| Project/Area Number |
23K23616
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| Project/Area Number (Other) |
22H02351 (2022-2023)
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Multi-year Fund (2024)
Single-year Grants (2022-2023) |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 39040:Plant protection science-related
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| Research Institution | National Agriculture and Food Research Organization |
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Principal Investigator |
石橋 和大 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 生物機能利用研究部門, 上級研究員 (20611742)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥17,550,000 (Direct Cost: ¥13,500,000、Indirect Cost: ¥4,050,000)
Fiscal Year 2024: ¥5,200,000 (Direct Cost: ¥4,000,000、Indirect Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2023: ¥5,200,000 (Direct Cost: ¥4,000,000、Indirect Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2022: ¥7,150,000 (Direct Cost: ¥5,500,000、Indirect Cost: ¥1,650,000)
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| Keywords | トマト黄化えそウイルス / マイナス鎖RNAウイルス / ブニヤウイルス / 出芽酵母 / ESCRT |
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| Outline of Research at the Start |
継続課題のため、記入しない。
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年に引き続き、TSWVの複製が低下するエンドソーム輸送選別複合体（ESCRT）関連出芽酵母変異株のうち、特に複製低下が著しい5種（vps36, bro1, doa4, snf7, vps4）について重点的に解析を行った。二分子蛍光補完（BiFC）法により、リボヌクレオタンパク質複合体（RNP）の形成が正常に起きていないことが推察されたbro1, doa4, snf7各変異株において、免疫沈降法によりTSWV NおよびLタンパク質と結合するレプリコンRNAを定量したところ、いずれも著しく低下していたことから、当該変異株ではRNPが形成されていないことが裏付けられた。また、BiFC法によりSNF7とNの相互作用および、BRO1とNのL依存的な相互作用が検出された。さらに一部の変異株ではNの局在が変化すること、一部の宿主因子はTSWVの複製時に局在が変化することを見出した。したがって、TSWVの複製関連タンパク質とESCRT関連因子は相互に影響しあって細胞内の適切な場所に局在し、RNPの形成に至るものと考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
宿主ESCRT関連因子のTSWV複製における役割について徐々に明らかにすることができており、未だ不明な点が多いマイナス鎖RNAウイルスのRNP形成機構の解明にもつながる成果としてさらなる進展が期待できる。
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| Strategy for Future Research Activity |
大きな課題として、これまでモデル宿主である出芽酵母で明らかにしてきた現象が、自然宿主の植物でも見られるかということが挙げられる。これを検証するため、まずは植物でESCRT関連因子の発現を抑制したときにTSWVの増殖が影響を受けるかを調べる予定である。
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