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Advanced utilization strategies of beneficial bacteria based on the survival and growth mechanisms of bacteria under poor conditions

Research Project

Project/Area Number 23K23500
Project/Area Number (Other) 22H02233 (2022-2023)
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeMulti-year Fund (2024)
Single-year Grants (2022-2023)
Section一般
Review Section Basic Section 38020:Applied microbiology-related
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

永田 裕二  東北大学, 生命科学研究科, 教授 (30237531)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 大坪 嘉行  東北大学, 生命科学研究科, 准教授 (40342761)
Project Period (FY) 2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2024)
Budget Amount *help
¥17,550,000 (Direct Cost: ¥13,500,000、Indirect Cost: ¥4,050,000)
Fiscal Year 2024: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2022: ¥8,320,000 (Direct Cost: ¥6,400,000、Indirect Cost: ¥1,920,000)
Keywords環境細菌 / 低栄養環境 / バイオレメディエーション / 細菌コミュニティ
Outline of Research at the Start

本研究では、① 従属栄養細菌が極貧環境下でCO2の固定を伴って生育する潜在能力を有する、② 分解細菌は単独よりも非分解細菌を含むコミュニティ状態の方が汚染物質の分解代謝を効率的かつ持続的に行える、という我々が見出した現象の分子機構を解明し、細菌の劣悪環境での生残・増殖機構という新たな切り口から、「細菌は如何にして 様々な環境に適応し迅速に進化するのか?」という生物学の根源的な「問い」に対する重要な答えを提示する。さらに、その原理を「なぜ純粋分離株の実験室での評価から期待される成果が実環境では得られないのか?」という有用細菌の高度利用に直結する問いに対する回答にも繋げる 。

Outline of Annual Research Achievements

有用機能を持つ細菌を実環境などで利用する際、しばしば純粋分離菌の実験室環境での評価から期待される成果が得られず問題となる。その主因は、当該環境が細菌の生残・ 増殖に適さない劣悪な環境であることによる。本研究では、典型的な環境細菌をモデルとして、我々が見出した(1)有機炭素源非添加の極貧栄養条件下での増殖現象(HYGO表現型)と、(2)高度難分解性の有機塩素系殺虫剤HCHによる汚染環境での集団としての適応現象に着目し、細菌の「劣悪環境での生残・増殖」の鍵となる基本原理・機構を明らかにし、(3)その知見から有用細菌の機能を劣悪な環境でも最大限に利用するのための理論的基盤を構築する。
本年度は、各項目について以下の成果を得た。(1)これまでに取得したデータを元に、HYGO表現型株は、低栄養環境下においてグリオキシル酸回路でCO2の放出を抑えつつ、補充反応でCO2を固定し、環境中に低濃度で存在する微量のアルコール類を炭素源・エネルギー源として利用している可能性が高いと結論した。また、HYGO表現型に必須なアルコールデヒドロゲナーゼAdhXは、様々な基質から還元力を得るだけでなく、基礎代謝系の活性強化やシグナル物質の代謝など、多面的な機能を持つ可能性が示唆された。(2)HCH分解細菌コミュニティ形成に中心的な役割を果たす非分解細菌のCupriavidus属TKC株のプレート上でコロニーを薄く広げる変異株を取得し、リシーケンスにより2つの遺伝子の変異を同定した。また、TKC株は当該コミュニティ由来でないHCH分解細菌UT26株とも巨大コロニーを形成することを明らかにした。(3)プレート上でPaenibacillus属NK-L2株によりHCH分解細菌株が運ばれるヒッチハイク現象にプレートの寒天濃度と水分含量が重要であることを明らかにした。また、NK-L2株の全ゲノム配列を決定した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

