| Project/Area Number |
23K09333
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 57060:Surgical dentistry-related
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
高石 和美 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 准教授 (20325286)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
工藤 保誠 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (50314753)
川人 伸次 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (60284296)
湯本 浩通 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (60284303)
毛利 安宏 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 講師 (80464353)
木下 浩之 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 徳島大学専門研究員 (70291490)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2025: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
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| Keywords | 全身性炎症性疾患 / 歯周炎 / 冠動脈内皮細胞 / 酸化ストレス / 歯周病 / 全身炎症性疾患 |
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| Outline of Research at the Start |
本研究では以下の検討を行う。
1) ヒト血管内皮細胞ヒト血管平滑筋細胞およびモデル動物における歯周病重症化および心血管疾患関連遺伝子発現動態 2) モデル動物における歯周炎による血管病変促進効果。 3) 1, 2)の系における，局所麻酔薬と生活習慣病治療薬の影響 4) メカニズム検討：酸化ストレスおよび鉄代謝が与える影響 5) 上記の実験系における血管機能改善効果をもつ薬剤の効果
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯周炎が惹起する全身炎症性疾患の一つに冠動脈疾患があげられる。歯周病が惹起する全身炎症性反応が冠動脈血管内皮細胞のRNA発現に与える影響を検討するため，ヒト冠動脈血管内皮の初代細胞（Lifeline Cell Technology社より購入）を培養し，60 mmシャーレに推奨濃度（2,500個/cm2）で播種した。コンフルエントになった細胞にPorphyromonas gingivalis由来のリポポリサッカライド（LPS, 10 μg/ml）を4時間または12時間作用させた。細胞からRNAを抽出し，RNAシークエンス解析により網羅的解析を行った。
その結果，Porphyromonas gingivalis由来LPSを12時間作用では遺伝子発現にほとんど変化がみられなかった。一方，Porphyromonas gingivalis由来LPSを4時間作用させた細胞（LPS群)のRNAシークエンス解析では，LPSを作用させていないコントロールの細胞と比較して種々の遺伝子発現が変化した。また，同様の系でLPS（10 μg/ml）＋リドカイン（20 μg/ml）を4時間作用させた細胞（Lid群)のRNAシークエンス解析を行い，LPS群と比較しLid群で発現が有意に上昇あるいは低下した遺伝子群のリストを作成した。そのなかから数種類の遺伝子を選択しリアルタイムPCRを行っている。さらに，冠動脈疾患と関わる全身疾患治療薬の影響を検討する予定で研究をすすめている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今年度はヒト血管内皮細胞を用いて心血管疾患関連遺伝子発現動態について検討した。関連遺伝子発現のタイムコースについて予測し，具体的な関連遺伝子群のリストを作成した。RNAシークエンス解析で発現動態が変化した遺伝子の発現をリアルタイムPCRにより検討をすすめている。当初予定の研究実施計画に沿っておおむね予定通りに進行したといえる。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き数種類の遺伝子を選択しリアルタイムPCRを行っていく予定である。また，結果により必要なら免疫組織化学的染色による検討を加える予定である。リドカイン以外には、プラバスタチン、アロプリノールの与える影響の検討をすすめる。
培養系実験のなかには繰り返しの実験や時間のかかる計画があるため今後は予定通りとならないことも予想されるが、研究協力者による協力を得ながらすすめていく予定である。
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