| Project/Area Number |
23K27423
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| Project/Area Number (Other) |
23H02732 (2023)
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Multi-year Fund (2024)
Single-year Grants (2023) |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 49070:Immunology-related
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
岸 裕幸 富山大学, 学術研究部医学系, 特別研究教授 (60186210)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 栄治 富山大学, 学術研究部医学系, 教授 (70459733)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥18,980,000 (Direct Cost: ¥14,600,000、Indirect Cost: ¥4,380,000)
Fiscal Year 2025: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
Fiscal Year 2024: ¥7,280,000 (Direct Cost: ¥5,600,000、Indirect Cost: ¥1,680,000)
Fiscal Year 2023: ¥8,970,000 (Direct Cost: ¥6,900,000、Indirect Cost: ¥2,070,000)
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| Keywords | T細胞受容体 / 抗原同定 / 主要組織適合遺伝子複合体 / ペプチド/MHC複合体 / cis相互作用 |
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| Outline of Research at the Start |
従来T 細胞はT 細胞上の抗原受容体（TCR）で標的細胞上の主要組織適合遺伝子複合体（MHC）分子に提示された抗原ペプチドを認識し活性化される。それに対し、我々は、1 個のT 細胞上でTCR とその抗原ペプチド/MHC分子 複合体が相互作用しT 細胞が活性化することを示し、それをcis 相互作用と命名した。本研究では抗原未知の標的細胞反応性TCRの抗原を、TCRと抗原ペプチド/MHC分子複合体のcis相互作用を用いて簡便に同定する方法を開発する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
従来T 細胞はT 細胞上の抗原受容体（TCR）で標的細胞上の主要組織適合抗原（MHC）分子に提示された抗原ペプチドを認識し活性化される。それに対し、我々は、1 個のT 細胞上でTCR とその抗原ペプチド/MHC 複合体が相互作用しT 細胞が活性化することを示し、それを「cis 相互作用」と命名した（Kobayashi, Kishi, Nat Biomed Eng, 2022）。本研究ではTCR とその抗原ペプチド/MHC 複合体の「cis相互作用」を用いて、抗原未知の標的細胞反応性TCR の抗原を簡便に同定する方法の開発を目的としている。具体的には、目的TCR と抗原提示MHC 分子を同時に発現させたレポーターT 細胞に、抗原cDNA を含む発現型cDNA ライブラリーを遺伝子導入し、抗原cDNA が導入されたレポーターT 細胞が「cis 相互作用」により活性化されるのを指標に抗原cDNA を簡便に同定する。2023年度は、内在性TCR陰性の既存のT細胞株を比較し、高反応性のT細胞株をレポーターT細胞の候補として選択した。さらに、SV40 Large T抗原をT細胞株に発現させることで、細胞内に導入したcDNAライブラリーが細胞内で増幅する工夫を行った。また、目的TCRの抗原がBW細胞に発現していないかを解析・検証している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2023年度は、内在性TCR陰性の既存のT細胞株を比較し、高反応性のT細胞株としてBW細胞をレポーターT細胞の候補として選択した。さらに、BW T細胞株にSV40 Large T抗原を発現させることで、細胞内に導入したcDNAライブラリーが細胞内で増幅するようにした。BW細胞に目的TCRの抗原が発現していると、MHC分子に抗原が提示され、TCRとのcis相互作用により、活性化されてしまい抗原のスクリーニングができないため、現在、BW細胞に目的TCRと抗原提示MHC分子を発現させ、活性化しないかどうかを検証している。
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| Strategy for Future Research Activity |
目的TCRを決めることができれば、
1) 目的TCRの標的細胞より発現型cDNAライブラリーを作製する。
2) 目的TCRと抗原提示MHC分子をいっしょに発現させたレポーターT細胞にcDNAライブラリーを導入し、目的TCRと抗原提示MHC分子との「cis相互作用」を用いて抗原cDNAを同定するためのプロトコールを確立していく。
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