| Project/Area Number |
23K14510
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 49040:Parasitology-related
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
渡邊 菜月 東京大学, 大学院医学系研究科(医学部), 客員研究員 (00883323)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
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| Keywords | レトロマー / Rab-GAP / Entamoeba / エンドサイトーシス / 赤痢アメーバ / 貪食 / 酸性化 / 小胞輸送 |
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| Outline of Research at the Start |
リソソームの機能維持とプロテアーゼの輸送制御は複雑な細胞内小器官をもつ真核生物の生存の要である。プロテアーゼ輸送体はレトロマーや補助因子であるSNX、Rab7aと結合しプロテアーゼ輸送を制御する。レトロマーは3つのコアタンパク質(Vps26, 29, 35)により形成される。赤痢アメーバで病原性の中核を担うレトロマーは、他種生物に類を見ないほどコアタンパク質が多様化していた。コアタンパク質の組み合わせにより、3種類の複合体(レトロマーα,β,γ)が存在する。現在までにエンドサイトーシスやプロテアーゼの輸送にはレトロマーαの関与を明らかにした。本研究では、レトロマーβの機能を明らかにする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
レトロマーβの機能解析を行うにあたり、Vps26-5, Vps35-4,5の遺伝子発現抑制株(gs)、EhRab7A-GAPのタグ付き発現株を樹立した。Vps26-5gsを用いて、エンドサイトーシスの効率測定を行ったが、コントロールとの差がほとんど見られなかった。今後、gs株樹立時の選択薬剤濃度の至適条件の検討などを行い、再度エンドサイトーシス効率測定を行う。
また、定常状態のHA-Rab7A-GAP, HA-SNX3(レトロマーβの結合因子)の局在解析を免疫染色により確認した。細胞質への局在がみられ、膜上への局在はあまり見られなかった。今後、phagocystosis時や、trogocytosis時の局在を確認したい。
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