• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to previous page

Ultrasound mechanosensing: elucidation of the role of piezo1 on its regulation of cellular function

Research Project

Project/Area Number 23K11802
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 90110:Biomedical engineering-related
Research InstitutionUniversity of Toyama

Principal Investigator

田渕 圭章  富山大学, 学術研究部薬学・和漢系, 教授 (20322109)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 長谷川 英之  富山大学, 学術研究部工学系, 教授 (00344698)
鈴木 信雄  金沢大学, 環日本海域環境研究センター, 教授 (60242476)
古澤 之裕  富山県立大学, 工学部, 准教授 (80632306)
平山 順  公立小松大学, 保健医療学部, 教授 (90510363)
Project Period (FY) 2023-04-01 – 2026-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Keywords超音波 / メカノセンシング / ピエゾ1
Outline of Research at the Start

臨床において低出力パルス超音波 (LIPUS) は,骨折治療に用いられている.しかしながら,LIPUSの作用の分子メカニズムは,未だに不明な点が多い.ピエゾ1は,メカニカルストレスを感知するイオンチャネルで,様々な生命現象に関与することから,その医療への応用が期待されている.本申請では,LIPUSによる細胞分化等の機能制御においてピエゾ1がどの様に関与しているのかを,細胞,組織と動物レベルで検討する.LIPUSのピエゾ1を介した超音波メカノセンシング機構が明らかになれば,LIPUSの骨折治癒促進作用機序の解明や新規骨疾患治療への貢献に繋がる.

Outline of Annual Research Achievements

臨床において低出力パルス超音波 (LIPUS) は,骨折治療に用いられている.一方で,この安全で有効なLIPUSの作用の分子メカニズムは,未だに不明な点が多い.
臨床で骨折治療に用いられている用超音波照射器 (セーフス,帝人ファーマ) と出力が同等の実験用超音波照射器を用いた.キンギョの再生ウロコを6穴シャーレに入れ,シャーレの下部からLIPUSを20分間1回照射した (超音波周波数: 1.5 MHz, DF: 20%,パルス繰り返し周波数: 1 kHz,出力: 30 mW/cm2).照射したウロコを一定時間15℃培養し,骨芽細胞と破骨細胞の酵素活性と網羅的な遺伝子発現解析を行った.
LIPUSの1回照射により,破骨細胞のマーカー酵素TRAP活性は変化しなかったが,骨芽細胞のマーカー酵素ALP活性が有意に上昇した.LIPUSにより骨芽細胞の分化が誘導されることが明らかとなった.次世代シーケンサーを用いた遺伝子の網羅的な解析により,LIPUS照射の3,6と24時間後で数多くの遺伝子の発現が変動することが示された.現在,バイオインフォマティクスの技術を用いて,骨芽細胞の分化に関与する遺伝子を調査中である.
LIPUSの作用におけるピエゾ1の役割を検討するために,ピエゾ1機能阻害条件の検討を行った.マウス骨芽細胞MC3T3-E1細胞においてピエゾ1に対するsiRNAは,そのmRNAレベルを有意に低下させたがタンパク質レベルには影響を与えなかった.現在,新たなsiRNAとゲノム編集技術を用いてピエゾ1機能阻害の条件を検討中である.他方,ゲノム編集技術を用いて超音波のメカノセンシングに関与することが報告されているFAKノックアウト細胞の構築に成功した.また,同技術を用いて熱ショックタンパク質Hsp70の核内輸送タンパク質Hikeshiのノックアウト細胞を構築した.

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

令和5年度は,キンギョのウロコにおける低出力パルス超音波 (LIPUS) に応答する遺伝子を数多く明らかにすることができた.ゲノム編集技術を用いて,超音波のメカノセンシングに関与するFAKノックアウト細胞,また,熱ショックタンパク質Hsp70の核内輸送タンパク質Hikeshiのノックアウト細胞の構築に成功した.以上より,研究は概ね良好に進捗したと判断した.

