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Clarification of the intracellular ultrastructure and control mechanism of rice microhairs function as hydathode hairs

Research Project

Project/Area Number 23K23588
Project/Area Number (Other) 22H02323 (2022-2023)
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeMulti-year Fund (2024)
Single-year Grants (2022-2023)
Section一般
Review Section Basic Section 39020:Crop production science-related
Research InstitutionKochi University of Technology (2024)
Nagoya University (2022-2023)

Principal Investigator

大井 崇生  高知工科大学, 理工学群, 准教授 (60752219)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 小林 英和  国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 西日本農業研究センター, 上級研究員 (60360450)
高橋 宏和  名古屋大学, 生命農学研究科, 准教授 (50755212)
Project Period (FY) 2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2024)
Budget Amount *help
¥17,810,000 (Direct Cost: ¥13,700,000、Indirect Cost: ¥4,110,000)
Fiscal Year 2024: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
Fiscal Year 2023: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2022: ¥10,270,000 (Direct Cost: ¥7,900,000、Indirect Cost: ¥2,370,000)
Keywordsイネ / 蒸散 / 高温障害 / 塩腺 / 3D解析 / 核内倍加 / 走査型電子顕微鏡
Outline of Research at the Start

イネ表皮に存在する小型の毛状突起(小毛)からの排水という現象に着目し、その機能形態と制御機構を解明する。活発に排水を行う籾表面の小毛と、不活性な葉表面の小毛について連続切片-電子顕微鏡法によって細胞内全体の微細構造を三次元再構築して3D観察し、各構造の出現頻度や体積等を定量比較する。また、細胞活性に影響するとされる核内倍加の程度をフローサイトメーター等で調査するとともに、小毛細胞をレーザーマイクロダイセクションで切り出してトランスクリプトーム解析を行い、排水機能に関わる遺伝子群を同定する。本研究は、気孔を介さない未知の排水機構を解明するもので、イネの高温障害対策等にも繋がると期待される。

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、イネ表皮上の小毛について排水器官としての機能形態とその制御機構を解明することを目的とする。
供試イネ品種‘日本晴’を栽培し、籾、葉鞘、葉身の着目部位ごとに、小毛の解析を行うための組織観察を行い、特に小毛を構成する細胞の核内倍加状態の比較を実施した。併せて、塩分を含み蒸発しにくい排水を行う小毛を持つ耐塩性イネ科牧草ローズグラスにおける葉組織の核内倍加の調査結果を国際学術誌に発表した。(担当:小林)
小毛の三次元形態解析については、昨年度に大まかに確立した卓上SEMによる連続切片からの組織・細胞構造の三次元再構築法をさらに改良した。特にウルトラミクロトームから切片を回収する段階で、理化学研究所で開発された補助具(若崎ら 2023 顕微鏡)を用いて昨年度までの手法よりも100枚以上を安定して回収する作業行程を確立した。その他、卓上SEMを活用した組織・細胞内部構造の観察手法を関連する学会や研究集会で広く普及することに努め、国内学術誌へ計2報の発表を行った。(担当:大井)
この他、共焦点レーザー顕微鏡を用いての組織・細胞の3D形態解析の手法についてまとめた論文と、小毛の機能が葉の表側と裏側で異なるイネ科のシバの電子顕微鏡による観察事例についてまとめた論文について、それぞれを国際学術誌にて発表した。(担当:大井)
以上のように、当該研究を遂行するにあたり技術面や生物学的知見の整理が行われ、今後の発展が期待される。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

研究代表者・大井の2024年度からの異動のため、本年度後半は学内業務の引継ぎと異動後の準備に追われ、大井担当分の研究計画には遅れが生じている。

Strategy for Future Research Activity

小毛の3D形態解析については、進捗に遅れが生じているが、異動後の高知工科大学の充実した電子顕微鏡施設を利用することで巻き返しを図る(代表者・大井)。
核内倍加に関しては引き続き調査を進め、イネでの解析結果の論文取りまとめを進める(分担者・小林)。
トランスクリプトーム解析については、引き続きレーザーマイクロダイゼクションによるサンプリンングの条件検討を行い、その後の遺伝子発現解析に必要なデータベースを整理を進める(分担者・高橋)。

Report

(2 results)
  • 2023 Annual Research Report
  • 2022 Annual Research Report
  • Research Products

    (19 results)

All 2024 2023 2022

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 3 results) Presentation (15 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 5 results)

  • [Journal Article] Morphology and excreting-function of microhairs in salt-tolerant Zoysia japonica, comparing adaxial and abaxial leaf surfaces.2024

    • Author(s)
      Koyama M, Oi T.
    • Journal Title

      Flora

      Volume: 312 Pages: 152472-152472

    • DOI

      10.1016/j.flora.2024.152472

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Three-dimensional analysis of internal structures in plant tissues and cells: a case study of rice leaf-blades analyzed by serial section light microscopy2023

