| Project/Area Number |
23K24143
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| Project/Area Number (Other) |
22H02881 (2022-2023)
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Multi-year Fund (2024)
Single-year Grants (2022-2023) |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 49060:Virology-related
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science |
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Principal Investigator |
小林 郷介 公益財団法人東京都医学総合研究所, 疾患制御研究分野, 主席研究員 (80644989)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥17,550,000 (Direct Cost: ¥13,500,000、Indirect Cost: ¥4,050,000)
Fiscal Year 2024: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥5,850,000 (Direct Cost: ¥4,500,000、Indirect Cost: ¥1,350,000)
Fiscal Year 2022: ¥7,540,000 (Direct Cost: ¥5,800,000、Indirect Cost: ¥1,740,000)
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| Keywords | エンテロウイルス / ピコルナウイルス / 受容体 / 神経細胞 / enterovirus / receptor / tropism / tyrosine kinase / ウイルス / エンテロウイルス71 / レセプター / 神経感染症 |
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| Outline of Research at the Start |
EV71は手足口病の病原体だが、まれに中枢神経合併症を起こし死亡する。死亡例をともなう大流行が1990年代以降アジア太平洋地域で散発的に発生し、問題となっている。重症患者の病理学的解析では、病変は中枢神経系に限局している。この組織特異性の仕組みの解明は、本感染症の予防法・治療法を開発するうえで重要である。代表者はこれまでに、EV71神経指向性の鍵となる因子を探索し、中枢神経感染に関与する可能性がある3つのアタッチメ ント受容体候補分子を同定した。本研究ではEV71の細胞感染や病態発現の際に、これら候補分子が果たす役割を分子レベル、培養細胞レベル、個体レベルで明らかにする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
エンテロウイルス71 (EV71)による手足口病は中枢神経合併症により重症化することがあり、ウイルス受容体の理解が重症化メカニズムの解明に不可欠である。受容体は、ウイルス粒子の細胞表面への接着を担うアタッチメント受容体と、ゲノムRNAの放出を担う受容体(SCARB2)に大別される。しかし、これらの受容体は神経指向性を決定する因子ではない。本研究では、神経指向性の鍵となる因子を探索し、3つのアタッチメント受容体候補分子を同定し、これらが果たす役割を明らかにすることを目的としている。 2022年度までに、候補遺伝子の1つを過剰発現およびノックアウト細胞の解析を行い、EV71の増殖性に寄与することを明らかにした。2023年度は、この遺伝子がEV71の細胞への接着や取込に寄与しているか解析した。組換えタンパク質との結合実験、過剰発現細胞への吸着実験などから、この候補遺伝子産物はアタッチメント受容体ではないと結論づけた。
興味深いことに、候補遺伝子と同じ遺伝子ファミリーに属する別の複数の遺伝子を強制発現してもEV71の感染増強が認められた。また、これらは受容体型チロシンキナーゼであるため、キナーゼ活性を喪失する変異を加えたところ、感染増強が起こらなくなった。
以上の結果から、候補遺伝子産物のキナーゼ活性とその下流のカスケードがEV71感染に重要であることが示唆された。今後は、この下流のカスケードを探索して、感染に関わるメカニズムを明らかにする。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初期待していたアタッチメント受容体ではなかったが、EV71の感染に重要な遺伝子であり、その機能解明に近付いている。
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| Strategy for Future Research Activity |
受容体型チロシンキナーゼ下流のシグナル経路として、自然免疫系を中心に解析を進める。
またRNA-seqも行い、ゲノムワイドな発現変動も解析していく。
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