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カキの特異なプロアントシアニジン蓄積の基盤となる分子遺伝学的機構の解明と応用

Research Project

Project/Area Number 23K26895
Project/Area Number (Other) 23H02202 (2023)
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeMulti-year Fund (2024)
Single-year Grants (2023)
Section一般
Review Section Basic Section 39030:Horticultural science-related
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

西山 総一郎  京都大学, 農学研究科, 助教 (50827566)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 尾上 典之  国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 果樹茶業研究部門, 主任研究員 (50613121)
Project Period (FY) 2023-04-01 – 2027-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2024)
Budget Amount *help
¥18,720,000 (Direct Cost: ¥14,400,000、Indirect Cost: ¥4,320,000)
Fiscal Year 2026: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
Fiscal Year 2025: ¥4,940,000 (Direct Cost: ¥3,800,000、Indirect Cost: ¥1,140,000)
Fiscal Year 2024: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2023: ¥5,980,000 (Direct Cost: ¥4,600,000、Indirect Cost: ¥1,380,000)
Keywords果樹 / 育種 / 倍数性 / 二次代謝 / ゲノミクス
Outline of Research at the Start

プロアントシアニジン(PA)はカキ果実の強い渋味をもたらす。カキにおけるPA蓄積の多様性は長年興味がもたれてきたが、カキは高次倍数体であることから遺伝学的解析は進んでいない。本研究では 「優良な完全甘ガキ品種育成の最適経路は何か」を中心命題に据える。3つのPA蓄積変異を対象とし、大量シーケンス解析技術と多様な分離後代・遺伝資源を用い、栽培ガキに見られるPA蓄積制御の多様性の基盤となるメカニズムの同定と解明を目指す。得られるデータは、順次育種の現場で活用可能な分子マーカー化し、育種への適用も促す。PA蓄積はカキの最重要形質の一つであることから、本研究はカキの育種に広く貢献すると期待される。

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、カキの特徴である渋味成分プロアントシアニジン(PA)の果実への多量蓄積に関する遺伝育種研究である。本年度の取り組みは以下の4つにまとめられる。
1. 日本タイプ完全甘ガキ性を制御する候補遺伝子を同定した。これまでに構築した渋ガキ品種「太天」のゲノムアセンブルデータに加えてIso-seqデータを解析し、ハプロタイプ配列間の比較により決定多型の候補を同定した。候補遺伝子の機能解析に着手した。また多様な遺伝資源と育種集団のフェノタイピングと材料収集を進めた。
2. 中国タイプ完全甘ガキ性の分離集団 (N=57) を用いて、甘渋性別にbulk sequenceを取得した。polyploid QTL-seqを行い、決定遺伝子座の座乗染色体を特定できたが、ピークがブロードであり、染色体上の座乗位置を正確に狭めることはできなかった。
3. 完全甘ガキの遺伝子型を持つにも関わらず強い渋味を示す個体(渋残り個体)について、PA蓄積を詳細に調査し、完全甘ガキよりPA含量が有意に高いこと、タンニン細胞の数やサイズに特徴があること、WRKY44, QUIRKY, Cyclin D3等の発現量に特徴があり共通して完全甘ガキと異なるパターンを示すことなどを明らかにした。育種集団中に現れる「渋残り」形質を示す個体を多数収集し、更なるサンプリングを進めた。
4. 甘渋性分離集団6系統111個体の果実糖度を調査し、日本タイプ・中国タイプに関わらず、甘渋性と糖度が遺伝的に関連する可能性を示唆する結果を得た。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

全体を通して、サンプル収集やデータ解析については順調に進展している。日本タイプ完全甘ガキ性については、ゲノム解読の進展から、決定多型候補の同定まで至っている。中国タイプについてもおおまかに座乗領域を特定できており、分子マーカー開発等に向けては有益な知見が得られている。さらに、カキ果実内における糖代謝の解析にも取り組み、代謝フローの観点からも展開が考えられる新しい知見が得られている。一方で、候補遺伝子の機能解析はやや難航しており、一過性発現系では安定した発現が得られず、分子機能の特定には至っていない。この状況を踏まえ、特に分子遺伝学関連の実験計画を練り直している状況にある。

Strategy for Future Research Activity

本研究の目的の一つである日本タイプ完全甘ガキ性の決定遺伝子については、これまでの結果を考慮し、カキ属やモデル植物を対象とした形質転換系により分子機能の特定を進めるとともに、タンパク質としての機能に着目した実験も新たに展開する。同時に、順遺伝学的な観点からも、アレル間の多型性やアレル量に着目した実験を計画している。中国タイプの完全甘ガキ性については、これまでに特定した連鎖多型を活用し、選抜マーカーのアップデートを進めるとともに、新たな分離集団を用いて決定遺伝子座の特定を進める。「渋残り」形質については、これまでに収集した多様な育種系統のサンプルを活用し、高PA蓄積をもたらすメカニズムの共通性について解析する。さらに、高PA蓄積の鍵となるタンニン細胞の機能と分化過程の解明に向けて、レポーターアッセイやシングルセル解析等の実験を新たに計画している。また、これまでに特定した糖代謝とPA蓄積をリンクする因子についても、モデル植物等を用いた形質転換系によりその機能解析に着手することを予定している。

Report

(1 results)
  • 2023 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2024 2023

All Presentation (5 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results,  Invited: 1 results)

  • [Presentation] カキ果実の甘渋性を決定する候補遺伝子の同定2024

    • Author(s)
      藤原陽介・西山総一郎・尾上典之・松崎隆介・山根久代・米森敬三・田尾龍太郎
    • Organizer
      園芸学会令和6年度春季大会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] A genetic perspective of astringency in persimmon fruit: challenges and opportunities2024

    • Author(s)
      Soichiro Nishiyama
    • Organizer
      HZAU & KU Bilateral Workshop for Horticultural Plant Biology
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Haplotype-specific assembly of hexaploid persimmon genome using trio-binning approach2024

    • Author(s)
      Yosuke Fujiwara
    • Organizer
      HZAU & KU Bilateral Workshop for Horticultural Plant Biology
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Transcriptomic and cytological studies on tannin cell differentiation and development2023

    • Author(s)
      Yosuke Fujiwara, Soichiro Nishiyama, Noriyuki Onoue, Keizo Yonemori and Ryutaro Tao
    • Organizer
      The 4th Asian Horticulture Congress
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Identification of candidate genes for ASTRINGENCY controlling fruit astringency in hexaploid persimmon through genome assembly and SNP analysis2023

    • Author(s)
      Yosuke Fujiwara, Soichiro Nishiyama and Ryutaro Tao
    • Organizer
      NTU-KU Joint Symposium on Horticultural Science
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2023-04-18   Modified: 2024-12-25  

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