Strategy for Future Research Activity

R6年度,ゲノム編集やRNAi技術を用いてピエゾ1機能阻害細胞を構築し,低出力パルス超音波 (LIPUS) のメカノセンシングにおけるピエゾ1の役割を明らかにする.骨芽細胞の石灰化における関連遺伝子を明らかにする.その石灰化におけるピエゾ1の役割を調べ,LIPUSの効果におけるピエゾ1の役割を解明する.キンギョのウロコの実験系を用いて,骨芽細胞の分化に関与する遺伝子を明らかにする.
次年度の研究を実施するために以下の使用を計画している.試薬類:652千円.培養器具類:300千円.抗体類:300千円.国内旅費:200千円.人件費・謝金:200千円.その他:200千円.

Report

(1 results)
  • 2023 Research-status Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2023

All Journal Article (3 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 3 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] Melatonin is more effective on bone metabolism when given at early night than during the day in ovariectomized rats2023

    • Author(s)
      Miki Yukari、Seki Azusa、Mishima Hiroyuki、Maruyama Yusuke、Watanabe Kazuki、Kobayashi-Sun Jingjing、Kobayashi Isao、Kuroda Kohei、Oshima Shion、Okamoto Takeru、Matsubara Hajime、Srivastav Ajai K .、Tabuchi Yoshiaki、Hirayama Jun、Hattori Atsuhiko、Suzuki Nobuo
    • Journal Title

      Melatonin Research

      Volume: 6 Issue: 2 Pages: 161-172

    • DOI

      10.32794/mr112500147

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Stanniocalcin in the Corpuscles of Stannius Inhibits the Osteoclastic Activation by Regulating the Rankl/Opg Expression2023

    • Author(s)
      Kouhei Kuroda、Ajai K. Srivastav、Akiko Suzuki、Muhammad Ahya Rafiuddin、Kenji Toyota、Masato Endo、Masato Honda、Kazuki Watanabe、Yusuke Maruyama、Yoshiaki Tabuchi、Atsuhiko Hattori、Makoto Urata、Hajime Matsubara、Nobuo Suzuki
    • Journal Title

      Journal of Biological Regulators and Homeostatic Agents

      Volume: 37 Pages: 5141-5149

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] An adverse outcome pathway-based approach to assess the neurotoxicity by combined exposure to current-use pesticides2023

    • Author(s)
      Hirano Tetsushi、Ikenaka Yoshinori、Nomiyama Kei、Honda Masato、Suzuki Nobuo、Hoshi Nobuhiko、Tabuchi Yoshiaki
    • Journal Title

      Toxicology

      Volume: 500 Pages: 153687-153687

    • DOI

      10.1016/j.tox.2023.153687

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 低出力パルス超音波による骨分化誘導促進作用におけるアクチン細胞骨格の関与の検討2023

    • Author(s)
      田渕圭章,平野哲史,長岡 亮,大村眞朗,長谷川英之
    • Organizer
      日本超音波医学会第96回学術集会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] マウス骨由来細胞における骨形成分化に対する低出力パルス超音波の作用2023

    • Author(s)
      田渕圭章,平野哲史,古澤之裕,長岡 亮,大村眞朗,鈴木信雄,長谷川英之
    • Organizer
      日本超音波医学会令和5年度第4回超音波分子診断治療研究会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] HikeshiノックアウトHSC-3ヒト口腔扁平上皮がん細胞の温熱感受性.2023

    • Author(s)
      田渕圭章,柚木達也,古澤之裕,皆川沙月,平野哲史,林 篤志
    • Organizer
      日本ハイパーサーミア学会第 40 回大会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] 宇宙空間における新規メラトニン誘導体のウロコの骨代謝に対する作用と地上における骨疾患モデル動物を用いた解析2023

    • Author(s)
      鈴木信雄,古澤之裕,田渕圭章,関あずさ,高垣裕子,染井正徳,江尻貞一,池亀美華,黒田康平,関口俊男,松原 創,高橋昭久,平山 順,服部淳彦.
    • Organizer
      日本宇宙生物科学会第37回大会
    • Related Report
      2023 Research-status Report

URL: 

Published: 2023-04-13   Modified: 2024-12-25  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi