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原子間力顕微鏡による発生胚レオロジーの定量3D解析技術の開発

Research Project

Project/Area Number 23K17872
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 29:Applied condensed matter physics and related fields
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

岡嶋 孝治  北海道大学, 情報科学研究院, 教授 (70280998)

Project Period (FY) 2023-06-30 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2023: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Keywords原子間力顕微鏡 / 発生胚
Outline of Research at the Start

受精卵の胚発生は、遺伝子・生化学的因子に加えて、細胞の力学特性(メカニクス)が密接に関係していると考えられている。しかし、発生胚は極めて柔らかく、外部刺激に対して脆いため、発生胚メカニクスのタイムラプス計測は困難であった。最近、申請者は、原子間力顕微鏡(AFM)を用いて発生胚の弾性を計測することに成功し、2次元(2D)の胚細胞メカニクスが明らかになってきた。一方で、発生胚の3D挙動は不明であり、その粘弾性(レオロジー)計測技術は未開である。本研究では、発生胚レオロジーの3Dナノ計測技術を開発する。そして、原腸陥入近傍の発生胚レオロジーの3D計測に挑戦する。

Outline of Annual Research Achievements

受精卵の胚発生は、遺伝子・生化学的因子に加えて、細胞の力学特性(メカニクス)が密接に関係していると考えられている。しかし、発生胚は極めて柔らかく、外部刺激に対して脆いため、発生胚メカニクスのタイムラプス計測に研究は少ない。最近、原子間力顕微鏡(AFM)を用いて、極めて柔らかい発生胚のメカニクスのタイムラプス計測が可能になりつつあるが、発生胚の深さ方向の力学計測技術は未開である。細胞メカニクスの主要因子である細胞骨格構造は、発生胚の表層(皮層)と内部において集積・脱離が制御されている。したがって、発生胚メカニクスの機序解明には、発生胚の深さ方向を含む3次元(3D)のレオロジー計測技術が不可欠である。本研究では、AFMの力学応答曲線のする新手法を提案し、発生胚レオロジーの定量3D計測システムの開発を目的としている。令和5年度は、3D解析を高速化するソフトウェア技術を開発した。スパースな画像を再構成することが可能な圧縮センシング法を用いて、細胞メカニクス像を再構成できることを明らかにした。また、発生胚細胞の間期において、ドット状の硬化構造が出現することを発見した。そして、この構造が、細胞分裂現象を制御している可能性があることが示唆された。さらに、 ボルツマンの重畳原理に基づく解析法と粘弾性接触理論を組み合わせた解析法を検討し、初期卵割期の各々の細胞のレオロジーを追跡することに成功した。正弦波力場の周波数(速度)と振幅(押込み量)を変動制御する新規AFM法の開発を進めた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

AFMの力学応答曲線のする新手法を提案し、発生胚レオロジーの定量3D計測システムの開発を目的としている。3D解析を高速化する技術として、圧縮センシングを用いた画像処理的に高速化する方法を提案した。また、発生胚細胞の間期において、細胞内にドット状の細胞硬化現象が発見した。このドット形成の空間分布が、細胞分裂方向と密接に関係していることを明らかにした。さらに、 正弦波力場の周波数(速度)と振幅(押込み量)を変動制御する新規AFM法について検討した。ボルツマンの重畳原理に基づく解析法と粘弾性接触理論を組み合わせた解析法を検討した。

Strategy for Future Research Activity

正弦波力場の周波数(速度)と振幅(押込み量)を変動制御する新規AFM法を開発する。また、ボルツマンの重畳原理に基づく解析法と粘弾性接触理論を組み合わせた解析法を確立する。そして、発生胚の3Dレオロジー構造を明らかにする。

Report

(1 results)
  • 2023 Research-status Report
  • Research Products

    (17 results)

All 2024 2023

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 3 results) Presentation (12 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Journal Article] Local intracellular stiffening of ascidian embryo in cleavage developmental stage observed by atomic force microscopy2024

    • Author(s)
      Takahiro Kotani, Yuki Miyata, Yosuke Tsuboyama, Yuki Fujii, Takaharu Okajima
    • Journal Title

      Japanese Journal of Applied Physics

      Volume: - Issue: 4 Pages: 04SP64-04SP64

    • DOI

      10.35848/1347-4065/ad3760

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Compressed sensing reconstruction of cell mechanical images obtained from atomic force microscopy2024

    • Author(s)
      Yuki Miyata, Feng-Yueh Chan, Takayuki Uchihashi, Takaharu Okajima
    • Journal Title

      Japanese Journal of Applied Physics

      Volume: - Issue: 4 Pages: 04SP46-04SP46

    • DOI

      10.35848/1347-4065/ad34de

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Atomic force microscopy for investigating cell and tissue mechanics as heterogeneous and hierarchical materials2023

    • Author(s)
      Takaharu OKAJIMA, Kaori KURIBAYASHI-SHIGETOMI
    • Journal Title

