| Project/Area Number |
24K09264
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 42020:Veterinary medical science-related
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
七戸 新太郎 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (80737148)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
渡辺 登喜子 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60557479)
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| Project Period (FY) |
2024-04-01 – 2027-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2026: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | H5N1高病原性鳥インフルエンザウイルス / 病原性 / 哺乳類 / 高病原性鳥インフルエンザウイルス / 神経 |
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| Outline of Research at the Start |
2021年以降、それまで流行の主流であったH5N6とH5N8高病原性鳥インフルエンザウイルス (HPAIV)に代わって、H5N1 HPAIVが欧米、アジア、アフリカなど世界中に拡大し、甚大な被害をもたらしている。野鳥や家禽のみならず、野生の哺乳類への感染・死亡例も多数報告されており、ヒトへの伝播およびパンデミックが懸念されている。本研究では、ヒトの細胞やマウスモデルを用いて、近年流行しているH5N1 HPAIVの性状解析を行う。また、感染動物で神経症状が頻発することから、神経病原性が高まっている懸念があり、その分子基盤を明らかにすることを目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
H5N1高病原性鳥インフルエンザウイルス（HPAIV）は近年、世界的に急速な拡大を続けており、野鳥や家禽に加えて野生哺乳類への感染例および死亡例も多数報告されている。特に、従来は主に鳥類でみられていた感染が、哺乳類に広がりつつあることは、公衆衛生およびウイルス進化の観点から極めて重大な懸念材料である。本研究では、近年流行しているClade 2.3.4.4bに属するH5N1 HPAIVが、哺乳類において高い増殖性および神経病原性を獲得している可能性に着目し、その分子メカニズムの解明を目的としている。
2022年から2023年にかけて北海道で分離されたClade 2.3.4.4b H5N1 HPAIV 6株を用い、マウスモデルにおける病原性評価を実施した。その結果、A/Ezo red fox/Hokkaido/1/2022（H5N1；Fox/Hok/22）は半数致死量（LD50）が3 PFUと非常に高い病原性を示したのに対し、他の5株はいずれもFox/Hok/22株と比較して病原性が低いことが判明した。これにより、Fox/Hok/22株が哺乳類への高病原性を示す特徴的なウイルスである可能性が示唆された。
また、これらのウイルスについて、DF-1細胞およびA549細胞にそれぞれウイルス由来のポリメラーゼタンパク質を発現させ、ルシフェラーゼレポーター系を用いたMinigenomeアッセイにより、ポリメラーゼ活性の比較解析を進めている。
さらに、Fox/Hok/22株の神経病原性を評価する目的で、感染マウスの脳を感染後6日目に採取し、病理組織学的解析を実施した。その結果、明瞭な細胞変化は少ないものの、ウイルスNP抗原は主にグリア細胞に検出された。現在、免疫染色やマーカー解析を含む詳細な病理学的評価を継続中である。また、神経病原性に寄与する遺伝子の同定を目指し、リバースジェネティクス法を用いた組換えFox/Hok/22ウイルスの作出も並行して進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
近年、国内で分離されたH5N1 HPAIVについてマウスモデルを用いて病原性を評価し、Fox/Hok/22株との比較に使用する低病原性株を選定した。現在、これらの株に対し、Minigenome系を用いたポリメラーゼ活性の解析を進めている。
Fox/Hok/22株の神経病原性を評価する目的で実施している感染マウスの病理解析は順調に進行しており、現在は複数の条件下でより詳細な解析を実施中である。一方で、神経病原性に寄与する遺伝子の同定を目的とした組換えFox/Hok/22株の作出については、一部作業に遅れが生じている。
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| Strategy for Future Research Activity |
組換えウイルスの作出にやや遅れが生じているため、今後はその作出作業に重点的に取り組む予定である。一方、ポリメラーゼ活性の測定や分離株を用いた病理解析は順調に進行しており、引き続きこれらの解析を継続する。
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