Identification of novel granulocyte/monocyte progenitors and elucidation of myeloid cell developmental pathway
| Project/Area Number |
23K24117
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| Project/Area Number (Other) |
22H02855 (2022-2023)
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Multi-year Fund (2024)
Single-year Grants (2022-2023) |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 49030:Experimental pathology-related
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| Research Institution | Kanazawa Medical University |
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Principal Investigator |
小内 伸幸 金沢医科大学, 医学部, 教授 (50323605)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥17,290,000 (Direct Cost: ¥13,300,000、Indirect Cost: ¥3,990,000)
Fiscal Year 2024: ¥5,590,000 (Direct Cost: ¥4,300,000、Indirect Cost: ¥1,290,000)
Fiscal Year 2023: ¥5,720,000 (Direct Cost: ¥4,400,000、Indirect Cost: ¥1,320,000)
Fiscal Year 2022: ¥5,980,000 (Direct Cost: ¥4,600,000、Indirect Cost: ¥1,380,000)
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| Keywords | 造血 / 血液前駆細胞 / 細胞分化 / 骨髄球系細胞 / 単球 / 顆粒球 / 前駆細胞 / 細胞系譜追跡 |
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| Outline of Research at the Start |
顆粒球と単球は貪食能や炎症性サイトカイン産生能を有し、病原性微生物感染時に感染局所に浸潤し、微生物を捕獲して消化する生体防御反応を担っている。また、生体の恒常性や組織修復にも寄与する重要な骨髄球系細胞である。近年の研究成果から、これら骨髄球系細胞の前駆細胞の存在と分化起源が議論されている。我々は新規細胞表面マーカーXを発現する骨髄球系細胞にのみに分化する前駆細胞を同定した。本研究ではこのマーカーXの発現特性を活かした細胞運命追跡システムを用いて、自然造血及び炎症によって誘導される緊急造血における新規前駆細胞の重要性を検討する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
マウス多能性前駆細胞(multipotent progenitors: MPPs)中にCタイプレクチンであるCLEC12Aを発現する新規細胞群を同定した。そこで、マウス骨髄から系列細胞マーカー陰性分画を粗精製し12種類の細胞表面マーカー抗体を用いて多重染色を行い、viSNE解析を行ったところ、CLEC12A+CD135-細胞が新規細胞分画として同定された。このCLEC12A+CD135-細胞をセルソーターによって純化し、骨髄球-赤血球系細胞への分化能力を検討するためにin vitroコロニー形成実験を行なった。この結果、CLEC12A+CD135-細胞は顆粒球、単球及び顆粒球/単球のコロニーを形成し、赤血球系細胞のコロニーは形成しなかった。また、同細胞をM-CSF存在下で培養するとマクロファージへと効率良く分化した。さらに、マウスストローマ細胞との共培養系を用いてリンパ球への分化能を検討したがT細胞及びB細胞への分化能は検出されなかった。次にin vivoにおける分化能を検討するため、CAG-EGFP Tgマウスの骨髄から2x104個のCLEC12A+CD135-細胞を純化し、B6・SJLマウスに移植した。移植後、継時的に末梢血を採血しCLEC12A+CD135-細胞由来の娘細胞の表現型を解析した。この結果、in vitroの実験結果と同様にCLEC12A+CD135-細胞は顆粒球と単球のみに分化した。これらのin vitro及びin vivoにおける分化能の解析結果から、CLEC12A+CD135-細胞は新規顆粒球/単球前駆細胞であると結論づけた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画通りに研究は進み、in vitro及びin vivoにおける分化能を評価する実験からCLEC12A+CD135-細胞が新規顆粒球/単球前駆細胞であると証明できた。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、新規顆粒球/単球前駆細胞が自然造血において顆粒球と単球分化維持にどれほど重要か、貢献しているかを明らかにするために細胞運命追跡システムを構築する。
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Report
(1 results)
Research Products
(4 results)
