エリオシトリンによるメタボリックシンドローム改善作用の網羅的メカニズム解析

Research Project

Project/Area Number	24590318
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Research Field	General pharmacology
Research Institution	Mie University
Principal Investigator	島田康人三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40378427)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	田中利男三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00135443) 西村有平三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30303720)
Project Period (FY)	2012-04-01 – 2015-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2012)
Budget Amount *help	¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000) Fiscal Year 2014: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000) Fiscal Year 2013: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000) Fiscal Year 2012: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
Keywords	肥満 / 脂質異常症 / ゼブラフィッシュ / DNAマイクロアレイ / バイオインフォマティクス / 薬理 / ゲノム
Research Abstract	これまで我々は食餌性肥満モデルゼブラフィッシュの構築に成功し（Oka et al. BMC Physiology, 2010）、それを用いたin vivoスクリーニングを行い、その成果を報告してきた(Tainaka et al, Lipid & Metabolism, 2011)。今回の研究提案は、抗肥満作用を示した化合物群のうち、まだその作用機序が不明であるエリオシトリン（eriocitrin）に注目し、その作用メカニズムを食餌性肥満ゼブラフィッシュ（in vivo）とヒト培養細胞（in vitro）の両面から網羅的に解明することを目的とした。具体的には、初年度はスクリーニング実験結果の再現性を確認した後、ゼブラフィッシュ由来脂肪組織における網羅的遺伝子発現解析からメカニズムを推定し、次年度はゼブラフィッシュとヒト培養細胞系（肝臓・脂肪前駆細胞）の両面からそのメカニズムのバリデーションを行う予定である。今年度は、食餌性肥満モデルへの２回の投与実験を行い、１回目実験での再現性確認を行った。エリオシトリンを経口投与した群では、体重増加への影響はなかったものの、血中脂質パラメーターが劇的に改善しており、肝臓脂肪蓄積が抑制されていた。２回目実験では上記発現解析用脂肪組織（内臓脂肪および肝臓）の網羅的遺伝子発現解析（DNAマイクロアレイ）を行った。Subnetwork enrichment analysisを用いたパスウェイ解析からそのメカニズムを推定した。さらにゼブラフィッシュから予想されたエリオシトリンの脂質異常症に対する治療メカニズムについて、ヒト培養細胞系を用いてバリデーション実験を行い、in vivoとin vitro、ゼブラフィッシュとヒトに共通した治療メカニズムを解明した。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 1: Research has progressed more than it was originally planned. Reason 当初の計画では、初年度は食餌性肥満ゼブラフィッシュを用いた実験解析、次年度は初年度で得られた候補遺伝子のリアルタイムPCRによる確認実験とヒト培養細胞を用いたメカニズム解明研究を予定していたが、これらの一部は初年度に実験完了している。さらに現在、これらの成果を論文投稿中であり、現段階では当初の計画以上の進展だと考えている。
Strategy for Future Research Activity	現段階では研究は計画以上に順調に進捗している。次年度は2年目だが3年目を意識した実験計画を立て、研究を推進していく。また論文・学会発表や知財化等、本研究成果を活発に公表し、社会への還元を行う予定である。
Expenditure Plans for the Next FY Research Funding	研究計画に対し、少し前倒しの進捗状況とはなっているが、特に研究費の使用計画について変更は不要であり、計画通りに執行していく。