| Project/Area Number |
23KJ2200
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 国内 |
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| Review Section |
Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
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| Research Institution | National Defense Medical College |
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Principal Investigator |
諸星 和紀 防衛医科大学校(医学教育部医学科進学課程及び専門課程、動物実験施設、共同利用研究施設、病院並びに防衛, 防衛医学研究センター医療工学研究部門, 助教
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| Project Period (FY) |
2023-04-25 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | 補体C3 / 精子選抜 / 子宮内液 |
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| Outline of Research at the Start |
女性生殖器内の子宮内液に含まれる補体成分が殺精子作用を持つことを明らかにしているが、「排除される精子」および、卵に辿り着くことができる「排除されない精子」をどのようにして選抜しているかは明らかになっていない。本研究では補体成分によって排除される精子と排除されない精子が存在すると仮定し、子宮内における精子選抜メカニズムを明らかにすることを目的とする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では子宮内液に含まれる補体成分によって排除される精子と排除されない精子が存在すると仮定し、子宮内における精子選抜メカニズムの解明を目的としている。子宮内液には補体C3が多量に含まれることを確認しており、補体C3ノックアウトマウスを用いた実験からも精子選抜メカニズムに補体C3が重要であることが示唆されているが、詳細な機序は明らかになっていない。今年度は、「子宮内補体C3不活性化」に関する知見を得た。
子宮内液の補体C3状態を確認するため、子宮内液を含む培地中で精子を培養した後、培養液と精子表面のＣ３形態をウェスタンブロットにより確認した。その結果、補体C3の不活性型であるiC3bが精子表面でのみ検出された。不活性型であるiC3bが分解され産生されるC3dg、C3dは培養液中および精子表面の両方で検出された。このことから、精子には子宮内液の補体を不活性化する機序がある可能性が示唆された。
加えて、子宮内液における精子生存率の解析手法の検討にも着手した。これまでは培養後の精子をヘキスト、PI染色した後、蛍光顕微鏡下でカウントすることで精子生存率を測定していたが、解析効率を上げるためフローサイトメーターを用いた精子生存率の測定を検討した。その結果、蛍光顕微鏡下での測定と同程度の結果を得ることが可能となった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
令和5年度に防衛医科大学校へ所属が変わり、実験環境の変化や研究以外の業務が増加したため、計画段階で想定していた進度で実験を行うことが難しくなったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度はフローサイトメーターを用いた精子の生存率測定法を確立したため、これまで以上に正確かつ迅速に解析を行うことが可能になった。来年度は引き続き、補体成分による殺精子作用の詳細なメカニズムについても解析予定である。
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