項目(1)では、HYGO表現型の機構について一定の結論を得ることができた。さらに、AdhX様々な基質から還元力を得るだけでなく、基礎代謝系の活性強化やシグナル物質の代謝など、多面的な機能を持つ可能性があるという新規知見を得ることができた。一方、項目(2)では、HCH分解細菌コミュニティにおける非分解細菌のCupriavidus属TKC株のHCH分解菌とのコミュニティ形成に重要と推定される表現型を示す変異株を取得し、リシーケンスにより2つの遺伝子の変異を同定することができた。また、TKC株は当該コミュニティ由来でないHCH分解細菌UT26株とも巨大コロニーを形成することを明らかにした。UT26株は遺伝学的取り扱い手法が確立されており、今後の当該現象の解析が容易になった。さらに、項目(3)では、Paenibacillus属株によりHCH分解細菌株が運ばれるヒッチハイク現象にプレートの寒天濃度と水分含量が重要であることを明らかにし、当該現象を再現性良く観察することができるようになった。また、NK-L2株の全ゲノム配列を決定し、今後の遺伝学的解析がしやすくなった。

Strategy for Future Research Activity

項目(1)では、HYGO表現型の機構について、一定の結論を得たため、これを論文としてまとめる。また、AdhXの多面的な機能についてさらに解析を行い、HYGO表現型の全貌解明を目指す。さらに、それら知見を元に、HYGO表現型の強化を目指す。項目(2)では、TKC株の変異株の表現型がリシーケンスにより明らかにされた遺伝子の変異よるものであるか、遺伝学的手法で明らかにする。また、巨大コロニー形成に必要なHCH分解菌側の因子について、UT26株を用いた解析により明らかにする。項目(3)では、Paenibacillus属株の変異株を作製し、ヒッチハイク現象の機構解明を目指すと共に、移動性がHCH分解細菌株の土壌での生残性を向上させる直接の因子であるか検討する。また、項目(1)(2)で明らかにした機構が分解細菌株の土壌での生残性の向上に応用可能か検討する。

Report

(2 results)
  • 2023 Annual Research Report
  • 2022 Annual Research Report
  • Research Products

    (45 results)

All 2024 2023 2022

All Journal Article (9 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 9 results,  Open Access: 8 results) Presentation (36 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Invited: 4 results)

  • [Journal Article] Degradation of DDT by γ-hexachlorocyclohexane dehydrochlorinase LinA2024

    • Author(s)
      usuf Habibullah KO, Ito R, Stari L, Kishida K, Ohtsubo Y, Masai E, Fukuda M, Miyauchi K, Nagata Y
    • Journal Title

      Biosci. Biotechnol. Biochem.

      Volume: 88 Issue: 1 Pages: 123-130

    • DOI

      10.1093/bbb/zbad141

    • Related Report
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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Three distinct metabolic phases of PCB/biphenyl degrader Acidovorax sp. KKS102 in nutrient broth2024

    • Author(s)
      Sakai K, Kishida, K, Matsumoto, S Nagata Y, Tsuda M, Ohtsubo Y
    • Journal Title

      Biosci. Biotechnol. Biochem.

      Volume: 88 Issue: 3 Pages: 305-315

    • DOI

      10.1093/bbb/zbad178

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      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Clamping-mediated incorporation of single-stranded DNA with concomitant DNA synthesis by Taq polymerase involves nick-translation2024

    • Author(s)
      Ohtsubo Y, Kawahara S, Nagata Y
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 14 Issue: 1 Pages: 2030-2030

    • DOI

      10.1038/s41598-024-52095-3

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      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] たったひとつの遺伝子の発現でかすみを食べる細菌に2023

    • Author(s)
      永田裕二
    • Journal Title

      Seibutsu-kogaku Kaishi

      Volume: 101 Issue: 10 Pages: 554-554

    • DOI

      10.34565/seibutsukogaku.101.10_554

    • ISSN
      0919-3758, 2435-8630
    • Year and Date
      2023-10-25
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  • [Journal Article] Frontier of chemically synthesized pesticide degradation by soil bacteria2023

    • Author(s)
      永田裕二、加藤広海、大坪嘉行
    • Journal Title

      Japanese Journal of Pesticide Science

      Volume: 48 Issue: 2 Pages: 125-131

    • DOI

      10.1584/jpestics.W23-22

    • ISSN
      2187-0365, 2187-8692
    • Year and Date
      2023-08-20
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  • [Journal Article] Host range of strand-biased circularizing integrative elements: a new class of mobile DNA elements nesting in Gammaproteobacteria2023

