Project/Area Number |
23K24561
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Project/Area Number (Other) |
22H03303 (2022-2023)
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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Allocation Type | Multi-year Fund (2024) Single-year Grants (2022-2023) |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 57080:Social dentistry-related
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Research Institution | Kyushu University |
Principal Investigator |
竹下 徹 九州大学, 歯学研究院, 教授 (50546471)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古田 美智子 九州大学, 歯学研究院, 准教授 (20509591)
二宮 利治 九州大学, 医学研究院, 教授 (30571765)
山下 喜久 九州大学, 歯学研究院, 教授 (20192403)
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Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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Budget Amount *help |
¥17,030,000 (Direct Cost: ¥13,100,000、Indirect Cost: ¥3,930,000)
Fiscal Year 2024: ¥6,110,000 (Direct Cost: ¥4,700,000、Indirect Cost: ¥1,410,000)
Fiscal Year 2023: ¥7,150,000 (Direct Cost: ¥5,500,000、Indirect Cost: ¥1,650,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,770,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥870,000)
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Keywords | 口腔常在微生物叢 / 16S rRNA / 唾液 / 長期動態 / 16S rRNA遺伝子 / マイクロバイオーム |
Outline of Research at the Start |
口腔常在微生物叢の構成バランスの異常と健康との関連が注目を集めている一方で微生物叢が異常に至る経緯は不明なままである。本研究では2007年に開始した口腔常在微生物叢調査の追跡調査を行い、高精度微生物群集解析法を用いて口腔常在微生物叢構成の15年追跡データセットを構築する。これに基づき口腔常在微生物叢の正常な加齢変化を定義し、微生物叢構成の異常と健康悪化との関係性を解明する。さらに健康悪化に先んじてみられる構成異常に関わる宿主要因及びその病原メカニズムを探索する。世界に先駆けた口腔常在微生物叢の長期動態の解明は微生物叢の異常に先制的に介入する新たな口腔保健管理手法の開発の礎ともなる。
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Outline of Annual Research Achievements |
本年度は新型コロナウイルス感染症蔓延の影響を受け延期されていた口腔常在微生物叢の追跡調査を遂行した。本年度の調査計画について九州大学倫理審査委員会に申請し承認を受けた。生活習慣病予防健診を受診した成人住民から研究参加に対する同意を取得したのち2分間のガム咀嚼を依頼し、刺激唾液分泌量を測定するとともに微生物叢分析に用いる唾液検体を採取した。唾液採取終了後、各対象者の歯科健診およびアンケートを行い歯式、う蝕の状況、歯周ポケット深さやプロービング時出血の有無といった歯周組織の状態を評価し生活習慣に関する情報とともに記録した。取得した検体は研究室に移送後、ビーズ破砕法を用いて含まれる微生物群集DNA検体を取得した。続いて2007年、2012年、2017年に行われた住民健診にて取得した唾液から抽出した微生物群集DNAとともに細菌共通配列をプライマーとしたPCR法を用いて細菌16S rRNA遺伝子を網羅的に増幅・回収を行い、ロングリードシーケンサーによる塩基配列解析の準備を進めた。また細菌、真菌のそれぞれについて共通配列をプライマーとした定量PCR法を用いて総細菌数および総真菌数の測定を進めた。また取得した健診結果のデータセット化を進めた。加えて2007年、2012年、2017年の三時点の検体が揃う対象者の一部について細菌16S rRNA遺伝子全長の塩基配列データに基づき細菌構成を決定し10年間の経時変化について分析を行い、加齢に伴う細菌構成の変化の存在が示唆された。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
予定していた住民健診における口腔常在微生物叢の追跡調査を遂行することができ2000名を超える方からの唾液検体および口腔保健状態に関する情報を取得することができた。さらに本調査および過去の調査にて取得した検体の微生物構成解析も当初の予定どおり進行している。以上のことから本研究はおおむね順調に進展していると判断した。
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Strategy for Future Research Activity |
次年度は本年度取得した検体も含め口腔微生物叢解析を進め16年間の口腔微生物叢の構成に関するデータセットを構築し、口腔常在微生物叢の長期動態の特定を目指す。
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