| Project/Area Number |
23K15072
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 53010:Gastroenterology-related
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
中村 由子 愛媛大学, 医学部附属病院, 助教 (40867256)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
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| Keywords | NASH肝がん / B細胞活性化因子 / 肝癌 / 微小環境 / BAFF / MDSC |
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| Outline of Research at the Start |
本研究は脂肪性肝疾患の治療戦略となる病態の中で肝発癌に照準を当て解析することを目的とする。今回の研究では、BAFFのNASH由来肝発癌への役割と腫瘍免疫への影響を動物モデルや細胞を用いて明らかにする。以下を立案している。１：ノックアウトマウスを用いたBAFFによるNASH肝発癌への影響と機序の解析、２：BAFFを介したNASH肝癌に関わる免疫担当細胞の解析、３：他のモデルマウスや治療介入による検証、４：臨床検体を用いた検証である。本研究では、脂肪性肝疾患に起因する癌治療へBAFFを臨床応用に展開する上での基盤となる研究成果が得られるものと考えている。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究はNon-alcoholic steatohepatitis (NASH)から肝発癌に焦点をあて解析を行うことを目的とし、ヒトNASH肝がんに類似した病態をもつモデルマウス作成の必要がある。コントロールマウスであるC57BL6/Jと、BAFF欠損マウスを用いてまずはNASH肝がんモデルマウスを作成した。生後6週齢から高コレステロール含有高脂肪フルクトース添加食で飼育開始、また生後6週齢から週1回、四塩化炭素(0.2μL/g)を腹腔内に24週間投与しNASH肝がんモデルを得た。
得られたマウスの肝重量は、BAFF欠損マウスでコントロールマウスよりも大きい傾向であったが有意差は認めなかった。肝HE染色で、BAFF欠損マウスでは炎症を表すCrown-like structureが有意に少なく、肝臓TNFαやIL-6、MCP-1といった炎症に関与するmRNAの発現も有意にBAFF欠損マウスで低かった。次に肝線維化についても検討した。TGFβ-1やCol-1a1などの肝線維化に関与するmRANの発現も炎症と同様にBAFF欠損マウス肝臓で有意に低かった。
次に肉眼的発癌状況について検討した。24週齢時点で、BAFF欠損マウスはコントロールマウスよりも肉眼的腫瘤合併率が低く(BAFF欠損マウスで10%、コントロールマウスで90%)、また合併腫瘤の個数が少なく、サイズが小さい（BAFF欠損マウスで5mm以上が10%、コントロールマウスで5mm以上の腫瘤が35%、5mm未満の腫瘤が55%）結果であった。
ヒト同様に炎症、線維化に続く発癌を模倣できているモデルであり、機序の解析を引き続き行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ヒト類似のNASH肝がんモデルマウス作成がマウス繁殖含めて順調に進行しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き得られたサンプルの組織学的、遺伝子・蛋白レベルでの解析を行う必要がある。具体的には肝臓内の脂肪含有解析や、細胞周期に関係する染色の追加を行う。また、発癌・癌進行に関係する細胞周期、炎症、酸化ストレスなどといった発現に関してもin vivo で検証する。肝浸潤細胞の解析を行い、制御性T細胞やMDSCなどの抑制系細胞の関係も行う。
また、in vitroでの実験系も並行して行う必要がある。
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