| Project/Area Number |
23K21359
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| Project/Area Number (Other) |
21H02626 (2021-2023)
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Multi-year Fund (2024)
Single-year Grants (2021-2023) |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 47030:Pharmaceutical hygiene and biochemistry-related
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| Research Institution | Osaka Metropolitan University (2022-2024)
Osaka City University (2021) |
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Principal Investigator |
松原 勤 大阪公立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (20628698)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
湯川 博 名古屋大学, 未来社会創造機構, 特任教授 (30634646)
中瀬 生彦 大阪公立大学, 大学院理学研究科, 教授 (40432322)
吉成 浩一 静岡県立大学, 薬学部, 教授 (60343399)
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| Project Period (FY) |
2024-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥16,640,000 (Direct Cost: ¥12,800,000、Indirect Cost: ¥3,840,000)
Fiscal Year 2024: ¥3,510,000 (Direct Cost: ¥2,700,000、Indirect Cost: ¥810,000)
Fiscal Year 2023: ¥3,640,000 (Direct Cost: ¥2,800,000、Indirect Cost: ¥840,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2021: ¥5,590,000 (Direct Cost: ¥4,300,000、Indirect Cost: ¥1,290,000)
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| Keywords | HSD17B4 / 肝硬変 / 肝星細胞 / 線維化 / 細胞内移行 / 治療薬 |
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| Outline of Research at the Start |
申請者が見出したHSD17B4タンパク質の新機能 (肝星細胞内へ取り込まれ核内へ移行してCOL1A遺伝子発現を抑制する機能)を基軸とした肝硬変治療薬を実現するために、①HSD17B4タンパク質が肝星細胞に取り込まれる分子機序の解明、②HSD17B4タンパク質のCOL1A遺伝子転写制御機構の解明、③肝線維化マウスにおける組換えヒトHSD17B4タンパク質の有効性・安全性の評価を行う。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究で開発している肝硬変治療薬について以下の実験を行った。
(4-1)HSD17B4蛋白質を断片化した5種のタンパク質を作製し、肝星細胞に導入して蛋白質の細胞内移行を解析すると、細胞内移行に重要とされる領域(約300アミノ酸)が推定された。現在、さらにコア領域の同定を進めている。
(4-2)マウス肝臓から肝細胞、肝星細胞、肝類洞内皮細胞を単離し、膜蛋白質をビオチンラベルした。細胞をホモジナイズした後、アビジン-マグネットビーズでビオチンラベルした膜蛋白質を回収して、質量分析にて蛋白質を同定し、肝細胞、肝星細胞、肝類洞内皮細胞のそれぞれに特異的に高発現している蛋白質を推定した。さらに、4つの蛋白質で、肝硬変かつ肝星細胞に高発現していると推定された。現在、この4つの蛋白質と肝硬変の関連性について解析中である。
(4-3)HSD17B4タンパク質に結合するLawsoneに関して肝硬変における機能を解析した。in slicoによるLawsone結合タンパク質の推定により、HSD17B4タンパク質以外に、ヒトとマウスに共通してLawsoneと強固に結合する２種のタンパク質を推定した。現在、それらのタンパク質について解析中である。
(4-4)CDH5-Cre dtTomatoマウスに脂肪肝炎や肝線維症を発症させ、肝臓を取り出し、透明化を行った後、ライトシート顕微鏡などで観察した。すると肝臓の血管(門脈や中心静脈、類洞内皮細胞)、特に、中心静脈の構造が大きく異なっていると推定された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
問題なく順調に研究が進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
(4-1)前年度から進めている核内移行に必要な領域とCOL1A遺伝子発現の抑制に加えて、細胞内取込みに必要な領域についてペプチドサイズを確定させる。
(4-2)推定された4つの蛋白質について肝星細胞活性化の関与する分子との相互作用について解析する。
(4-3)推定された2つの蛋白質について細胞分布を解析して、肝疾患におけるLawsoneの機能について解明する。
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