| Project/Area Number |
23K14606
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 50010:Tumor biology-related
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| Research Institution | Osaka Medical and Pharmaceutical University |
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Principal Investigator |
辻野 拓也 大阪医科薬科大学, 医学部, 助教 (60937407)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2023: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
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| Keywords | 前立腺癌 / 薬物耐性 / PARP阻害 / 薬剤耐性 / PARP阻害剤 |
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| Outline of Research at the Start |
PARP阻害剤はBRCA1/2変異を有する前立腺がんを含めた固形がん患者において有効性が示されているものの、乳がん、卵巣がんにおいては薬剤耐性の克服が困難を極めており、今後前立腺がんおいても課題となることが予想される。申請者らは、前立腺がん細胞株を用いたCRISPRスクリーニングを行うことにより、PARP阻害剤の感受性、および薬剤耐性に関わる遺伝子を同定してきた。本研究課題では、PARP阻害剤耐性株を樹立し、包括的遺伝子網羅解析による薬剤耐性メカニズムの解明、および薬剤耐性克服のための新規治療法の開発を目的としている。
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| Outline of Annual Research Achievements |
前立腺がんは男性における罹患数が第一位（2018年時点）の疾患であり、去勢抵抗性前立腺がん（CRPC）の5年生存率は依然として低く新たな治療法の開発が喫緊の課題となっている。PARP阻害剤（Olaparib、Rucaparib、Niraparib、Talazoparib）は、治療抵抗性の様々な固形がんにおいて有効性が示されている。しかしながら、乳がん、卵巣がんにおいてもすでに臨床的に認められているPARP阻害剤の薬剤耐性克服は困難を極めている。そして今後PARP阻害剤普及に伴い、前立腺がんにおいても今後同様の課題が生じるのは必至である。本研究課題では、Multi-omics解析とCRISPRスクリーニング解析により、PARP阻害剤の薬剤耐性に関わる遺伝子、およびそのメカニズムを解明し、克服法の開発を目指す。前立腺がん細胞株C4-2Bの樹立したPARP阻害剤耐性細胞株C4-2BRにおけるWhole exome sequencingにより189遺伝子の変異が確認された。そのうちCRISPRスクリーニング解析のPositive selectionから同定された抵抗性遺伝子と共通のPARP1を含む５つの遺伝子が同定された。これらの機能喪失によりPARP阻害剤抵抗性を検証するため、ノックアウト細胞株を作製しそれらのPARP阻害剤感受性を増殖アッセイ、およびマウス皮下移植モデルにより検証中である。また同細胞のRNA sequencingの結果から親株と比較して高発現している956遺伝子を同定した。そのうち8遺伝子がそのノックアウトによりPARP阻害剤と合成致死を誘導することがCRISPRスクリーニング解析より確認された。現在、これらのノックアウト細胞株および阻害剤によりPARP阻害剤の感受性を検証中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
予定していたPARP阻害剤耐性細胞株の樹立、それに対するRNA-sequencing、およびWhole exome sequencingによりPARP阻害剤耐性に関わる遺伝子変異を同定に至ったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
前述の同定された遺伝子のノックアウト細胞株、および阻害剤を用いてPARP阻害剤感受性を検証する。感受性変化が検証された遺伝子については、それらの遺伝子がPARP阻害剤耐性を引き起こすメカニズムに関して関連する機能解析を行う。それらの結果を学術集会、および論文として報告していく予定である。
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