      Journal of Biomechanical Science and Engineering

      Volume: 18 Issue: 4 Pages: 23-00339-23-00339

    • DOI

      10.1299/jbse.23-00339

    • ISSN
      1880-9863
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Mechanical properties of epithelial cells in domes investigated using atomic force microscopy2023

    • Author(s)
      Kenta Shigemura, Kaori Kuribayashi-Shigetomi, Ryosuke Tanaka, Haruka Yamasaki, and Takaharu Okajima
    • Journal Title

      Frontiers in Cell and Developmental Biology

      Volume: 11 Pages: 1245296-1245296

    • DOI

      10.3389/fcell.2023.1245296

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Pathogenic Roles of Cardiac Fibroblasts in Pediatric Dilated Cardiomyopathy2023

    • Author(s)
      Tsuru Hirofumi、Yoshihara Chika、Suginobe Hidehiro、Matsumoto Mizuki、Ishii Yoichiro、Narita Jun、Ishii Ryo、Wang Renjie、Ueyama Atsuko、Ueda Kazutoshi、Hirose Masaki、Hashimoto Kazuhisa、Nagano Hiroki、Tanaka Ryosuke、Okajima Takaharu、Ozono Keiichi、Ishida Hidekazu
    • Journal Title

      Journal of the American Heart Association

      Volume: 12 Issue: 13

    • DOI

      10.1161/jaha.123.029676

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 原子間力顕微鏡によるアフリカツメガエル初期発生胚の力学測定2024

    • Author(s)
      山本実季、小谷崇博、宮田悠生、坪山洋介、山元孝佳、道上達男、岡嶋孝治
    • Organizer
      日本顕微鏡学会・SPM研究会2023
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] 大腸がん微小環境における線維芽細胞の物理測定2024

    • Author(s)
      山﨑遼、繁富(栗林)香織、岡嶋孝治
    • Organizer
      日本顕微鏡学会・SPM研究会2023
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      2023 Research-status Report
  • [Presentation] 原子間力顕微鏡を用いた初期発生胚のレオロジーと細胞運命に関する研究2024

    • Author(s)
      宮田悠生、小谷崇博、坪山洋介、藤井裕紀、岡嶋孝治
    • Organizer
      日本顕微鏡学会・SPM研究会2023
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      2023 Research-status Report
  • [Presentation] 原子間力顕微鏡による初期発生胚レオロジーの時空間挙動の測定2023

    • Author(s)
      小谷崇博、宮田悠生、坪山洋介、松尾智大、横堀恵美、藤井裕紀、岡嶋孝治
    • Organizer
      生物物理学会・メカノバイオ討論会 2023
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      2023 Research-status Report
  • [Presentation] 原子間力顕微鏡を用いた初期発生胚植物局側のレオロジーと細胞運命に関する研究2023

    • Author(s)
      宮田悠生、小谷崇博、坪山洋介、岡嶋孝治
    • Organizer
      生物物理学会・メカノバイオ討論会 2023
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] Atomic force microscopy reveals a relationship between rheological properties of cells and cell fates in the early developmental stages2023

    • Author(s)
      Y. Miyata, T. Kotani, Y. Tsuboyama, T. Matsuo, T. Okajima
    • Organizer
      31st International Colloquium on Scanning Probe Microscopy
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Spatiotemporal dynamics of single-cell rheology in developing embryos observed by atomic force microscopy2023

    • Author(s)
      T. Kotani, Y. Miyata, Y. Tsuboyama, T. Matsuo, M. Yokobori, Y. Fujii, T. Okajima
    • Organizer
      31st International Colloquium on Scanning Probe Microscopy
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Rheological properties of developing embryo in gastrula-stage depend on the cell fates: an atomic force microscopy study2023

    • Author(s)
      Y. Miyata, T. Kotani, Y. Tsuboyama, T. Matsuo, T. Okajima
    • Organizer
      第61回日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] Rheological properties of Submucosal and subperitoneal fibroblasts measured by atomic force microscopy2023

    • Author(s)
      H.Yamasaki, K.Kuribayashi-Shigetomi, M.Kojima, T.Okajima
    • Organizer
      第61回日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] Universality of single-cell rheology during cell division in developing embryo observed by atomic force microscopy2023

    • Author(s)
      T. Kotani, Y. Miyata, Y. Tsuboyama, T. Matsuo, M. Yokobori, Y. Fujii, T. Okajima
    • Organizer
      第61回日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] Rheological properties of single cells in developing embryo depend on the cell fates: an atomic force microscopy study2023

    • Author(s)
      Y. Miyata, T. Kotani, Y. Tsuboyama, T. Matsuo, Y. Fujii, T.Okajima,
    • Organizer
      第56回日本発生生物学会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] Quantifying rheological properties of embryonic cells in cleavage stage by atomic force microscopy2023

    • Author(s)
      T. Kotani, Y. Miyata, Y.Tsuboyama, M. Yokobori, T. Matsuo,Y. Fujii, T. Okajima
    • Organizer
      第56回日本発生生物学会
    • Related Report
      2023 Research-status Report

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Published: 2023-07-04   Modified: 2024-12-25  

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