| Project/Area Number |
23K14513
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 49040:Parasitology-related
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
田中 美緒 宮崎大学, 医学部, 助教 (00910689)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | 糞線虫 / 粘膜侵入 / 細胞間接着 / 腸管寄生線虫 / 上皮細胞間接着 |
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| Outline of Research at the Start |
ネズミの腸管寄生虫であるヴェネズエラ糞線虫は、種々の活性物質を分泌しながら腸粘膜上皮の細胞間に侵入する。その際、上皮細胞や周囲組織の破壊を伴わず、局所的に上皮細胞間接着を破綻させることで侵襲を最小限にして侵入すると考えられているが、細胞・分子レベルでの動態は未知な点が多い。本研究では、糞線虫侵入に伴い宿主上皮細胞や細胞間接着に起こる変化を形態学的・分子生物学的視点から明らかにし、上皮細胞間接着の非侵襲的な機能制御法の開発につなげることを目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、げっ歯類の寄生線虫であるベネズエラ糞線虫感染に伴う細胞間接着の構造と接着タンパクの発現変化を形態学的・分子生物学的視点から解析し、ベネズエラ糞線虫の非侵襲的上皮侵入機構を明らかにすることを目的としている。本年度は培養細胞・小腸オルガノイドを用いたin vitro実験への着手とともにマウスを用いたin vivo実験の継続を行った。
in vitro実験ではCaco-2細胞を用いてベネズエラ糞線虫寄生世代メス成虫もしくはベネズエラ糞線虫寄生世代メス成虫由来E/S productの共培養前後での細胞間接着関連タンパク（claudin、occludin、E-cadherin、β-catenin、desmoglein）の発現動態を蛍光免疫染色で評価した。また、小腸オルガノイドに関してはマウス小腸からオルガノイド培養後、単層培養を行い、ベネズエラ糞線虫寄生世代メス成虫もしくはベネズエラ糞線虫寄生世代メス成虫由来E/S productの共培養を試みている。今後、Caco-2培養細胞モデルを用いた実験で得られた知見を基に実験を展開していく予定である。また、経上皮電気抵抗評価を含めた透過性解析も行っていく。
また、in vivo実験では非感染マウス・ベネズエラ糞線虫感染8日目・感染13日目マウス小腸上皮において引き続き細胞間接着関連タンパクの免疫組織化学による検討を行った。今後はより感染早期での小腸粘膜の検討を同様に行っていく。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
マウス小腸オルガノイドへの糞線虫感染実験が当初の計画よりも遅れているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
マウス小腸オルガノイドへのE/S productおよび糞線虫虫体共培養実験を中心に進展させる。
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