T細胞マルチファンクション性評価による効果的な癌のTCR改変T細胞療法の開発

• Project/Area Number: 24590913
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Research Field: Gastroenterology
• Research Institution: Mie University
• Principal Investigator: 今井 奈緒子 三重大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (30550975)
• Project Period (FY): 2012
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2012)
• Budget Amount: ¥5,460,000 (Direct Cost: ¥4,200,000、Indirect Cost: ¥1,260,000); Fiscal Year 2014: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000); Fiscal Year 2013: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000); Fiscal Year 2012: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
• Keywords: がん免疫療法 / T細胞輸注療法 / TCR改変T細胞療法 / マルチファンクション性T細胞

Research Abstract

1有効な遺伝子導入ベクターの開発とその評価について
i)導入TCRの発現効率が高く、内因性TCRとのミスペアリングの少ないウイルスベクターの作製
すでに作製したマウス線維肉腫CMS5の腫瘍抗原である変異型MAPキナーゼを特異的に認識するTCR遺伝子を組み込んだエコトロピックレトロウイルスベクター(TCRベクター)にヒト用ベクターで開発した内在性TCRを特異的に阻害するsiRNAを同時に搭載することにより、導入TCRの発現を高め、内在性TCRとのミスペアリングを防ぐ技術(siTCRベクター)を組み合わせて、新たにマウス用siTCRベクターを作製した。このsiTcRベクターを導入したマウスリンパ球は、TcRベクターを導入したマウスリンパ球に比べ、内在性TCRが抑制されていることを確認した。
ii)上記ベクターのin vivo有効性評価
TcRベクター、およびsiTCRベクターを導入したマウスリンパ球を、cMs5腫瘍担癌マウスに輸注し、抗腫瘍効果を観察した。siTcRベクター導入リンパ球輸注群で抗腫瘍効果が強い傾向が認められた。また、TCR遺伝子導入リンパ球の抗腫瘍効果を増強する工夫として、輸注前の放射線照射や免疫抑制剤投与によるリンパ球減少性の処置について検討した。放射線照射とシクロフォスファミド投与の前処置を行うと、輸注細胞のin vivoにおける分裂とマルチファンクション性が増強し、抗腫瘍効果が増強することを確認した。
iii)上記ベクターのin vivo安全性評価
TCRベクター、およびsiTCRベクターの安全性を評価するために、これらのベクターを導入したマウスリンパ球を、リンパ球減少性前処置を施行したマウスに輸注し、長期にわたる観察を開始した。経時的にin vivoにおける輸注細胞の生存を、Flow cytometryおよびゲノムDNA中に含まれるレトロウイルスのコピー数で確認したところ、長期にわたる輸注細胞の生存が確認できた。
上記の内容は、日本遺伝子治療学会、日本がん免疫学会、日本免疫学会にて発表した。

Research Products

• [Journal Article] Limited expression of cancer-testis antigen in renal eell carcinoma patients. (2013)
  • Author(s): Soga N, Hori Y, Yamakado K, Ikeda H, Imai N, Kageyama S, Nakase K, Yuta A, Hayashi N, Shiku H, S
  • Journal Title: Mol. Clin. Oncol. Volume: 1 Issue: 2 Pages: 326-330
  • DOI: 10.3892/mco.2012.40
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] T-cell receptor gene therapy targeting melanoma-associated antigen-A4 inhibits human tumor growth in non-obese diabetic/SCID/γc^<null> mice (2012)
  • Author(s): Shirakura Y, Mizuno Y, Wang L, Imai N, Amaike C, Sato E, Ito M, Nukaya I, Mineno J, Takesako K, Ikeda H, Shiku H
  • Journal Title: Cancer Science Volume: 103 Issue: 1 Pages: 17-25
  • DOI: 10.1111/j.1349-7006.2011.02111.x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] がん精巣抗原(MAGE-4, NY-ESO-1)を標的とする免疫療法 (2012)
  • Author(s): 今井奈緒子、池田裕明、珠玖洋
  • Journal Title: 日本臨床 Volume: 70 Pages: 2125-2129
• [Presentation] Evaluation of vector construction of TCR gene therapy for cancer utilizing a novel mouse model. (2012)
  • Author(s): Imai N, Kawamura A, Yamane M, Wang L, Shirakura K, Shirakura K, Amaike C, Goto Y, Okamoto S, Mineno J, Takesako K, Ikeda H, Shiku H.
  • Organizer: 第41回日本免疫学会学術集会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 2012-12-06
• [Presentation] In vivo persistence of adoptively transferred TCR gene-transduced lymphocytes in patients with esophageal cancer. (2012)
  • Author(s): Kageyama S, Ikeda H, Miyahara Y, Imai N, Ishihara M, Saito K, Katayama N, Ueda S, Tomura D, Nukaya I, Mineno J, Takesako K, Shiku H.
  • Organizer: 第71回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 札幌(招待講演)
  • Year and Date: 2012-09-19
• [Presentation] 遺伝子改変T細胞の臨床応用 (2012)
  • Author(s): 池田裕明、影山慎一、宮原慶裕、今井奈緒子、石原幹也、岡本幸子、糠谷育衛、峰野純一、竹迫一任、珠玖洋
  • Organizer: 第16回日本がん免疫学会総会
  • Place of Presentation: 札幌(招待講演)
  • Year and Date: 2012-07-28
• [Presentation] T細胞レセプター遺伝子導入リンパ球輸注療法のマウスモデルによる解析 (2012)
  • Author(s): 今井奈緒子、河村あゆみ、山根真妃子、王立楠、後藤優美、岡本幸子、峰野純一、竹迫一任、池田裕明、珠玖洋
  • Organizer: 第16回日本がん免疫学会総会
  • Place of Presentation: 札幌
  • Year and Date: 2012-07-26
• [Presentation] Clinical application of gene-modified lymphocytes for cancer immunotherapy. (2012)
  • Author(s): Ikeda H, Kageyama S, Imai N, Miyahara Y, Ishihara M, Kawamura A, Yamane M, Tomura D, Okamoto S, Nukaya I, Mineno J, Takesako K, Katayama N, Shiku H.
  • Organizer: 第18回日本遺伝子治療学会学術集会
  • Place of Presentation: 熊本(招待講演)
  • Year and Date: 2012-06-29
• [Presentation] Evaluation of "siTCR" vectors using novel mouse model of T cell receptor gene therapy. (2012)
  • Author(s): Imai N, Kawamura A, Yamane M, Wang L, Shirakura K, Shirakura K, Amaike C, Goto Y, Okamoto S, Mineno J, Takesako K, Ikeda H, Shiku H.
  • Organizer: 第18回日本遺伝子治療学会学術集会
  • Place of Presentation: 熊本
  • Year and Date: 2012-06-29
• [Remarks]
  • URL: http://shikuken.jp