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Establishment of a fast and efficient production method for pollen-free sugi seedlings by liquid culture technology

Research Project

Project/Area Number 23K21218
Project/Area Number (Other) 21H02244 (2021-2023)
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeMulti-year Fund (2024)
Single-year Grants (2021-2023)
Section一般
Review Section Basic Section 40010:Forest science-related
Research InstitutionForest Research and Management Organization

Principal Investigator

丸山 毅  国立研究開発法人森林研究・整備機構, 森林総合研究所, 研究専門員 (20353865)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 上野 真義  国立研究開発法人森林研究・整備機構, 森林総合研究所, 主任研究員 等 (40414479)
伊津野 彩子  国立研究開発法人森林研究・整備機構, 森林総合研究所, 研究員 (80816249)
Project Period (FY) 2021-04-01 – 2026-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2024)
Budget Amount *help
¥17,290,000 (Direct Cost: ¥13,300,000、Indirect Cost: ¥3,990,000)
Fiscal Year 2025: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,990,000 (Direct Cost: ¥2,300,000、Indirect Cost: ¥690,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,990,000 (Direct Cost: ¥2,300,000、Indirect Cost: ¥690,000)
Fiscal Year 2022: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Keywords液体培養 / 無花粉スギ / 不定胚形成 / クローン増殖 / 培養苗 / 培養細胞増殖 / バイオリアクター / 組織培養 / 遺伝子解析 / 遺伝マーカー / 無花粉スキ / 遺伝解析
Outline of Research at the Start

スギは日本の最重要林業樹種である一方、スギ花粉症患者は3000万人を超え、深刻な社会問題となっている。その対策として、無花粉スギの普及・拡大が急務となっている。針葉樹のクローン増殖技術においては、不定胚形成による個体再生系が最も効率の良い手法として知られているが、苗の生産性を飛躍的に向上させることができる不定胚の液体培養に成功した事例は殆ど少ない。そこで、液体培養技術を用いて、胚性万能細胞に由来する無花粉スギ苗の迅速効率的な生産法を開発することを本研究の目的である。得られる成果は、無花粉スギ苗だけではなく、他の品種・系統などに適用できることから、スギ培養苗の実用化に向けた生産技術の確立にも繋がる。

Outline of Annual Research Achievements

当年度の研究実績は、以下のとおり。
①予定していたバイオリアクターによる細胞の増殖における培養条件の探索は、ポンプシステムのトラブルにより、細胞増殖の実験を延期となった。来年度に実験を再開始する。
②液体培養による不定胚の成熟化を改善させるための培養条件を再検討した。その結果、液体培養条件に対する反応は細胞系統によって異なることが示唆された。得られた不定胚を発芽させ、植物体再生と苗化を進めた。
③不定胚への分化能力の高い細胞において、発現遺伝子の解析を進め、分化能力の高い細胞系統と低い細胞系統間で有意に発現の変動する遺伝子(DEG)を探索したところ、合計で2165個のDEGが同定された。一方で、系統間で共通するDEGは見つからなかった。また、RNA-seqデータを活用したレトロトランスポゾン解析において、26本のレトロトランスポゾンの配列が得られた。これらの配列は平均で6727bpの全長があり、いずれもTy3/gypsyレトロトランスポゾンに分類された。差次発現の解析では不定胚の誘導効率の高い細胞と低い細胞との間でレトロトランスポゾンの発現量の比較を比較したところ、14本のレトロトランスポゾンの配列が有意な差次発現を示した。これら14本のレトロトランスポゾンの発現は分化能力の高い細胞系統では低く、レトロトランスポゾンの発現が抑えられることで文化能力が維持される可能性が示唆された。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

令和5年度に予定していたバイオリアクターによる細胞の増殖における培養条件の探索は、ポンプシステムのトラブルにより、細胞増殖の実験を延期となり、次年度に実験を再開始する。これらにより、当年度に設定した研究目標をやや遅れている。

Strategy for Future Research Activity

次年度は、以下の研究を実施する。
①バイオリアクターによる細胞の増殖における培養条件の探索を再開始し、液体培養による不定胚の成熟化の技術高度化を引続き進める。
②得られた植物体を育成し、苗の形態・生理・遺伝学的解析と評価を開始する。
③細胞系統の解析や遺伝子の特定・遺伝マーカーの開発を引続き進める。

Report

(3 results)
  • 2023 Annual Research Report
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Annual Research Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2024 2023 2022 2021

All Journal Article (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] 無花粉スギの組織培養による増殖.2023

    • Author(s)
      上野真義、鶴田燃海、丸山E.毅、森口喜成.
    • Journal Title

      月刊「細胞」

      Volume: 55(4) Pages: 24-25

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Journal Article] Application of STH-PAS, a novel chromatographic visualization system of PCR products for rapid screening of male-sterile lines in Cryptomeria japonica2022

    • Author(s)
      Tsuruta M, Ueno S, Maruyama TE,Hakamata T,Moriguchi Y
    • Journal Title

      Bulletin of Forestry and Forest Products Research Institute

      Volume: 21(3) Pages: 223-227

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] 無花粉スギ-雄性不稔遺伝子の同定とその活用-2022

    • Author(s)
      上野真義、森口喜成、丸山毅
    • Journal Title

      ビルと環境(日本建築衛生管理教育センター発行、全68ページ)

      Volume: 176号

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] モデル植物としてスギを使う~針葉樹における新奇の光合成代謝の解明を例に.2024

    • Author(s)
      宮澤真一、西口満、大宮泰徳、上野真義、丸山E.毅.
    • Organizer
      日本森林学会大会学術講演集、135:106(S11-2).
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] MS1遺伝子型判定の簡易化と組織培養による無花粉スギ苗増殖への応用2022

    • Author(s)
      鶴田燃海、丸山毅、上野真義、長谷川陽一、森口喜成
    • Organizer
      日本森林学会大会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] スギにおける不定胚誘導遺伝子の探索2021

    • Author(s)
      伊津野彩子・丸山毅・上野真義・伊原徳子・森口喜成
    • Organizer
      森林遺伝育種学会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report

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Published: 2021-04-28   Modified: 2024-12-25  

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