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植物利用型有用タンパク質生産における環境制御:生理学と工学の両面からのアプローチ

Research Project

Project/Area Number 23K21247
Project/Area Number (Other) 21H02313 (2021-2023)
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeMulti-year Fund (2024)
Single-year Grants (2021-2023)
Section一般
Review Section Basic Section 41040:Agricultural environmental engineering and agricultural information engineering-related
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

松田 怜  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 准教授 (20547228)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 富士原 和宏  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (30211535)
Project Period (FY) 2021-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2024)
Budget Amount *help
¥17,030,000 (Direct Cost: ¥13,100,000、Indirect Cost: ¥3,930,000)
Fiscal Year 2024: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2023: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2022: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2021: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Keywords植物利用型有用タンパク質生産 / 環境制御 / 一過性遺伝子発現法 / ワクチン抗原 / ベンサミアナタバコ / 小胞体ストレス / ヘマグルチニン / GFP
Outline of Research at the Start

植物にワクチン抗原などの有用タンパク質の遺伝子を後天的に導入して、一過的に発現させる一過性遺伝子発現法は、有用タンパク質の迅速・大量生産法として注目されている。本研究では、有用タンパク質生産量を高めるための栽培環境制御を高度化することを目指して、植物の栽培環境が有用タンパク質生産量に及ぼす影響の生理的メカニズムの解明と、植物葉内の有用タンパク質含量のモニタリングに基づく動的環境制御の開発を行なう。

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、一過性遺伝子発現法を用いた植物利用型有用タンパク質生産において、有用タンパク質生産量を高めるための栽培環境制御をさらに高度化することを目指して、植物の栽培環境が有用タンパク質生産量に及ぼす影響の生理的メカニズムの解明と、植物葉内の有用タンパク質含量のリアルタイムモニタリングに基づく動的環境制御の開発を行なう。
(1)発現目的タンパク質としてインフルエンザヘマグルチニン(HA)を用いて、遺伝子導入後の気温がHAの生合成および分解に影響を及ぼすと考えられる各種因子について、関連遺伝子のmRNAレベルのデータを総合的に考察した。特に高温下でのHA分解について一定の知見が得られたため、成果を取りまとめて、投稿論文の準備を進めた。(2)開放型同化箱法を用いて、遺伝子導入後の個体群ガス交換速度を計測し、減圧浸潤処理~遺伝子導入~転写・翻訳の過程に伴う植物の光合成ガス交換へのストレスの影響を定量化し、それぞれの過程が乾物生産に及ぼすインパクトについて考察した。(3)発現目的タンパク質としてHAおよび緑色蛍光タンパク質(GFP)を用いて、遺伝子導入前の明期の異なる条件で栽培した、生育程度の異なるベンサミアナタバコについて、遺伝子導入時の各種生理的・形態的パラメータと導入後に生産される発現目的タンパク質量との関係を調べた。HAとGFPとで、その生産量に影響を及ぼす遺伝子導入時点でのパラメータが異なることが示唆された。今後、さらに詳細な検討を進める予定である。(4)これまでに開発した葉内GFP含量をリアルタイムで推定可能なシステムのプロトタイプについて、仕様や推定精度等の情報を整理し、投稿論文として取りまとめて公表した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

特段の不測の事態なく、研究計画調書および本年度の交付申請書に記載した研究実施計画にしたがって研究が進展しており、また得られた成果の公表も予定どおり行なってきているため。

Strategy for Future Research Activity

「遺伝子導入後の植物に生じるストレスの実態および環境制御による緩和効果の機構解明」では、気温以外の環境要素に着目した解析を進めるとともに、遺伝子発現、生理状態、光合成ガス交換など、多角的な観点からストレスレベルの定量を検討する。「有用タンパク質生産量に関わる遺伝子導入前の植物体内資源物質の探索」では、候補物質の探索に向けた網羅的解析について検討し、実際に解析に着手する。

Report

(3 results)
  • 2023 Annual Research Report
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Annual Research Report
  • Research Products

    (16 results)

All 2024 2023 2022 2021 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 2 results) Presentation (13 results) (of which Int'l Joint Research: 9 results,  Invited: 6 results)

  • [Int'l Joint Research] ルイビル大学(米国)

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Journal Article] Non-destructive estimation of the amount of green fluorescent protein transiently expressing in <i>Nicotiana benthamiana</i> leaves with a viral vector2024

