滑膜肉腫に対するDual Targeting CAR-T細胞療法の新規開発

Research Project

Project/Area Number	23K15683
Research Category	Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
Allocation Type	Multi-year Fund
Review Section	Basic Section 56020:Orthopedics-related
Research Institution	Niigata University
Principal Investigator	村山雄大新潟大学, 医歯学総合病院, 医員 (10973620)
Project Period (FY)	2023-04-01 – 2026-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help	¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000) Fiscal Year 2025: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000) Fiscal Year 2024: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000) Fiscal Year 2023: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywords	CAR-T細胞療法 / 滑膜肉腫
Outline of Research at the Start	滑膜肉腫は若年成人に好発する悪性軟部腫瘍であり、手術で完全切除が可能な場合は根治を目指せるが、再発・転移した場合は治療に難渋することが多い。CAR-T細胞療法は白血病・リンパ腫の治療に革新的変化をもたらした、新しい免疫療法であるが、その他の固形がんへの効果は限定的である。その理由として、固形がんにおける標的抗原は不均一な発現パターンを取る場合が多いため、単一の表面抗原を標的としたCAR-T細胞療法では効果に限界があるものと想定されている。本研究では、滑膜肉腫に対する複数抗原を標的としたCAR-T細胞療法の開発に取り組む。
Outline of Annual Research Achievements	本研究の目的は、有効な薬物療法の存在しない滑膜肉腫に対して、新しいキメラ抗原受容体（Chimeric Antigen Receptor：CAR）-T細胞療法を開発することである。申請者はこれまでHER2を標的としたCAR-T細胞およびNKp44受容体リガンドを標的としたCAR-T細胞の滑膜肉腫への抗腫瘍効果を報告している。これらのCAR-T細胞は、いずれも単独の抗原を標的としたものである。しかし、固形腫瘍に対するCAR-T細胞療法は抗原の不均一性に起因する成績不良が報告されている。本研究では、固形腫瘍に対するCAR-T細胞療法の問題を克服するため、2種類以上の抗原を同時に標的とするDual targeting CARを開発することを目的とした。研究初年度は、まずNKG2D受容体リガンドに対するCAR-T細胞を作成した。このNKG2D-based CAR-Tの単独での滑膜肉腫細部に対する抗腫瘍効果をin vitroで測定したところ、良好な抗腫瘍効果を確認できた。現在、学会での報告を行いながら、in vivoでの実験も準備中である。次に、NKG2DとHER2を同時に標的とするDual targeting CAR-T細胞を作成した。このCAR-T細胞の作成方法には何通りかの方法があると考えられるが、我々はまず2種類のウイルスベクターを同時にT細胞に遺伝子導入することで、HER2とNKG2Dの両者を標的とするCAR-T細胞を作成した。このDual targeting CAR-Tも滑膜肉腫細胞に対してin vitro実験で良好な抗腫瘍効果を見せたが、まだ安定してCAR-T細胞を生産する段階まで至っておらず、効率的な生産方法を模索中である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 本研究計画で予定している過程は、①NKG2D CAR-T細胞の作成と、滑膜肉腫細胞への抗腫瘍効果の検証、②2種類の表面抗原を同時に標的とするCAR（Dual targeting CAR）の作成、である。このうち第一段階のNKG2D CAR-T細胞の作成は完了しており、既にin vitroでの抗腫瘍効果も確認できているため、初年度の成果としては順調と考える。
Strategy for Future Research Activity	今後はNKG2D CARを使用した Dual targeting CAR-T細胞を作成する。HER2やNKp44など、これまで当科で報告したCARと組み合わせ、複数パターンのDual targeting CAR-Tを作成し、抗腫瘍効果を比較する。Dual targeting CAR-Tの作成方法として、現在は2種類のウイルスベクターから同時に遺伝子導入する手法を用いているが、1つのウイルスベクターに2種類のCAR遺伝子を搭載する手法も検討し、安定してDual targeting CAR-T細胞を生産できるようにしていく予定である。