生殖腺刺激ホルモンはタウリン合成を促進するのか？

• Project/Area Number: 23K14025
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 40040:Aquatic life science-related
• Research Institution: Fisheries Research and Education Agency
• Principal Investigator: 鈴木 博史 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産技術研究所(南勢), 任期付研究員 (40909636)
• Project Period (FY): 2023-04-01 – 2026-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000); Fiscal Year 2025: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2024: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000); Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
• Keywords: ニホンウナギ / 生殖腺刺激ホルモン / タウリン

Outline of Research at the Start

ニホンウナギは、飼育環境下では自然に生殖腺が発達しない。近年、本種の機能的な2種組換え生殖腺刺激ホルモン（組換えGths）を用いた成熟誘導が可能となったが、雌では安定的に良質卵を得ることが困難である。これまでの研究成果により、卵成熟誘導処理によって、タウリン合成に関わる酵素遺伝子の発現が高まることが明らかとなった。タウリンは、卵質を向上させる含硫アミノ酸様化合物であると考えられているものの、卵巣における合成制御機構は分かっていない。そこで本研究は、タウリンが卵形成に重要な役割を果たしているとの仮説のもと、卵巣におけるタウリン合成と組換えGthsによるタウリン合成制御機構を明らかにする。

Outline of Annual Research Achievements

ニホンウナギの卵成熟誘導前後の卵濾胞において、タウリンの合成と輸送に関わる遺伝子の発現量が増加した。タウリンは、卵質を向上させる含硫アミノ酸様化合物であると考えられているものの、卵巣における合成制御機構は分かっていない。そこで本研究は、卵巣における組換え濾胞刺激ホルモン（組換えFsh）と組換え黄体形成ホルモン（組換えLh）によるタウリン合成制御機構を明らかにするため、まず、タウリン合成と輸送に関る遺伝子を単離した。続いて、卵濾胞を短期培養することで、各遺伝子の発現に及ぼす組換えFshと組換えLhの影響を明らかにした。
タウリンの合成と輸送に関る遺伝子として、システインジオキシゲナーゼ(Cdo)、システアミンジオキシゲナーゼ（Ado-aとAdo-b）、システインスルフィン酸デカルボキシラーゼ（Csad）、グルタミン酸デカルボキシラーゼ様タンパク質1（Gadl1）、タウリントランスポーター（Taut）とGABAトランスポーター2（Gat2）をコードする遺伝子を単離した。得られた配列を用いて分子系統解析を行った結果、それぞれ他の脊椎動物で単離されているものと同一のクラスターを形成したことから、ニホンウナギcdo、ado-a、ado-b、csad、gadl1、tautおよびgat2であると考えられた。
次に、核移動期に達した卵母細胞を有する個体の卵巣から卵濾胞を単離し、組換えFshと組換えLhを添加した培養液で、卵濾胞を培養した。培養後、卵濾胞を回収し、RNA抽出、逆転写を行い、cDNAを得た。このcDNAを用いて、各遺伝子をqPCRで測定した結果、組換えLh添加群において、cdoとtaut遺伝子のみ、発現量の有意な増加が認められた。以上の結果、核移動期の卵濾胞におけるcdoとtaut遺伝子発現は、組換えLhの影響を受けることが明らかとなった。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初の予定通りに実施できたことから、自己評価を「おおむね順調に進展している」とした。

Strategy for Future Research Activity

卵巣におけるCdoとTautの発現場所の特定のため、抗体作製を試みる。また、卵成熟誘導処理によって、血中と卵濾胞中のタウリン量が変化するのか明らかにする。加えて、卵巣培養系にて、システインからタウリンが合成されるのか明らかにする。