AMeD症候群に対する遺伝子治療の開発に向けた基礎的検討

• Project/Area Number: 23K14959
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 52050:Embryonic medicine and pediatrics-related
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 濱田 太立 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (60845171)
• Project Period (FY): 2023-04-01 – 2026-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000); Fiscal Year 2025: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2023: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
• Keywords: AMeD症候群 / ホルムアルデヒド / 遺伝子治療

Outline of Research at the Start

ヒトの主要なホルムアルデヒド代謝酵素であるADH5とALDH2の同時欠損により発症するAMeD症候群は予後不良な難治性疾患であるが、以前として病態解明は不十分であり、本疾患に対する根治療法は存在しない。本研究では、一部の組織へのFA代謝酵素の遺伝子導入が、体内の全組織におけるFA毒性の軽減に寄与するかを検討することを目的として、ホルムアルデヒド代謝酵素が欠損した細胞と正常な細胞が混在するキメラマウスの樹立・解析と、疾患モデルマウスに対するAdh5の遺伝子導入を行う。本研究は、AMeD症候群の病態解明及び治療法開発の基盤となることが期待される。

Outline of Annual Research Achievements

当該年度は、モデルマウスの作製とホルムアルデヒド測定系の開発を行った。Aldh2ノックアウトマウス（B6.129P2-Aldh2&lt<tm1Kaw>）の準備と並行して、CRISPR/Cas9システムを用いた胚操作によりAdh5ノックアウトマウスを作成した。また、生体試料中のホルムアルデヒドを安定した化合物に誘導体化し、高速液体クロマトグラフィーを用いて分離・検出する方法を開発し、これにより生体試料中のホルムアルデヒドを高感度に定量できた（定量下限0.5 micromolar）。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

ホルムアルデヒド測定系の開発は予定通り進んでいる。キメラマウスの作製はやや遅れているが、概ね計画通りに進んでいる。

Strategy for Future Research Activity

Adh5-/-Aldh2-/-キメラマウスを作成し、マウスの表現型、予後の評価、各臓器におけるAdh5-/-Aldh2-/-細胞の組織学的評価を実施する。引き続いて、遺伝子導入のためのトランスファーベクターを作成する。