    • Author(s)
      Ryo Matsuda, Shinya Urayama, Fumuki Hosoi, Kazuhiro Fujiwara
    • Journal Title

      Journal of Agricultural Meteorology

      Volume: 80 Issue: 1 Pages: 29-33

    • DOI

      10.2480/agrmet.D-23-00024

    • ISSN
      0021-8588, 1881-0136
    • Year and Date
      2024-01-10
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Inter-batch variability of hemagglutinin content transiently expressed in <i>Nicotiana benthamiana</i> plants grown under sole-source lighting and sunlight conditions before gene transfer2022

    • Author(s)
      Ryo Matsuda
    • Journal Title

      Journal of Agricultural Meteorology

      Volume: 78 Issue: 4 Pages: 164-173

    • DOI

      10.2480/agrmet.D-22-00019

    • ISSN
      0021-8588, 1881-0136
    • Year and Date
      2022-10-10
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] Optimizing productivity of plant-made pharmaceutical proteins under indoor controlled environment2023

    • Author(s)
      Ryo Matsuda
    • Organizer
      Indoor Ag Science Cafe
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Exploring optimal plant growth environments before and after agroinfiltration in viral vector-based transient gene expression2023

    • Author(s)
      Ryo Matsuda
    • Organizer
      The 3rd Asian Conference for Plant Made Pharmaceuticals (PMPAsia 2023)
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Plant-made pharmaceuticals as a highly valuable product producible in vertical farms: Environmental control to maximize productivity2023

    • Author(s)
      Ryo Matsuda
    • Organizer
      The 4th Asian Horticultural Congress (AHC 2023)
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Effects of air temperature on expression levels of genes involved in the accumulation of an influenza vaccine antigen transiently expressed in Nicotiana benthamiana2023

    • Author(s)
      Patthasarun Pruksarojanakul, Ryo Matsuda
    • Organizer
      The 30th Federation of Asian and Oceanian Biochemists and Molecular Biologists (FAOBMB) Conference
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 植物を用いた医薬品原材料等の有用タンパク質生産2023

    • Author(s)
      松田 怜
    • Organizer
      大阪公立大学 植物工場研究センター PFCセミナー
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 外来遺伝子の導入および一過性発現がベンサミアナタバコ個体群のガス交換速度に及ぼす影響2023

    • Author(s)
      桐島健太朗・イ ジユン・富士原和宏・松田 怜
    • Organizer
      日本生物環境工学会2023年豊橋大会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] Toward next-generation controlled environment agriculture using plant factories and greenhouses2023

    • Author(s)
      Ryo Matsuda
    • Organizer
      KOSVFI Symposium Vertical Farm 2023
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Effects of air temperature after gene transfer on the factors related to the accumulation of a vaccine antigen protein in Nicotiana benthamiana leaves2023

    • Author(s)
      Patthasarun Pruksarojanakul, Ryo Matsuda
    • Organizer
      International Symposium on Agricultural Meteorology (ISAM 2023)
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 一過性遺伝子発現法における遺伝子導入後のベンサミアナタバコ個体群の純光合成速度および蒸散速度2023

    • Author(s)
      桐島健太朗・イ ジユン・富士原和宏・松田 怜
    • Organizer
      日本農業気象学会2023年全国大会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] Effects of air temperature on the factors related to synthesis and degradation of a vaccine antigen protein transiently expressing in Nicotiana benthamiana leaves2022

    • Author(s)
      Patthasarun Pruksarojanakul, Ryo Matsuda
    • Organizer
      日本農業気象学会関東甲信越支部2022年度例会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] Plant-based recombinant protein production under controlled environment2021

    • Author(s)
      Ryo Matsuda
    • Organizer
      2021 International Symposium on Efficient Production of Value-added Plants
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Effects of light environment before gene transfer on the hemagglutinin productivity of Nicotiana benthamiana plants in a transient gene expression system2021

    • Author(s)
      Ryo Matsuda
    • Organizer
      The 2nd Asian Conference for Plant Made Pharmaceuticals (PMPAsia 2021)
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Environment control and cultivation management for each stage of upstream production of Agrobacterium-mediated transient gene expression system using Nicotiana benthamiana whole plants and detached leaves2021

    • Author(s)
      Naomichi Fujiuchi, Ryo Matsuda
    • Organizer
      The 2nd Asian Conference for Plant Made Pharmaceuticals (PMPAsia 2021)
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited

URL: 

Published: 2021-04-28   Modified: 2024-12-25  

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