| Project/Area Number |
23K19332
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
0605:Veterinary medical science, animal science, and related fields
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| Research Institution | Azabu University |
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Principal Investigator |
堀 香織 麻布大学, 獣医学部, 助教 (10980782)
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| Project Period (FY) |
2023-08-31 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | 乳牛 / 蹄病 / 趾皮膚炎 / ヘアリーアタック / トレポネーマ / Non-healing |
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| Outline of Research at the Start |
乳用牛におけるNon Healing Clow Lesions（以下NHCL）は、重度深部感染や骨融解を引き起こす難治性蹄疾患であり、発生機序や優勢菌は未だ解明されていない。本研究では、細菌学的・遺伝学的に病変部を探索し、NHCLの病変部細菌叢の解析を網羅的に行い、病変部構成細菌群を明らかにする。特に、次世代シークエンス（16SrRNAアンプリコンメタゲノム解析）を行い、病変部細菌叢を症例ごとの病変深度別に網羅的に解析することで、NHCLの深部感染を担う構成菌群を解明する。これは、未だ優勢菌が明らかとなっていないNHCLの病態解明の基盤となると考える。
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| Outline of Annual Research Achievements |
蹄病は乳房炎・繁殖障害と並ぶ、乳用牛における三大疾病の一つであり、乳量低下、繁殖成績の低下など多大な経済損失を引き起こす。Non Healing Clow Lesions（以下NHCL）は、2008年にイギリスで初めて報告された難治性蹄病であり、蹄の組織壊死・骨融解を伴う深部感染を引き起こし、罹患牛は重度跛行を呈する。本症には効果的な治療法がないため、罹患すれば廃用となる症例が多い。現在、蹄病変における優勢菌の検索が試みられているが、原因や発生機序はいまだ解明されていない。
先行研究において、NHCLの構成菌における感染菌群を定量的かつ網羅的に解析し、過去の研究報告と比較した。その結果、NHCLはBDDから進展した可能性があるという仮説は否定され、また、過去に報告されてきた優勢菌種も、優勢菌ではない可能性が示された。さらに、NHCLの原因と発生機序の解明のためには、NHCLの病態を経時的に解析すること、また、病変部の一部ではなく病変部を三次元的にとらえ広範囲に解析をする必要性が示された。深部に壊死が上行していくNHCLの病態を解明するためには、病変部の深度ごとの構成菌群の比較が必要である。より深部へ上行する細菌が、NHCLの起因菌となりうる可能性がある。NHCL病変を三次元的にとらえ、病変真皮の構成菌群を病変の深度ごとに網羅的に解析することで、NHCLの起因菌および病態解明に近づくと考える。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
現在、タイストールの酪農場において、NHCL罹患牛からNHCLサンプルを２個体から６検体採材した。６検体すべて、細菌培養検査、PCR検査、免疫組織化学的検査を行った。16SrRNAアンプリコンメタゲノム解析に関しては、６検体中５検体において解析済みである。
NHCLは全く発生がない農場も多く、また、蹄病変をサンプリングするには、初診で発見しサンプリングすることが条件となる。そのため、検体を集めることに時間を要している。現在、２個体から６検体採材済みだが、目標の検体数には到達していない。採材した検体の解析とともに、引き続き採材を行っている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、さらに採材を進め、検体を増やしていく予定である。計画通り、採材後すぐに、各種細菌検査を行う。病変真皮の構成菌群を病変の深度ごとに網羅的に解析することで、NHCLの起因菌および病態解明に近づくと考えている。結果から、多数の構成細菌群の中で、どの細菌が最も深部まで侵入しているかを考察する。NHCLは重度深部感染を起こす病態であり、その深部感染の起因となる細菌叢を探索することで、予防策の考案につながると考える。成果については学会発表を行い、論文を執筆する予定である。
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