    • Author(s)
      大井崇生
    • Journal Title

      PLANT MORPHOLOGY

      Volume: 35 Issue: 1 Pages: 59-67

    • DOI

      10.5685/plmorphol.35.59

    • ISSN
      0918-9726, 1884-4154
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] 切片-走査型電子顕微鏡法による植物組織・細胞の内部構造観察:カメムシ抵抗性イネ籾の解析事例.2023

    • Author(s)
      大井崇生
    • Journal Title

      アグリバイオ

      Volume: 7(7) Pages: 624-626

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Journal Article] Intracellular positioning of mesophyll chloroplasts following to aggregative movement in Setaria viridis analysed three-dimensionally with a confocal laser scanning microscope.2023

    • Author(s)
      Yamakawa S, Kato Y, Taniguchi M, Oi T.
    • Journal Title

      Flora

      Volume: 306 Pages: 152364-152364

    • DOI

      10.1016/j.flora.2023.152364

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 卓上SEMで植物組織を観察してみよう! ミニシンポジウム3: お手軽♪形態観察法~あなたも3分で観れる植物の微細構造~(コーディネーター: 大井崇生).2024

    • Author(s)
      大井崇生
    • Organizer
      日本作物学会第257回講演会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] #やってみた 植物形態観察. ミニシンポジウム3: お手軽♪形態観察法~あなたも3分で観れる植物の微細構造~(コーディネーター: 大井崇生).2024

    • Author(s)
      寳川拓生, 大井崇生
    • Organizer
      日本作物学会第257回講演会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] C4植物シコクビエ葉身における光量に応答した光合成細胞の三次元形態変化の解析.2024

    • Author(s)
      松永隼人, 谷口光隆, 大井崇生
    • Organizer
      日本作物学会第257回講演会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 応用講座2:植物の組織試料を対象としたFIB-SEMおよび卓上SEMによる細胞内構造の3D解析法.2023

    • Author(s)
      大井崇生
    • Organizer
      日本電子顕微鏡学会走査電子顕微鏡分科会SCAN TECH 2023
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 連続切片-卓上走査型電子顕微鏡法によるC4イネ科雑穀シコクビエ葉身の光合成細胞の三次元形態解析.2023

    • Author(s)
      大井崇生, 前田芽依奈, 谷口光隆
    • Organizer
      日本植物学会第87回大会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] Three-dimensional analysis by serial section electron microscopy for internal structures of a whole cell in plant leaves. Symposium: Life Science 13: Plant Science and Mycology.2023

    • Author(s)
      Oi T.
    • Organizer
      The 20th International Microscopy Congress (IMC20)
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Three-dimensional anatomy of the whole leaf tissue using serial section light microscopy. Symposium: Life Science 13: Plant Science and Mycology.2023

    • Author(s)
      Ouk R, Oi T, Sugiura D, Taniguchi M.
    • Organizer
      The 20th International Microscopy Congress (IMC20)
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 水稲の葉身と外穎における小毛細胞の核内倍加の差異.2023

    • Author(s)
      小林英和, 大井崇生
    • Organizer
      日本作物学会第256回講演会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 卓上-低真空-SEMによる切片観察・三次元再構築の簡易化・効率化. シンポジウム S-4:進化を続ける低真空SEMの可能性.2023

    • Author(s)
      大井崇生
    • Organizer
      日本顕微鏡学会第66回シンポジウム
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] イネ組織形態学の再興―3D解析法の真価―.2023

    • Author(s)
      大井崇生
    • Organizer
      遺伝研研究集会「イネ分子遺伝学の再興」―発生学研究の真価―
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 基調講演: FIB-SEMと卓上SEMによる切片観察から3D解析:植物組織・細胞での活用事例.2023

    • Author(s)
      大井崇生
    • Organizer
      第22回Bio電顕セミナー
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] イネおよびローズグラスの葉身の細胞における核内倍加.2023

    • Author(s)
      小林英和, 大井崇生
    • Organizer
      日本作物学会第255回講演会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 異なる濃度の窒素施肥で育てたC4雑穀シコクビエ葉身の光合成細胞の三次元形態解析.2023

    • Author(s)
      前田芽依奈, 谷口光隆, 大井崇生
    • Organizer
      日本作物学会第255回講演会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 日本植物形態学会奨励賞受賞講演:植物の組織・細胞における内部微細構造の三次元解析.2022

    • Author(s)
      大井崇生
    • Organizer
      日本植物形態学会第34回総会・大会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Cryo-SEM-EDS による耐塩性C4植物ローズグラスにおける葉組織内の元素局在の可視化.2022

    • Author(s)
      大井崇生, Clode PL, 谷口光隆, Colmer TD, Kotula L.
    • Organizer
      日本植物学会第86回大会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report

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Published: 2022-04-19   Modified: 2024-12-25  

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