。本研究では、抗網膜抗体と眼底所見、抗体価と病勢を解析し、この難治性疾患の診断基準を作るためのデータを収集する。さらに抗体価と治療効果の関連について解析し、治療効果判定の指標となり得るかを検討する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
2023年度は新たに9名の自己免疫性網膜症患者の血清を得ることができた。これらに対してrecoverin、α-enolase、carbonic anhydrase 2（CAII）、aldolase Cに対する抗体4種類についてwestern blottingを行った。各抗体の陽性数は1例、3例、4例、0例であった。
過去に取得し保存していた血清も含め、ELISA法を用いて抗α-enolase抗体の抗体価を測定した。既報では抗網膜抗体の抗体価は吸光度で示されることが多かったが、この手法だと同時に測定した検体同士でないと比較することができないという難点があった。我々はコントロールとしてrabbit anti-Enolase antibodyを7段階希釈して検量線を引き、吸光度をrabbit anti-Enolase antibody濃度に換算できるようにした。rabbit anti-Enolase antibody 1µg/ml相当を1Uとして、全ての検体の抗体価をUで表すようにした。こうすることで、複数の実験結果を統合して検討することが可能となった。まず予備実験を3回行い、固相化するタンパク質の濃度、血清の希釈率、二次抗体の濃度、コントロール抗体濃度の最適化を行った。その後、本実験を3回行い36検体の抗体価を測定した。同一検体における抗体価のばらつきは大きくなく、検査の妥当性を確認できた。
抗α-enolase抗体陽性自己免疫性網膜症14例の臨床像と抗α-enolase抗体価を比較した。抗体価は0～0.43Uであった。網膜電図との関連はみられなかった。採血時視力と抗体価、最終視力と抗体価に有意な相関がみられたことから、疾患活動性や視力予後を予測するのに有用であることが示唆された。また、この結果は妥当なものである点からも、今回のELISA法の妥当性を示すことができた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
概要で述べたように抗体価測定を確立することができ、臨床像との比較まで行えた。
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| Strategy for Future Research Activity |
計画書の通り進める。つまり、他の抗網膜抗体についてのwestern blottingを行い、正常者や他疾患患者の抗α-enolase抗体価も測定し、抗体価の診断有用性を評価する。さらに、その他の抗体についても抗体価を同様に評価する。
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