    • Author(s)
      Idola Desmila、Mori Hiroshi、Nagata Yuji、Nonaka Lisa、Yano Hirokazu
    • Journal Title

      Mobile DNA

      Volume: 14 Issue: 1 Pages: 1-23

    • DOI

      10.1186/s13100-023-00295-5

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  • [Journal Article] Draft genome sequence of Cupriavidus sp. strain TKC, isolated from a γ-hexachlorocyclohexane-degrading community2023

    • Author(s)
      Kato H, Ohtsubo Y, Hirano S, Masuda S, Shibata A, Shirasu K, Nagata Y
    • Journal Title

      Microbiology Resource Announcements

      Volume: 12 Issue: 12 Pages: 00567-23

    • DOI

      10.1128/mra.00567-23

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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Reconstruction of a Soil Microbial Network Induced by Stress Temperature2022

    • Author(s)
      Yang Dailin、Kato Hiromi、Kawatsu Kazutaka、Osada Yutaka、Azuma Toyohiro、Nagata Yuji、Kondoh Michio
    • Journal Title

      Microbiology Spectrum

      Volume: 10 Issue: 5

    • DOI

      10.1128/spectrum.02748-22

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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] CO<sub>2</sub>-dependent High-yield Growth of a Heterotrophic Bacterium under Oligotrophic Conditions2022

    • Author(s)
      永田 裕二、加藤 広海、大坪 嘉行
    • Journal Title

      Journal of Environmental Biotechnology

      Volume: 22 Issue: 1 Pages: 9-13

    • DOI

      10.50963/jenvbio.22.1_9

    • ISSN
      1347-1856, 2436-5041
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  • [Presentation] Elucidating Soil Carbon Sequestration: A Shotgun Metagenome Study of Kyushu Forest Soils in Relation to Soil Characteristics and Tree Species Diversity2024

    • Author(s)
      Leonardo Stari, Shoko Hirano, Kouhei Kishida, Yoshiyuki Ohtsubo, Yuji Nagata
    • Organizer
      第18回日本ゲノム微生物学会年会
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      松本 哲、岸田 康平、永田 裕二、大坪 嘉行
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      第18回日本ゲノム微生物学会年会
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      平野 翔子、Stari Leonardo、Xiong Zhiyu、加藤 広海、岸田 康平、大坪 嘉行、永田 裕二
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      第18回日本ゲノム微生物学会年会
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    • Author(s)
      松本 哲,岸田 康平,永田 裕二,大坪 嘉行
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      松添 華子,岸田 なつみ,加藤 広海,岸田 康平, 大坪 嘉行,永田 裕二
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      日本農芸化学会2024年度大会
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      岡 俊璃,岸田 康平,大坪 嘉行,永田 裕二
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      日本農芸化学会2024年度大会
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  • [Presentation] 従属栄養細菌の超低栄養環境での増殖を引き起こす AdhX の基質の検討2024

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      伊藤 蓮,Stari Leonardo,岸田 康平,大坪 嘉行, 永田 裕二
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      日本農芸化学会2024年度大会
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  • [Presentation] Sphingobium-Cupriavidus 属細菌株による有機塩素系殺 虫剤分解細菌コミュニティ形成2024

    • Author(s)
      XIONG ZHIYU,平野 翔子,岸田 なつみ,加藤 広海, 岸田 康平,大坪 嘉行,永田 裕二
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      日本農芸化学会2024年度大会
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      平野 翔子,Xiong Zhiyu,加藤 広海,岸田 康平, 大坪 嘉行,永田 裕二
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      手塚 隆博,岸田 なつみ,加藤 広海,岸田 康平, 大坪 嘉行,永田 裕二
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      平野 翔子、加藤 広海、Leonardo Stari、大坪 嘉行、永田 裕二
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      岸田 康平、熊谷 連、大坪 嘉行、永田 裕二
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    • Author(s)
      Leonardo Stari, Hiromi Kato, Yoshiyuki Ohtsubo, Yuji Nagata
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      環境バイオテクノロジー学会2023年度大会
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  • [Presentation] 原核生物における新しい可動遺伝因子グループ SE (Strand-biased Circularizing Integrative Element) の発見2023

