| Project/Area Number |
23KJ2066
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 国内 |
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| Review Section |
Basic Section 41050:Environmental agriculture-related
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| Research Institution | Meijo University |
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Principal Investigator |
加藤 大志 名城大学, 農学研究科, 特別研究員(DC1)
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| Project Period (FY) |
2023-04-25 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥2,700,000 (Direct Cost: ¥2,700,000)
Fiscal Year 2025: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2024: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2023: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
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| Keywords | 白色腐朽菌 / lignin / methoxyhydroquinone / dimethoxyhydroquinone / 大気圧プラズマ |
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| Outline of Research at the Start |
植物バイオマスの主成分の1つであるリグニンを原料としたバイオリファイナリー技術の創成が試みられている。これまでの研究により、環境低負荷な大気圧プラズマ処理がリグニンの低分子化に有用であることが示された。また、リグニンを分解・資化することで知られる白色腐朽菌のリグニンおよびリグニン分解断片変換酵素の探索を行い、その酵素遺伝子を酵母に導入することでリグニン分解断片資化性酵母を創出する。大気圧プラズマ処理によるリグニンの断片化と、リグニン分解断片資化性酵母を組み合わせることで、リグニンを原料とした革新的なバイオエタノール生産を行う。
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| Outline of Annual Research Achievements |
リグニンは植物細胞壁中の難分解性芳香族化合物ポリマーで、環境中に存在する未利用バイオマスの一つであるため、バイオリファイナリーの原料として注目を集めている。申請者は大気圧プラズマ発生装置を用いて、リグニン及びリグニンを含む植物バイオマス（稲わら、木粉）にプラズマ照射を行い、リグニンの低分子化および分解を検証した。プラズマ照射後のサンプルはLC-MS、GC-MS、FT-IRで解析した。リグニン構成ユニット間のエーテル結合の開裂反応により様々なリグニンの分解断片が生成されたことから、プラズマ照射がリグニンの低分子化に有効であることが明らかとなった。
また、白色腐朽菌の細胞内外プロテオミクス解析の結果から、リグニンの分解断片を脱メチル化する酵素のほか、リグニンの分解断片を環開裂すると考えられる酵素も検出された。このリコンビナントタンパク質をリグニンフラグメントと反応させ解析した結果、新規のメトキシヒドロキノン及びジメトキシヒドロキノン開裂酵素(MHQD)であることが明らかとなった(Kato H et al., 2024 Appl. Environ. Microbiol.)。令和６年度は、プラズマ照射と発見したMHQDを組み合わせて、リグニンを原料としたバイオエタノール生産を試みている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
当初の計画としては脱メチル化酵素遺伝子を同定し、既知の環開裂酵素遺伝子を組合せてバイオエタノール生産に用いる予定だった。今年度、白色腐朽菌のリグニン分解断片代謝経路において、脱メチル化反応を経由せず環開裂を引き起こすメトキシヒドロキノン及びジメトキシヒドロキノン開裂酵素(MHQD)を発見し国際誌で公表した。これにより、遺伝子工学的なシステムの構築が大幅にシンプル化され、バイオエタノール生産の効率向上に寄与する可能性が高まった。
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| Strategy for Future Research Activity |
大気圧プラズマ処理によるリグニン構成ユニット間のエーテル結合の開裂で生成された産物を同定・定量する。また、バイオエタノール生産の効率向上を目指し、遺伝子工学的なシステムの構築に向けてMHQD遺伝子を導入する。
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