| Project/Area Number |
23K14079
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 42020:Veterinary medical science-related
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
岡田 彩加 岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (70784221)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
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| Keywords | 食中毒 / カンピロバクター / 生きているが培養できない / 病原性 / マウスモデル |
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| Outline of Research at the Start |
近年の細菌による食中毒の原因として最も多くを占めるカンピロバクターは環境ストレスにより、生きているが寒天培地で分離・培養できない(Viable but not culturable： VBNC)状態となる。VBNC菌は培養により検出できないため、食中毒菌の汚染度が過少に評価されている可能性があるが、VBNC菌が食中毒の原因となるのかはわかっていない。本研究では、近年新たに発表されたカンピロバクター食中毒モデルマウスを用いて、申請者らが確立した手法により誘導したVBNC菌を接種して病原性の検証を行い、VBNC菌による食中毒発生リスクを世界で初めて検証する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年の細菌による食中毒の原因として最も多くを占めるカンピロバクターは環境ストレスにより、生きているが寒天培地で分離・培養できない(Viable but not culturable： VBNC)状態となる。本研究では、近年新たに発表されたカンピロバクター食中毒モデルマウスを用いて、VBNC菌による食中毒発生リスクを検証することを目的とした。Campylobacter jejuni投与2週間前から亜鉛欠乏食を与え、投与4日～1日前まで、複数の抗生物質を飲水で投与して作成したカンピロバクター食中毒モデルマウス（C57BL/6、3週齢、雄）を用いて検証を行った。培養可能菌または実験室内で好気、低温条件で誘導したVBNC菌をモデルマウスに経口投与した。培養可能菌投与では、培養およびリアルタイムPCR法の両方において糞便中の菌の増殖を認め、投与後7日目に最も高い菌数となった。これより、培養可能菌はマウス腸管に定着し増殖できることが示唆された。一方、VBNC菌投与では菌の増殖が認められず、マウス腸管内に定着できない可能性が示唆された。糞の状態異常、体重の変化、顕著な炎症を示す腸管の組織像、C. jejuni投与によるLCN-2およびMPO発現量の上昇は培養可能菌においても認められなかった。以上より、マウス腸管において培養可能菌は定着できる一方、VBNC菌は定着できず病原性をもたない可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
実施予定であったモデルマウスへを用いた感染実験を実施できたことから、予定通り進捗していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
培養可能菌投与において、参考文献で認められた症状が認められなかったため、抗生物質の投与期間などを延長して再検討を行う必要があると考えられる。一方、腸管への定着が認められなかったことから、VBNC状態のC.jejuniは食中毒を起こさない可能性もあり、今後はヒト腸管上皮培養細胞を用いた検証も含めて検証を進める予定である。
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