    • Author(s)
      矢野大和1, Idola Desmila, 森宙史, 永田裕二, 野中里佐
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      日本遺伝学会95回大会
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  • [Presentation] Evolution of Bacteria Degrading Artificially Synthesized Environmental Pollutants2023

    • Author(s)
      Yuji Nagata
    • Organizer
      International Symposium on Advanced and Sustainable Science and Technology (National Chung Hsing University, Taiwan)
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    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 新しい可動遺伝因子グループSEの転移経路と宿主域2023

    • Author(s)
      矢野 大和, イドラ デスミラ , 森宙史, 永田裕二, 野中 里佐
    • Organizer
      日本微生物生態学会36回大会
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  • [Presentation] Cupriavidus-Sphingobium 属細菌株間の相互作用2023

    • Author(s)
      平野 翔子 、Xiong Zhiyu 、佐子川 さやか、加藤 広海、大坪 嘉行、永田 裕二
    • Organizer
      日本微生物生態学会36回大会
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  • [Presentation] Temporal Evolution and Forces Shaping Bacterial Populations in Cultured Soil Consortia2023

    • Author(s)
      Leonardo Stari, Hiromi Kato, Yoshiyuki Ohtsubo, Yuji Nagata
    • Organizer
      日本微生物生態学会36回大会
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  • [Presentation] 土壌細菌の進化と種間相互作用2023

    • Author(s)
      永田裕二
    • Organizer
      第34回加藤記念研究助成贈呈式特別講演会
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    • Invited
  • [Presentation] 土壌圏微生物による人工農薬分解のフロンティア2023

    • Author(s)
      永田裕二
    • Organizer
      日本農薬学会第48回大会 未来開拓シンポジウム「将来の植物保護に向けた応用微生物学」
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    • Invited
  • [Presentation] Uncovering the Dynamics of Microbial Genomic Structure and Function in Relation to Carbon Source Variation: An Investigation of Taxonomic Succession and Metagenome Composition2023

    • Author(s)
      Leonardo Stari, Hiromi Kato, Yoshiyuki Ohtsubo, Yuji Nagata
    • Organizer
      第17回日本ゲノム微生物学会年会
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      平野 翔子、加藤 広海、Leonardo Stari、大坪 嘉行、永田 裕二
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      鄧 文昊、高田 美信、大坪 嘉行、渡辺 正夫、永田 裕二
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  • [Presentation] The succession of taxonomic structure and metagenome composition of bacterial community cultured with different carbon sources2023

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      Leonardo Stari、Hiromi Kato、Yoshiyuki Ohtsubo、 Yuji Nagata
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      伊藤 蓮、永田 裕二、大坪 嘉行
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      日本農芸化学会2023年度大会
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  • [Presentation] 混合無菌土壌に移植した土壌細菌集団の菌叢形成2023

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      平野 翔子、加藤 広海、大坪 嘉行、永田 裕二
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      日本農芸化学会2023年度大会
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      松本 哲、永田 裕二、大坪 嘉行
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      日本農芸化学会2023年度大会
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  • [Presentation] 土壌細菌の機能と進化2023

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      永田裕二、Stari Leonardo、加藤広海、大坪嘉行
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      第70回日本生態学会大会シンポジウム「土壌圏の複雑性と適応性を明らかにする総合科学」
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      平野 翔子, 加藤 広海, 大坪 嘉行,永田 裕二
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      Stari Lazo Leonardo Alfredo, Hiromi Kato, Yoshiyuki Ohtsubo, Yuji Nagata
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      佐子川さやか、加藤広海、大坪嘉行、永田裕二
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      環境バイオテクノロジー学会2022年度大会
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    • Invited

URL: 

Published: 2022-04-19   Modified: 2024-12-25  

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